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1、血氨升高對大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響 1材料和方法 1.1主要材料氯化銨由無錫市民豐試劑廠提供(批號：20070901)?！ ?.2動物分組與喂養(yǎng)SD大鼠40只，由溫州醫(yī)學(xué)院動物中心提供(許可證號：SCXK浙2005-0019)，體重200～240g，隨機(jī)分為A組(正常對照組20只)和B組(高血氨模型組20只)。所有大鼠均在室溫恒定(20～25℃)及燈光晝夜節(jié)律控制(8：00—20：00)下清潔級喂養(yǎng)，自由進(jìn)食、進(jìn)水。 1.3實(shí)驗(yàn)方法A組：每周前5d每天1次腹腔內(nèi)注射生理鹽水0.5mL/1
2、00g，連續(xù)4周。B組：將氯化銨溶解于生理鹽水使其最終濃度為5%，按0.5mL/100g的劑量腹腔內(nèi)注射，每周前5d每天1次，連續(xù)4周建立慢性高血氨模型[3]。 1.4Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)Morris水迷宮設(shè)置參見文獻(xiàn)[4]。實(shí)驗(yàn)前各組大鼠稱量體重。實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行5d。第1天讓大鼠自由游泳2min，從第2天起，每天分上午、下午兩段，每段訓(xùn)練4次，大鼠面向池壁按順序從4個入水點(diǎn)放入池中，觀察大鼠尋找并爬上平臺情況。每次大鼠到達(dá)平臺后，在平臺上休息30s。第5天最后一次訓(xùn)練，記錄大鼠尋找并爬上平臺的
3、路線圖、所需時間。如果在120s內(nèi)大鼠仍未能找到平臺，則將其引導(dǎo)到平臺，時間記為120s。各統(tǒng)計數(shù)據(jù)由上海吉量軟件自動分析生成。學(xué)習(xí)記憶成績用兩個參數(shù)反映：平均逃避潛伏期(即大鼠找到平臺所需的時間)和游泳總距離(即大鼠找到平臺游泳的軌跡，由迷宮上方的攝像頭記錄，總距離由上海吉量軟件自動分析生成)[4]。 1.5血游離氨的測定行為學(xué)實(shí)驗(yàn)后，大鼠經(jīng)用10%水合氯醛(4mL/kg)腹腔麻醉，經(jīng)下腔靜脈采血。標(biāo)本肝素抗凝，放入EP管中，低溫3000r/min離心5min。取血漿經(jīng)強(qiáng)生VITROS350
4、生化分析儀測定血氨含量?！ ?.6統(tǒng)計學(xué)處理方法兩組比較采用t檢驗(yàn)。 2結(jié)果 2.1大體觀察氨中毒模型組大鼠放入Morris水迷宮內(nèi)，絕大多數(shù)游泳姿勢正常?！ ?.2兩組大鼠血氨水平的比較B組大鼠血氨水平為(78.6±11.92)μmol/L，與A組[(26.2±7.78)μmol/L]比較，明顯升高(P<0.05)?！ ?.3兩組大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的比較與A組比較，B組大鼠平均逃避潛伏期延長且游泳總距離增加(均P<0.05)，見表1?！ ?討論 腦細(xì)胞對氨極敏感。血氨過高一
5、方面抑制丙酮酸脫氫酶活性，從而影響乙酰輔酶A的生成，干擾腦中三羧酸循環(huán);另一方面氨在大腦的去毒過程中需消耗大量的α-酮戊二酸和谷氨酸，而α-酮戊二酸是三羧酸循環(huán)中的重要中間產(chǎn)物，缺少則使大腦細(xì)胞的能量供應(yīng)不足，以致不能維持正常功能;谷氨酸是大腦的重要興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，缺少則大腦抑制增加。新近研究認(rèn)為氨的毒性還體現(xiàn)在它直接作用于神經(jīng)膜，可引起突觸后抑制[5]。但目前有關(guān)氨對空間學(xué)習(xí)記憶功能影響方面的研究鮮見報道?！ ”緦?shí)驗(yàn)通過多次經(jīng)腹腔注射小劑量氯化銨建立慢性氨中毒模型。游離血氨測定結(jié)果顯示，氨中毒
6、模型組大鼠血氨水平明顯升高。同時發(fā)現(xiàn)，大鼠基本活動能力未受到明顯影響，在Morris水迷宮內(nèi)，絕大多數(shù)大鼠游泳姿勢正常，可以進(jìn)行行為學(xué)檢測。 綜上所述，血氨升高可導(dǎo)致大鼠學(xué)習(xí)記憶功能下降，但其具體機(jī)制尚待進(jìn)一步研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 [1]王宇明.肝性腦病的定義、命名和診斷[J].中華肝臟病雜 志,2004,12(5):305-306. [2]HindfeltB,PlumF,DuffyTE.Effectofacuteammonia intoxicationoncerebralmetabol
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