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1、趨化因子受體CCR7在胃癌患者外周血淋巴細(xì)胞中的【摘要】目的研究趨化因子受體CCR7在胃癌患者外周血淋巴細(xì)胞各亞群的表達(dá),并與健康人進(jìn)行比較,探討其與臨床病理分期之間的相關(guān)性。方法分別收集健康人組、胃癌患者術(shù)前和術(shù)后外周血,進(jìn)行熒光標(biāo)記和紅細(xì)胞裂解后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)CCR7在外周血淋巴細(xì)胞各亞群的表達(dá),并分析其與臨床病理分期之間的相關(guān)性。結(jié)果與健康人組相比,術(shù)前胃癌患者外周血T細(xì)胞各亞群中CCR7的表達(dá)明顯下降,術(shù)后CCR7在外周血T細(xì)胞各亞群的表達(dá)明顯升高。CCR7在胃癌患者外周血淋巴細(xì)胞中的表達(dá)與臨床病理分期密切相關(guān),Ⅰ、Ⅱ
2、期患者外周血淋巴細(xì)胞中CCR7的表達(dá)率明顯高于Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者(P<0.05)。結(jié)論趨化因子受體CCR7在胃癌患者外周血淋巴細(xì)胞中的表達(dá)明顯降低,其表達(dá)水平與胃癌的臨床病理分期相關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】胃腫瘤;受體;趨化因子;淋巴細(xì)胞;T細(xì)胞亞群 ToinvestigatetheexpressionofchemokinereceptorCCR7inperipherallymphocytesofgastriccarcinomaanditsrelationship20healthypersonsand35patientsies.Theexp
3、ressionofCCR7inthelymphocytesinedbyfloetryafterredcellshaddiedandlabeledAb.Resultsparedagroupies,theexpressionlevelofCCR7aperipherallymphocytesandrelatestotheclinicalTNMstage. Keyor;Receptor;Chemokine;Lymphocytes;Tlymphocytesubsets 趨化因子受體是G蛋白偶連的跨膜受體,選擇性地表達(dá)在靶細(xì)胞表面。趨化
4、因子及其受體結(jié)合后與細(xì)胞骨架重排、內(nèi)皮細(xì)胞黏附和細(xì)胞定向游動(dòng)有關(guān),在腫瘤中,趨化因子及其受體與腫瘤細(xì)胞的生長、血管生成及靶向轉(zhuǎn)移有關(guān)[1]。目前對(duì)于趨化因子及其受體在腫瘤發(fā)生發(fā)展中作用的報(bào)道大多局限于腫瘤局部趨化因子及其受體的表達(dá)[23]。趨化因子及其受體在引導(dǎo)免疫細(xì)胞遷移至特定炎癥組織及淋巴器官,誘發(fā)初級(jí)免疫應(yīng)答產(chǎn)生的過程中也發(fā)揮了重要作用。本研究采用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)了胃癌患者外周血各淋巴細(xì)胞亞群中CCR7的表達(dá),并分析了其與臨床病理分期之間的相關(guān)性,初步了解外周血趨化因子受體與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系?! ?資料與方法 1.
5、1臨床資料 胃癌患者共35例,為2007年4~10月在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院普外科住院患者,年齡45~74歲,中位年齡為54歲。常規(guī)根治手術(shù)后按照國際抗癌聯(lián)盟UICC1977年胃癌PTNM分期法進(jìn)行分期,其中Ⅰ期患者6例,Ⅱ期8例,Ⅲ期14例,Ⅳ期7例,均經(jīng)病理確診。健康人組20例,為2007年4~10月在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院體檢中心進(jìn)行健康體檢者,年齡40~70歲,中位年齡為51歲。所有血樣均于清晨空腹采集?! ?.2主要試劑和儀器 紅細(xì)胞裂解液,F(xiàn)ITC、PE、PECy5熒光標(biāo)記的抗體CD3、CD4、CD8、CCR7、CD
6、19及其同型,流式細(xì)胞儀(FACSCalibur)均為BD公司產(chǎn)品。 1.3樣品處理與檢測(cè) 在流式細(xì)胞儀檢測(cè)管中加入相應(yīng)的熒光標(biāo)記抗體后,分別加入100?μL健康人組、胃癌患者術(shù)前和術(shù)后的血樣,室溫孵育30?min后每管加入1?mL1×紅細(xì)胞裂解液裂解紅細(xì)胞。PBS洗滌3次,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞。Cellquest軟件獲取分析細(xì)胞,每個(gè)檢測(cè)獲取10?000個(gè)細(xì)胞。分組比較健康人、胃癌患者術(shù)前和術(shù)后的外周血中CD3+T細(xì)胞和CD19+B細(xì)胞的比例、CD3+CD4+T淋巴細(xì)胞中CCR7的表達(dá)以及CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞中CCR7
7、的表達(dá)?! ?.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,檢測(cè)指標(biāo)在不同組間的表達(dá)用χ2檢驗(yàn),檢測(cè)指標(biāo)與臨床病理分期之間的相關(guān)性分析采用t檢驗(yàn)?! ?結(jié)果 2.1外周血T細(xì)胞和B細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果 胃癌患者術(shù)前外周血中CD3+T淋巴細(xì)胞所占的比例為67.62%,CD19+B淋巴細(xì)胞所占的比例為10.8%,與健康人組相比(CD3+T:67.62%vs65.69%;CD19+B:10.8%vs 10.44%)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。胃癌患者術(shù)前和術(shù)后的外周血中CD3+T淋巴細(xì)胞和CD19+B淋巴細(xì)胞所占
8、的比例也無明顯變化(CD3+T:67.62%vs67.79%;CD19+B:10.8%vs10.35%)?! ?.2外周血淋巴細(xì)胞CD3+CD4+T細(xì)胞中CCR7的表達(dá)結(jié)果 見表1。由表1可見,外周血CD3+CD4+T細(xì)胞亞群中CCR7的表達(dá)在胃癌患者明顯降低