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1、養(yǎng)顏祛斑顆?？笵【摘要】：目的探討內(nèi)服養(yǎng)顏祛斑顆?？蛊つw衰老作用及機(jī)制。方法昆明種雌性小鼠每日背部皮下注射D-半乳糖1000mg/(kg·d)造成小鼠衰老模型,同時按高、中、低劑量(6.68、3.34、1.67g/kg)分別灌服養(yǎng)顏祛斑顆粒,42d后測定小鼠背部皮膚組織勻漿中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性及血清中雌二醇(E2)的含量,并考察對小鼠子宮、卵巢、皮膚干重、濕重及水?dāng)z取量的影響。結(jié)果與衰老模型組比較,養(yǎng)顏祛斑顆粒給藥組小鼠皮膚中GSH-Px活力及E2含量明顯升高,尤以中劑量為最佳(P<0.05,P<0.01),而對小鼠子宮、卵巢、皮膚干重、濕重及水?dāng)z取量有增加
2、趨勢。結(jié)論養(yǎng)顏祛斑顆粒對D-半乳糖所致衰老小鼠皮膚有明顯的抗衰老作用。【關(guān)鍵詞】養(yǎng)顏祛斑顆?！∑つw衰老 D-半乳糖 小鼠 Abstract：ObjectiveToinvestigatethemechanismofanti-agingeffectofYangyanQubanparticlesontheagingskin.Methodsg/(kg·d)byscadministrationtothefemalemicefor42days,theagingmodelicereceivedYangyanQubanparticles(6.68,3.34,1.67g/kg)byigadministra
3、tionatthesametimeofinjectingD-galactose.Forty-tplesineglutathioneperoxidase(GSH-Px)activityandserumestradiol(E2)contents,andtheinfluenceonuterus,ovary,skindryandountofodelmice,theGSH-PxactivityandE2contentsinthemicetreatedarkably,especiallythemediumisthebestdose(P<0.05,P<0.01),ice’sskin. Ke
4、yice 養(yǎng)顏祛斑顆粒是采用西部道地藥材制成的純中藥制劑,臨床用于治療黃褐斑、雀斑等色素沉著性疾病療效確切,大部分患者使用后還有面部皺紋減少、皮膚白潤光澤、彈性增加的效果。為探討?zhàn)B顏祛斑顆粒延緩皮膚衰老的作用機(jī)理,本實(shí)驗(yàn)在D-半乳糖所致小鼠衰老模型基礎(chǔ)上,觀察了其對皮膚衰老的影響?，F(xiàn)報(bào)道如下?！ ?實(shí)驗(yàn)材料 1.1動物 選用3月齡昆明種雌性小鼠100只,體重(30±2)g,蘭州生物制品研究所提供(動物合格證號：醫(yī)動字第14-001號),標(biāo)準(zhǔn)飼料飼養(yǎng)?！ ?.2藥物與試劑 養(yǎng)顏祛斑顆粒(由女貞子、當(dāng)歸等組成),甘肅中醫(yī)學(xué)院中藥教研室提供；維生素E(上海東海制藥廠,批號070103)；D
5、-半乳糖(上海伯奧生物科技有限公司,批號070110)；硫化鈉(萊陽市雙雙化工有限公司,批號051227)；谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)試劑盒和考馬斯亮藍(lán)蛋白檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所)；雌二醇(E2)試劑盒(北京科美東雅生物科技有限公司)。 1.3儀器 VIS-7220可見分光光度計(jì)(北京瑞利分析儀器公司生產(chǎn))；64-1電動離心沉淀器(江蘇省響水縣醫(yī)療器械廠生產(chǎn))；XK96-A快速混勻器；H.H.S21-4恒溫水浴鍋(上海醫(yī)療器械五廠生產(chǎn))；L/10g)；治療組分別灌胃養(yǎng)顏祛斑顆粒,為臨床用量的10、20、40倍,即高(6.68g/kg)、中(3.34g/kg)、低(1
6、.67g/kg)3個劑量組；陽性對照組灌胃維生素E0.05g/kg。除正常對照組外,各組每日頸背部皮下注射10%D-半乳糖0.1mL/10g,給藥標(biāo)示量為1000mg/(kg·d)[2]。各組每日灌胃給藥1次,連續(xù)42d,注射按無菌操作進(jìn)行。 2.2樣本處理 在灌胃的第42天,用拔眼球方式直接取血(不麻醉),立即放入試管中,離心,分離出血清。再用10%硫化鈉脫去小鼠背部的毛,面積為2cm×3cm。將動物拉頸處死,迅速剪取背部脫毛處的全層皮膚適量(不含皮下脂肪),待測?！ ?.3皮膚組織勻漿制備 每只小鼠取皮膚組織塊0.5g左右,經(jīng)預(yù)冷生理鹽水漂洗,除去皮下脂肪和其它結(jié)締組織,用濾紙拭干,
7、精密稱重,放入平皿內(nèi)。用量筒取該組織塊9倍量預(yù)冷的生理鹽水,用移液器取2/3量的生理鹽水于平皿中,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。將剪碎的組織塊倒入玻璃勻漿管中,再將剩余的1/3生理鹽水沖洗,一起倒入勻漿管中,用勻漿器制成10%皮膚組織勻漿(在冰水中進(jìn)行),使其完全破碎,細(xì)胞內(nèi)容物完全游離在液相中。將勻漿以3000r/min離心15min,取適量上清液備用?！ ?.4指標(biāo)測定 小鼠皮膚組織中GSH-Px采用化學(xué)比色法測定,小鼠
