丙型肝炎病毒核心抗原的轉(zhuǎn)位表達(dá)與肝（癌）細(xì)胞凋亡

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1、丙型肝炎病毒核心抗原的轉(zhuǎn)位表達(dá)與肝（癌）細(xì)胞凋亡【關(guān)鍵詞】,C型肝炎病毒屬　　關(guān)鍵詞:C型肝炎病毒屬;癌，肝細(xì)胞;蛋白表達(dá)　　摘要:目的探討丙型肝炎病毒核心抗原的轉(zhuǎn)位表達(dá)與肝（癌）細(xì)胞凋亡的關(guān)系及其意義.方法采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)HCV核心區(qū)抗原和NS3區(qū)抗原在肝硬變（LC）和肝細(xì)胞肝癌（HCC）組織中的分布，同時(shí)對(duì)連續(xù)切片進(jìn)行原位凋亡檢測(cè)并計(jì)算凋亡指數(shù).結(jié)果HCV核心區(qū)抗原定位于肝細(xì)胞或肝癌細(xì)胞的胞質(zhì)或胞核中，在LC組織中，核心抗原呈彌漫或灶狀分布于肝細(xì)胞胞質(zhì)，偶見(jiàn)胞核陽(yáng)性的肝細(xì)胞，陽(yáng)性率為60.7%;核心抗

2、原在癌組織中以核陽(yáng)性分布為主，陽(yáng)性率為37.6%，癌旁肝組織以胞質(zhì)陽(yáng)性為多見(jiàn).HCC中HCV核心抗原的核陽(yáng)性率（75.0%，15例/20例）明顯高于其在LC（17.7%，6例/34例）及癌旁肝組織（11.8%，2例/17例）中的陽(yáng)性率（P<0.05）;在HCC中，HCV核心抗原核轉(zhuǎn)位表達(dá)的癌組織的AI值（0.174±0.093）顯著低于胞質(zhì)陽(yáng)性的癌組織（0.512±0.113，P<0.01）.HCVNS3區(qū)抗原定位于肝細(xì)胞或肝癌細(xì)胞的胞質(zhì)中，在LC和HCC組織中的陽(yáng)性率分別為53.6%和39.6%.未

3、發(fā)現(xiàn)HCVNS3區(qū)抗原的表達(dá)與肝（癌）細(xì)胞凋亡的相關(guān)性.結(jié)論HCV感染與我國(guó)LC，HCC的發(fā)生關(guān)系密切，HCV核心抗原在肝癌組織中常發(fā)生核轉(zhuǎn)位表達(dá)，這種核轉(zhuǎn)位表達(dá)抑制了腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡，從而促進(jìn)腫瘤組織的進(jìn)一步惡化.　　Keya，hepatocellular;proteinexpression　　Abstract:AIMToanalyseexpressionofHCVcoreproteinandapoptosisinformalin-fixedparaffin-embeddedtissuesoflivercirr

4、hosisandhepatocellularcarcinoma.METHODSImmunohistochemistrymethodmunohistochemistryshoainlylocalizedinthecytoplasmofhepatocytes.ISELshoightinitiatedapoptosis.Incanceroustissues，translocatedexpressionofHCVcoreproteinorcells.AccordingtoISELonserialsec-tions，all

5、thesepositivetumorcellshardlyexhibitedapoptosis（AIfornuclearpositive，0.174vsAIforcytoplasmicposi-tive，0.152，P<0.01）.HCVNS3antigenainlydis-tributedinthecytoplasmofhepatocytes.ayexpressinthenucleioftumorcell.Translo-catedexpressionofHCVcoreproteinmayinhibita

6、poptosisinthetissueofhepatocellularcarcinoma.　　0引言　　自1989年Choo等克隆出丙型肝炎病毒（HCV）以來(lái)，各國(guó)學(xué)者從分子病理和免疫病理的角度尋找HCV與宿主相互作用的關(guān)系，進(jìn)行HCV特異性抗原的表達(dá)與HCV相關(guān)性肝疾病之間關(guān)系的研究，證實(shí)HCV感染是肝硬變（LC）、肝細(xì)胞肝癌（HCC）發(fā)生的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素［1］.肝（癌）細(xì)胞的凋亡與HCC的發(fā)生和發(fā)展有著密切的聯(lián)系.研究表明HCV的感染與肝（癌）細(xì)胞的凋亡有關(guān)［2］.HCV核心區(qū)和NS3區(qū)基因編碼的蛋白具有較

7、高的保守性.我們采用ABC法，對(duì)HCV核心區(qū)和NS3區(qū)抗原在LC，HCC組織中進(jìn)行定位研究，進(jìn)一步探討HCV與HCC發(fā)生的關(guān)系.　　1材料和方法　　1.1材料均為我院1994/1996年外科手術(shù)切除標(biāo)本，其中LC56例，HCC53例，45例帶有癌旁肝組織.所有標(biāo)本經(jīng)100mL・L-1福爾馬林固定、脫水，常規(guī)石蠟包埋，制備5μm厚連續(xù)切片，APES膠（Sigma，USA）對(duì)玻片進(jìn)行處理以防脫片.HCV核心區(qū)抗原2B株單克隆抗體由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)所惠贈(zèng).HCVNS3區(qū)抗原單克隆抗體由北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)

8、院肝病研究所惠贈(zèng).　　1.2方法采用VectorLab公司生產(chǎn)的ABC試劑盒對(duì)石蠟切片經(jīng)常規(guī)脫蠟至水后，進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，根據(jù)操作手冊(cè)進(jìn)行，并做對(duì)照實(shí)驗(yàn).連續(xù)切片進(jìn)行HE染色.原位凋亡檢測(cè)技術(shù)采用武漢博士德公司生產(chǎn)的原位末端標(biāo)記試劑盒，根據(jù)操作手冊(cè)和已有文獻(xiàn)［3］進(jìn)行，顯微鏡觀察，對(duì)福爾馬林固定石蠟包埋的組織片采用蛋白酶K（20mg・L-1，15min，