hbvdna hbvpres及hbeag聯(lián)合

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1、HBVDNAHBVPreS及HBeAg聯(lián)合［摘要］目的：了解HBVDNA、HBVPreS1及HBeAg與乙肝病毒復(fù)制的關(guān)系，分析其在慢性乙型肝炎(CHB)診斷與治療中的臨床價(jià)值。方法：采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISa)法和熒光定量PCR法對(duì)300例CHB患者血清進(jìn)行HBVDNA、HBVPreS1、HBeAg及肝功能檢測(cè)，分析其相互關(guān)系，評(píng)價(jià)其聯(lián)合檢測(cè)的價(jià)值。結(jié)果：HBVDNA及HBVPreS1陽(yáng)性率分別為76%和73%，P>0.05，HBeAg陽(yáng)性率為67%，三者一致性較好。同時(shí)HBeAg陽(yáng)性組及陰性組差異均無(wú)顯著性，P>0.05，ALT測(cè)定結(jié)果顯示，ALT正常組中

2、PreS1及HBVDNA陽(yáng)性檢出率分別為30%和85%，P<0.01。結(jié)論：HBVDNA、HBVPreS1、HBeAg均能反映CHB患者病毒復(fù)制情況。HBVPreS1與肝臟功能損害密切相關(guān)，上述各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)合ALT聯(lián)合檢測(cè)可以更好的反映病毒復(fù)制的真實(shí)情況，對(duì)感染狀態(tài)及病變活動(dòng)性做出準(zhǔn)確的分析，為臨床提供更高的參考價(jià)值?！　。坳P(guān)鍵詞］DNA；PreS1；乙型肝炎；病毒復(fù)制　　HBV感染時(shí)，宿主對(duì)HBV的免疫應(yīng)答與病毒清除和發(fā)病機(jī)制有關(guān)。主要是通過(guò)CTL、Th、巨噬細(xì)胞、NK及其他細(xì)胞因子的活化，導(dǎo)致免疫病理?yè)p害，并清除病毒而肝功能出現(xiàn)反復(fù)異常。對(duì)于慢性乙型肝炎(CHB)，其預(yù)后主要取

3、決于病變活動(dòng)性的程度和持續(xù)時(shí)間?？共《局委煹幕A(chǔ)是抑制嗜肝DNA病毒復(fù)制，同時(shí)抑制感染細(xì)胞中靶抗原的表達(dá)，以緩解炎癥應(yīng)答，但HBV運(yùn)行的是保守復(fù)制，在停藥后又可能恢復(fù)復(fù)制［1］，因此，判定病毒的復(fù)制情況，對(duì)感染狀態(tài)和病變活動(dòng)性做出分析，在CHB的診斷與臨床治療中乃預(yù)后都具有重大意義?！　?對(duì)象和方法　　1.1標(biāo)本300份CHB患者血清均選自我院傳染科肝病門診及住院患者，其診斷均符合《乙型病毒性肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則》(衛(wèi)生部GB159901995)的診斷標(biāo)準(zhǔn)?！　?.2試劑和儀器HBVDNA采用熒光定量PCR法，試劑盒由上海復(fù)星公司提供，儀器：上海復(fù)星公司SLAN自動(dòng)熒光PCR儀，Pre

4、S1和HBeAg采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)法雙抗體夾心法，試劑分別由上海阿爾法生物技術(shù)有限公司和北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)有限公司提供，ALT采用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，試劑由上海復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供，儀器：日本奧林巴斯Au640?！　?.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用χ2檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有顯著性意義?！　?結(jié)果　　2.1HBVDNAPCR定量分析及HBVPreS1AgELISA法定性測(cè)定結(jié)果HBVDNA檢測(cè)下限為1×103copies/ml，結(jié)果顯示，在300例血清中HBVDNA陽(yáng)性者228例，HBVPreS1Ag陽(yáng)性者219例。同時(shí)HBVDNA(+)/HBVPre

5、S1Ag()者24例，HBVDNA()/HBVPreS1Ag(+)者6例，二者陽(yáng)性檢出率分別為76%和73%，差異無(wú)顯著性，P>0.05?！　?.2HBeAg檢測(cè)結(jié)果顯示陽(yáng)性者201例，陰性者99例，陽(yáng)性檢出率為67%，HBeAg、HBVDNA、HBVPrS1Ag三者檢測(cè)結(jié)果關(guān)系見表1。HBeAg(+)與HBeAg()組差異均無(wú)顯著性，P＞0.05?！　”?CHB患者血清HBeAg、HBVDNA、HBVPreS1Ag三者檢測(cè)結(jié)果關(guān)系（略）　　2.3300份血清ALT測(cè)定結(jié)果與HBVDNA及HBVPreS1關(guān)系其中ALT()組HBVDNA(+)與PreS1(+)間

6、差異顯著，P<0.05，見表2。　　表2300份血清ALT測(cè)定結(jié)果與HBVDNA及HBVPreS1關(guān)系（略）　　3討論　　HBVDNA通常被認(rèn)為是診斷乙肝、提示病毒復(fù)制的金標(biāo)準(zhǔn)［2］，基于PCR的高靈敏性，可以檢測(cè)出極低水平的病毒復(fù)制。PreS1蛋白是因HBV基因組開放讀碼框S區(qū)編碼合成的病毒蛋白，是構(gòu)成HBV的外膜蛋白成分，它具有很高的免疫原性，不僅與病毒復(fù)制密切相關(guān)，而且在感染宿主細(xì)胞過(guò)程中起著關(guān)鍵作用。在急性HBV感染時(shí)，PreS1抗原及其抗體同時(shí)反映病變的活動(dòng)和對(duì)病毒的清除，若HBVPreS1Ag持續(xù)存在將發(fā)展至慢性并可能導(dǎo)致肝功能損害［3］。本研究對(duì)300例CHB患者血

7、清同時(shí)做HBVDNAPCR定量分析及HBVPreS1AgELISA法定性分析。二者陽(yáng)性檢出率分別為76%和73.7%，無(wú)差異有顯著性(P>0.05),兩種檢測(cè)方法有較好的一致性，同時(shí)，也發(fā)現(xiàn)二者存在一定的交叉性和交叉陽(yáng)性現(xiàn)象。因此，二者可協(xié)同檢測(cè)相互補(bǔ)充。HBeAg是HBV核心成分，是臨床上判斷病毒復(fù)制及傳染性的重要血清標(biāo)志物。本研究中，HBeAg(+)組中HBVDNA及HBVPreS