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1、中藥復(fù)蘇飲對嚴(yán)重膿毒癥患者外周血單核細(xì)胞TLR2【摘要】觀察中藥復(fù)蘇飲對嚴(yán)重膿毒癥患者外周血單核細(xì)胞TLR2、TLR4基因表達(dá)的影響?！痉椒ā繉ⅲ矗袄颊唠S機(jī)分為復(fù)蘇飲組（治療組）和安慰劑組（對照組）各２０例，兩組均采用西醫(yī)常規(guī)監(jiān)護(hù)治療，治療組配合使用中藥復(fù)蘇飲（由工人牛黃、西洋參、黃芪、生大黃、生石膏、麥冬、丹參、赤芍、猴棗等組成），而對照組則加用安慰劑。另選?。保得】刁w檢者作為正常組。采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR)法測定治療前及治療第３、第７天外周血單核細(xì)胞TLR2、TLR4 m
2、RNA表達(dá)的變化?！窘Y(jié)果】治療前兩組患者單核細(xì)胞TLR2、TLR4mRNA表達(dá)顯著低于正常組（Ｐ＜０.０５)。對照組于治療第７天TLR2、TLR4 mRNA表達(dá)開始明顯升高（Ｐ＜０.０1);治療組于治療第３天TLR2、TLR4 mRNA表達(dá)即明顯回升，且治療后各個觀察點的基因表達(dá)明顯高于對照組（Ｐ＜０.０５);但兩組的ＴＬＲ２、ＴＬＲ４ mRNA表達(dá)均未達(dá)到正常組水平（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜０.０1）?！窘Y(jié)論】中藥復(fù)蘇飲可明顯上調(diào)外周血單核細(xì)胞TLR4、TLR2 mRNA的表達(dá)，降低嚴(yán)重膿毒癥患者的
3、病死率。【關(guān)鍵詞】膿毒癥中藥療法復(fù)蘇飲治療應(yīng)用Toll樣受體膿毒癥是一種全身感染性疾病。以往研究認(rèn)為，多種病原微生物的細(xì)胞壁成分［如革蘭陰性菌的內(nèi)毒素（LPS），革蘭陽性菌的肽聚糖（PGN)和脂磷壁酸（LTA)等］均可通過與細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)受體CD14結(jié)合，誘導(dǎo)全身炎癥反應(yīng)，從而導(dǎo)致膿毒癥休克甚至多臟器功能衰竭綜合征（ＭＯＤＳ）。然而，由于CD14本身是一種膜錨蛋白（缺乏跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)），不能直接向細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)ＬＰＳ信號，新近研究發(fā)現(xiàn)，Toll樣受體（Tolllikereceptors,TLRs
4、)可能是ＬＰＳ跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的門戶蛋白［１］。目前，已克隆的人類的TLRs成員有１０個（即TLR1～10)，其中TLR2和TLR4的作用尤為顯著。TLRs如同天然免疫的眼睛，監(jiān)視與識別各種不同的病原特異性分子模式（pathogenspecificmolecularpatterns,PAMPs)，激活ＮＦκB信號通路，啟動一系列免疫炎癥反應(yīng)，最終達(dá)到清除入侵的病原微生物的目的，在天然免疫中發(fā)揮重要的抗感染免疫功能。因此，以TLRs信號受體為靶向，可能為膿毒癥的防治帶來新的希望。本文通過觀察中藥復(fù)
5、蘇飲對嚴(yán)重膿毒癥患者外周血單核細(xì)胞TLR2、TLR4基因表達(dá)的影響，從受體角度初步探討中藥在抗感染免疫中的作用?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。1資料與方法1.1臨床資料1.1.1病例選擇及分組所選病例為２００４年４月至２００５年１１月廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院ICU收治的嚴(yán)重膿毒癥的患者，確診２４h內(nèi)被納入研究。但需除外以下情況：①年齡小于１８歲;②妊娠及哺乳期婦女;③前６個月內(nèi)接受化療者;④目前或前３個月內(nèi)接受皮質(zhì)激素或其他免疫抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑治療者;⑤有免疫系統(tǒng)疾病者;⑥人類免疫缺陷病毒（HIV）陽性
6、者;⑦終末期肝功能或腎功能衰竭者;⑧入院２4h內(nèi)死亡者。符合納入標(biāo)準(zhǔn)的患者共４３例，在取得患者或家屬知情同意后被納入研究，其中３例因經(jīng)濟(jì)原因自動出院而被剔除，最終入選患者共４０例。入選患者依據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為西醫(yī)常規(guī)治療加復(fù)蘇飲組（治療組）和西醫(yī)常規(guī)治療加安慰劑組（對照組）各２０例。治療組男１０例，女１０例;年齡最小２０歲，最大７５歲，平均（６６.６±4.8）歲;對照組男１１例，女９例;年齡最小２３歲，最大７５歲，平均（６４.８±５.１）歲;APACHE Ⅱ評分：治療組為（２３.７１±７.４９）
7、分，對照組為（２３.８０±６.６０）分。同期在健康體檢者中隨機(jī)抽取１５名自愿者作為正常對照組（正常組），其中男８例，女７例;年齡最?。玻矚q，最大７０歲，平均（６２.８±６.７）歲。３組在年齡、性別方面均無顯著性差異（Ｐ＞０.０５)，且治療組和對照組的APACHEⅡ評分亦無顯著性差異（Ｐ＞０.０５),具有可比性。1.１.２診斷標(biāo)準(zhǔn)按照２００１年國際膿毒癥定義會議提出的膿毒癥及嚴(yán)重膿毒癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)［１］。1.2治療方法所有入選患者均給予重癥監(jiān)護(hù)、抗炎、營養(yǎng)支持、維持血流動力學(xué)穩(wěn)定、呼吸機(jī)輔助呼吸等西
8、醫(yī)常規(guī)治療。治療組在西醫(yī)常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用中藥復(fù)蘇飲（廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院制劑室提供，由人工牛黃、西洋參、黃芪、生大黃、生石膏、麥冬、丹參、赤芍、猴棗等組成，諸藥研末分裝膠囊，0.4g/粒），品服或涼開水化開后鼻飼，每日3次。均給對照組在西醫(yī)常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用安慰劑（廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院制劑室提供，由淀粉色素制成，大小、顏色和外包裝與復(fù)蘇飲完全一致），用法同復(fù)蘇飲。兩組均以治療７天為１個療程，以２８天計算患者總病死率。1.3實驗方法所有患者被納入研究時（治療前）、治療第３天、第７天各
