資源描述：
《桂林地區(qū)2262例女性生殖道hpv感染及基因型結(jié)果分析》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、桂林地區(qū)2262例女性生殖道HPV感染及基因型結(jié)果分析龔飛鳳周云線桂林市婦女兒童醫(yī)院，廣西桂林 541001[摘要]目的了解桂林地區(qū)高危型人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染及亞型分布情況，為預(yù)防子宮頸癌前病變、子宮頸癌提供參考依據(jù)。方法采用醫(yī)用核酸分子快速導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)對(duì)2262例婦女進(jìn)行HPV-DNA基因結(jié)果分析。結(jié)果2262例婦女中檢測(cè)出HPV陽(yáng)性率26.22％，其中高危型感染率較高（19.20％），低危型感染率較低（7.02％）；普通女性中的感染率為18.89％，在宮頸病變患者中的感染率為84.
2、38％，兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（c2=457.01，P=0.00<0.05）；不同年齡段HPV陽(yáng)性檢出率不同，呈雙峰U形曲線，第l峰位于年輕婦女（20~30歲），陽(yáng)性率為24.61％，第2峰位于中老年婦女（51~65歲），陽(yáng)性率最高51.74％；高危型主要以HPV52、16、58為主。低危型以HPV6、11最為常見。結(jié)論桂林地區(qū)2262例女性宮頸HPV感染常見高危型亞型是HPV52、16、58。低危型亞型是HPV6、11。感染年齡趨于年輕化和老年化。桂林地區(qū)的HPV感染基因分型符合亞洲人群分布
3、規(guī)侓，但有其地區(qū)特點(diǎn)。[.jyqkanpapillomavirus，HPV）是造成宮頸上皮內(nèi)瘤變（CervicalIntraepithelialNeoplasia，CIN）以及宮頸癌的重要原因[1]。目前已經(jīng)有200余種HPV得到了鑒定，其中有30多種亞型會(huì)導(dǎo)致宮頸病變[2]。感染不同亞型HPV由于分布的地域性差異，所產(chǎn)生的致癌性和后果也不同[3]。經(jīng)過世界范圍內(nèi)的研究，由于種族和地理人群的差異，獲得的HPV流行狀況、感染峰齡和病毒類型也不盡相同[4-5]。該研究通過醫(yī)用核酸分子快速導(dǎo)流雜交基因芯片技
4、術(shù)，對(duì)2012年7月—2014年11月間該區(qū)感染HPV婦女宮頸和基因亞型的分布進(jìn)行探析，基本對(duì)該地區(qū)婦女宮頸感染HPV情況有所了解，為該地區(qū)防治婦女宮頸癌、研發(fā)疫苗和使用提供依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。1資料與方法1.1一般資料該研究對(duì)桂林市婦女兒童醫(yī)院婦科門診就診及體檢共計(jì)2262例婦女進(jìn)行HPV檢測(cè)。行宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)（ThinprepCytologyTest，TCT）檢測(cè)對(duì)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性者。若HPV結(jié)果陽(yáng)性合并TCT檢查異常者要進(jìn)行陰道鏡檢查同時(shí)在病變處取活檢，通過病理檢查確診?；颊呔鶃碜怨鹆值貐^(qū)，年齡2
5、0~65歲，平均年齡41.20歲。1.2儀器與試劑HybriMax核酸分子醫(yī)用快速雜交儀；多聚酶鏈反應(yīng)（PCR）儀（KP-CT48）；試劑有21種HPV-DNA提取試劑盒、HPV核酸擴(kuò)增分型檢測(cè)試劑盒以及PCR+膜雜交法試劑盒。共有21種HPV亞型檢測(cè)，包括13種高危亞型（16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59和68型），5種低危亞型（6，42，11，43和44型）以及3種中國(guó)人群常見亞型（53，66和CP8304型）。1.3方法1.3.1病理采集和儲(chǔ)藏標(biāo)本采集要在非月
6、經(jīng)期進(jìn)行，先將宮頸口處多余的分泌物用棉拭子清除，使用專用宮頸刷在宮頸內(nèi)大約2cm處旋轉(zhuǎn)5圈，然后把宮頸刷頭放入有細(xì)胞保存液的樣本的瓶中儲(chǔ)存；放入4℃的冰箱中，3d內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。1.3.2提取樣本DNA和擴(kuò)增PCR充分漂洗宮頸刷頭，離心洗脫液（14000r/min離心5min），去除上清液只留管底細(xì)胞，然后加入400μL裂解液根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行提取，把抽的DNA樣本作為模板實(shí)施PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增程序如下:95℃預(yù)熱9min，95℃20s解鏈，55℃30s退火，72℃30s延伸，循環(huán)此過程40次。72℃延伸
7、5min，4℃低溫保存。1.3.3導(dǎo)流雜交預(yù)熱雜交儀和雜交液，將標(biāo)記有21種HPV基因型寡核酸探針的低密度基因芯片放在雜交平臺(tái)上，將加熱冰浴后的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物添加到檢測(cè)孔里實(shí)施導(dǎo)流雜交；將膜用封阻液封閉，將封阻液后清除后添加AP酶，30℃溫育5min。AP酶催化底物中顏色物的生成，從而顯示雜交結(jié)果，最后排液清洗。1.3.4讀取結(jié)果膜條上共有21個(gè)位點(diǎn)和兩個(gè)監(jiān)控點(diǎn)。兩個(gè)監(jiān)控點(diǎn)分別監(jiān)測(cè)擴(kuò)增過程的有效性和雜交過程的有效性，其余21個(gè)位點(diǎn)分別對(duì)應(yīng)試劑盒上21個(gè)常見HPV病毒類型。陽(yáng)性為清晰可見的藍(lán)紫色圓點(diǎn)，多
8、個(gè)圓點(diǎn)陽(yáng)性即為多重感染。1.4統(tǒng)計(jì)方法用PEMS3.1統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)兩個(gè)樣本率行c2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。2結(jié)果2.1HPV總感染率及不同人群感染率及基因型別分布2262例婦女中檢測(cè)出HPV感染者593例，陽(yáng)性率為26.22％。其中有21種HPV亞型在這593名感染者中被檢測(cè)出，這當(dāng)中高危型HPV感染率較高（19.20％），低危型感染率較低（7.02％）。普通女性感染率為18.89％（385/2038），在宮頸病變患者中感染率為84
