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《酒石酸銻鉀對人胃癌細胞體外增殖和凋亡的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、酒石酸銻鉀對人胃癌細胞體外增殖和凋亡的影響：徐少勇，郭光云，王家寧，黃永章【關(guān)鍵詞】胃腫瘤 【Abstract】AIM:Toexplorethetherapeuticeffectsofantimonialsonsolidtumorbyobservingtheeffectsofpotassiumantimonyltartrate（PAT）ontheproliferationandapoptosisofhumangastriccancerSGC7901cellsinvitro.METHODS:MT
2、TmethodeasurethelevelsoftheproliferationofSGC7901cellsintervenedetry.RESULTS:PATinhibitedSGC7901cellgroedependentmanner.PATdisplayedprominentinhibitoryeffectsol/Lat72hours,andthegroatincondensationandnuclearfragmentationicroscopeinthecellsstainedol/L
3、PATat48hours,reaching35.2%.paredonypotassiumtartrate;stomachneoplasms;celldivision;apoptosis 【摘要】目的：通過觀察酒石酸銻鉀（PAT）在體外對人胃癌SGC7901細胞增殖和凋亡的影響，探討重金屬銻劑對實體瘤的治療作用，為PAT用于臨床治療胃癌提供實驗依據(jù)及理論基礎(chǔ).方法：采用MTT法檢測不同濃度PAT對人胃癌SGC7901細胞的生長增殖的影響；應(yīng)用流式細胞術(shù)和Hoechst33258染色后熒光顯微鏡檢
4、測細胞凋亡.結(jié)果：5,10,20,40μmol/LPAT能明顯抑制胃癌細胞增殖，抑制作用呈時間和劑量依賴性.20,40μmol/LPAT作用72h細胞的生長抑制率分別是54.1%和66.6%；Hoechst33258染色顯示PAT作用后，細胞核出現(xiàn)明顯的凋亡形態(tài)學(xué)改變；流式細胞儀檢測到凋亡峰，凋亡率以40μmol/L作用48h最大,達35.2%.同時G2/M期細胞明顯增多，以對照組的5.4%,增至24.6%.結(jié)論：PAT能抑制SGC7901細胞增殖并誘導(dǎo)細胞凋亡. 【關(guān)鍵詞】酒石酸銻鉀；胃腫瘤
5、；細胞分裂；脫噬作用 0引言 胃癌晚期預(yù)后差，長期存活率低［1，2］，5a生存率僅15%~25%［3］.大多數(shù)胃癌患者診斷時已到進展期，需接受化療，但常規(guī)化療藥物的效果不理想.因此，尋找新的藥物有重要臨床意義.最近的研究發(fā)現(xiàn)微摩爾濃度的銻劑［酒石酸銻鉀（potassiumantimonyltartrate,PAT）、三氧化二銻］能顯著抑制白血病細胞、惡性B淋巴細胞生長，而對正常的淋巴細胞無影響，被認(rèn)為是一個潛在的、有價值的治療血液系統(tǒng)惡性腫瘤的藥物［4-7］.但銻劑對其他實體瘤細胞的作用尚不
6、清楚.我們選用不同濃度的酒石酸銻鉀作用于人胃癌SGC7901細胞，觀察其對胃癌細胞增殖和凋亡的影響. 1材料和方法 1.1材料 PAT購自SigmaAdrich公司,用三蒸水配制成1×10-2mol/L儲存液.使用時用RPMI1640培養(yǎng)基配成工作濃度;Hoechst33258,PI（碘化丙啶）,RNase購自Sigma公司;四甲基偶氮唑鹽(MTT)購自北京華美公司；RPMI1640培養(yǎng)基、小牛血清購自Gibco公司；使用OlympusBX51熒光顯微鏡∑960酶標(biāo)儀CoulterEpic
7、sXL流式細胞儀.SGC7901人胃癌細胞株購自中科院上海細胞生物所.用RPMI1640培養(yǎng)液（含100mL/L小牛血清,100ku/L青霉素和鏈霉素）37℃,50mL/L的CO2孵箱中常規(guī)培養(yǎng). 1.2方法 1.2.1ＭＴＴ法檢測細胞增殖取對數(shù)生長期細胞用2.5g/L胰蛋白酶消化成單細胞懸液，調(diào)整細胞密度為3×107/L，接種于96孔培養(yǎng)板，每孔加200μL的細胞懸液,細胞培養(yǎng)24h貼壁后，加入PAT.設(shè)陰性對照組和不同濃度PAT實驗組（5,10,20,40μmol/L）.每組均設(shè)立4個復(fù)
8、孔.培養(yǎng)24,48,72h每孔加入5g/LMTT（PBS配制）20μL再培養(yǎng)4h，吸棄上清，加入DMSO200μL，震蕩10min.于酶標(biāo)儀490nm處測量吸光度A值.上述實驗重復(fù)3次，取其均值.計算細胞增殖的抑制率=（1-實驗組A值）/對照組A值×100%. 1.2.2Hoechst33258染色觀察細胞核變化取指數(shù)生長期的細胞，以2×109/L密度接種于含消毒蓋玻片的6孔板中,培養(yǎng)24h細胞貼壁后加入上述濃度的PAT.24,48h后吸盡培養(yǎng)液，加入固定液(甲醇V∶冰醋酸V＝3∶1)0.5m
