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《三氧化二砷對(duì)肝癌hepg2細(xì)胞增殖的影響論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、三氧化二砷對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞增殖的影響論文.freelolL-1As2O3抑制程度明顯強(qiáng)于1μmolL-1.5和1μmolL-1As2O3作用后細(xì)胞克隆形成率分別為（1.5±1.2）%和（12.3±2.2）%，明顯低于對(duì)照組的（30.0±4.2）%（P0.01）.As2O3對(duì)肝癌細(xì)胞有較強(qiáng)的細(xì)胞毒作用，且呈明顯劑量和時(shí)間依賴性，其對(duì)肝癌細(xì)胞的殺傷率高于5-氟脲嘧啶（5-FU）和絲裂霉素（MMC）.freel;arsenicals/TUAbstract:AIMToexploretheinhibitiveeffectofarsenictrioxid
2、e（As2O3）ontheproliferationofhumanlivercancercellline-HepG2.METHODSThemorphologicchanges，proliferationability，colony-formingrateofHepG2treatedbyAs2O3icroscopy，groingassay.ThecytotoxicityofAs2O3onHepG2inedbyMTTassay.RESULTSColony-formingrateofHepG2olL-1As2O3（1.5±1.2）%olL-1As2O3
3、（12.3±2.2）%，P0.01andmuchloark-ablecytotoxiceffectonHepG2andcytotoxiceffectedependent.ThecytotoxiceffectmolL-1，應(yīng)用時(shí)用RPMI1640培養(yǎng)液稀釋，4℃保存.肝癌細(xì)胞株HepG2由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院分子病毒學(xué)研究所提供，RPMI1640培養(yǎng)液、小牛血清、臺(tái)盼藍(lán)、四甲基偶氮唑藍(lán)（MMT）及二甲基亞砜（DMSO）均購于華美公司.1.2方法1.2.1As2O3對(duì)肝癌細(xì)胞生長曲線的影響取對(duì)數(shù)生長期的肝癌細(xì)胞5×104置于54個(gè)25mL的培養(yǎng)瓶中，待細(xì)胞
4、貼壁后，實(shí)驗(yàn)組加入1μmolL-1和5μmolL-1的As2O3，對(duì)照組加等體積的培養(yǎng)液，連續(xù)培養(yǎng)6d，每日各取3瓶，以臺(tái)盼藍(lán)拒染法計(jì)算活細(xì)胞數(shù)，取平均值，繪制生長曲線.1.2.2As2O3對(duì)肝癌細(xì)胞克隆形成的影響取對(duì)數(shù)生長期肝癌細(xì)胞，采用有限稀釋法，以每孔100個(gè)細(xì)胞接種于6孔培養(yǎng)板中，實(shí)驗(yàn)組分別加入1μmolL-1和5μmolL-1As2O3，對(duì)照組加等體積的培養(yǎng)液，每個(gè)濃度設(shè)4個(gè)復(fù)孔，靜止連續(xù)培養(yǎng)2olL-1As2O3，對(duì)照孔加等體積的培養(yǎng)液，每個(gè)濃度設(shè)4個(gè)復(fù)孔，分別培養(yǎng)24，48和72h，每孔加入5gL-1MTT10μL，再培養(yǎng)4h，棄去
5、上清液，加入DMSO100μL，振蕩15min，在酶聯(lián)儀570nm處測(cè)吸光度A值.殺傷率按以下公式計(jì)算.殺傷率（%）=（對(duì)照孔A值-實(shí)驗(yàn)孔A值）/對(duì)照孔A值×100%.1.2.4As2O3與5-FU，MMC對(duì)肝癌細(xì)胞的細(xì)胞毒作用比較采用MTT比色法，將對(duì)數(shù)生長期肝癌細(xì)胞1×104接種于96孔培養(yǎng)板，待細(xì)胞貼壁后，實(shí)驗(yàn)組分別加入As2O32μmolL-1，5-FU0.5gL-1，MMC4mgL-1，As2O32μmolL-1+5-FU0.5gL-1，As2O32μmolL-1+MMC4mgL-1，對(duì)照組加等體積培養(yǎng)液，按前述方法測(cè)吸光度A值，計(jì)算殺
6、傷率.2結(jié)果2.1As2O3對(duì)肝癌細(xì)胞生長的影響1μmolL-1和5μmolL-1均能明顯抑制肝癌細(xì)胞的生長，隨著藥物濃度的增加，作用時(shí)間延長，抑制作用更明顯，各濃度組和對(duì)照組之間活細(xì)胞數(shù)比較差異非常顯著（P0.01，F(xiàn)ig1）.3對(duì)肝癌細(xì)胞克隆形成的影響1μmolL-1和5μmolL-1As2O3均能明顯抑制肝癌細(xì)胞的克隆形成，克隆形成率分別為（12.3±2.2）%和（1.5±1.2）%，5μmolL-1組的抑制作用明顯強(qiáng)于1μmolL-1組（P0.01），但兩組與對(duì)照組（30.0±4.2）%比較差異均非常顯著（P0.01）.2.3As2O3對(duì)
7、肝癌細(xì)胞的細(xì)胞毒作用As2O3對(duì)肝癌細(xì)胞有較強(qiáng)的細(xì)胞毒作用，隨著藥物濃度的增加，作用時(shí)間的延長，殺傷率明顯升高，各組間差異顯著（Tab1）.表1As2O3對(duì)HepG2細(xì)胞的細(xì)胞毒作用（略）3與5┐FU，MMC對(duì)肝癌細(xì)胞的細(xì)胞毒作用比較As2O3對(duì)肝癌細(xì)胞的殺傷率高于5-FU及MMC，但差異不顯著，As2O3與5-FU及MMC有協(xié)同效應(yīng)，聯(lián)合應(yīng)用后殺傷率明顯提高（Tab2）.表2As2O3與5-Fu及MMC對(duì)HepG2細(xì)胞的細(xì)胞毒作用比較（略）3是中藥復(fù)方青黛、吡霜等的主要有效成分，具有強(qiáng)烈的毒性，長期以來被認(rèn)為是一種致癌劑，能抑制細(xì)胞DNA和RN
8、A的合成，干擾細(xì)胞代謝，致染色體畸變，因此，用之十分謹(jǐn)慎.但在我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中，人們應(yīng)用砷劑治療牛皮癬、風(fēng)濕病和梅毒等疾病的歷史悠久.實(shí)驗(yàn)
