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《三氧化二砷對肝癌hepg2細胞增殖的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、三氧化二砷對肝癌HepG2細胞增殖的影響 摘要:目的研究三氧化二砷（As2O3）對肝癌細胞的增殖抑制作用.方法應(yīng)用臺盼藍拒染法、MTT比色法及細胞克隆形成試驗，研究As2O3對肝癌HepG2細胞的增殖抑制和細胞毒作用.結(jié)果As2O3能顯著抑制肝癌細胞的生長，5μmol・L-1As2O3抑制程度明顯強于1μmol・L-1.5和1μmol・L-1As2O3作用后細胞克隆形成率分別為（1.5±1.2）%和（12.3±2.2）%，明顯低于對照組的（30.0±4.2
2、）%（P<0.01）.As2O3對肝癌細胞有較強的細胞毒作用，且呈明顯劑量和時間依賴性，其對肝癌細胞的殺傷率高于5-氟脲嘧啶（5-FU）和絲裂霉素（MMC），但無顯著性差異，As2O3與5-FU及MMC存在協(xié)同效應(yīng)，聯(lián)合應(yīng)用殺傷率明顯升高.結(jié)論As2O3具有明顯的抑制肝癌細胞增殖作用，有必要進一步探討其對肝癌的治療價值. Key;arsenicals/TU Abstract:AIMToexploretheinhibitiveeffectofarsenictrioxide（As2O3）ont
3、heproliferationofhumanlivercancercellline-HepG2.METHODSThemorphologicchanges，proliferationability，colony-formingrateofHepG2treatedbyAs2O3icroscopy，groingassay.ThecytotoxicityofAs2O3onHepG2inedbyMTTassay.RESULTSColony-formingrateofHepG2ol・L-1As2O
4、3（1.5±1.2）%ol・L-1As2O3（12.3±2.2）%，P<0.01andmuchloark-ablecytotoxiceffectonHepG2andcytotoxiceffectedependent.Thecytotoxiceffectmol・L-1，應(yīng)用時用RPMI1640培養(yǎng)液稀釋，4℃保存.肝癌細胞株HepG2由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院分子病毒學(xué)研究所提供，RPMI1640培養(yǎng)液、小牛血清、臺盼藍、四甲基偶氮唑藍（MMT）及二甲基亞砜（DMSO）均購于華
5、美公司.1.2方法 1.2.1As2O3對肝癌細胞生長曲線的影響 取對數(shù)生長期的肝癌細胞5×104置于54個25mL的培養(yǎng)瓶中，待細胞貼壁后，實驗組加入1μmol・L-1和5μmol・L-1的As2O3，對照組加等體積的培養(yǎng)液，連續(xù)培養(yǎng)6d，每日各取3瓶，以臺盼藍拒染法計算活細胞數(shù)，取平均值，繪制生長曲線. 1.2.2As2O3對肝癌細胞克隆形成的影響 取對數(shù)生長期肝癌細胞，采用有限稀釋法，以每孔100個細胞接種于6孔培養(yǎng)板中，實驗組分別加入1μmolӥ
6、9;L-1和5μmol・L-1As2O3，對照組加等體積的培養(yǎng)液，每個濃度設(shè)4個復(fù)孔，靜止連續(xù)培養(yǎng)2ol・L-1As2O3，對照孔加等體積的培養(yǎng)液，每個濃度設(shè)4個復(fù)孔，分別培養(yǎng)24，48和72h，每孔加入5g・L-1MTT10μL，再培養(yǎng)4h，棄去上清液，加入DMSO100μL，振蕩15min，在酶聯(lián)儀570nm處測吸光度A值.殺傷率按以下公式計算.殺傷率（%）=（對照孔A值-實驗孔A值）/對照孔A值×100%. 1.2.4As2O3與5-FU，MMC對肝
7、癌細胞的細胞毒作用比較 采用MTT比色法，將對數(shù)生長期肝癌細胞1×104接種于96孔培養(yǎng)板，待細胞貼壁后，實驗組分別加入As2O32μmol・L-1，5-FU0.5g・L-1，MMC4mg・L-1，As2O32μmol・L-1+5-FU0.5g・L-1，As2O32μmol・L-1+MMC4mg・L-1，對照組加等體積培養(yǎng)液，按前述方法測吸光度A值，計算殺傷率. 2結(jié)果 2.1As2O3對肝癌細胞
8、生長的影響 1μmol・L-1和5μmol・L-1均能明顯抑制肝癌細胞的生長，隨著藥物濃度的增加，作用時間延長，抑制作用更明顯，各濃度組和對照組之間活細胞數(shù)比較差異非常顯著（P<0.01，F(xiàn)ig1）.3對肝癌細胞克隆形成的影響1μmol・L-1和5μmol・L-1As2O3均能明顯抑制肝癌細胞的克隆形成，克隆形成率分別為（12.3±2.2）%和（1.5±1.2）%，5μmol・L-1組的抑制
