燈盞花素磷脂復(fù)合物對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用

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1、燈盞花素磷脂復(fù)合物對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用【摘要】目的觀察燈盞花素磷脂復(fù)合物(BerPC)對腦缺血再灌注大鼠腦損傷的影響。方法復(fù)制大鼠大腦中動脈腦缺血再灌注損傷模型，觀察缺血后大鼠神經(jīng)功能障礙情況，測定再灌注后缺血側(cè)腦梗死范圍及腦組織中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPX)的活性及丙二醛（MDA）的含量。結(jié)果BerPC劑量依賴性減輕腦缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)功能障礙，減少腦梗死面積，拮抗缺血腦組織MDA含量的增加，提高腦組織SOD、GSHPX活性。結(jié)論BerPC對腦缺血再灌注損傷大鼠具有明顯的保護(hù)作用，具有良好的新藥開發(fā)前景。

2、【關(guān)鍵詞】燈盞花素磷脂復(fù)合物；腦缺血；再灌注；大鼠　　Abstract:ObjectiveTostudytheprotectiveeffectsofbreviscapinephosphatidylcholineplex(BerPC)againstbraininjuryinratsundergonefocalischemiareperfusion.MethodsCAO)usingintraluminalthread.After2hoursofMCAOreperfusionptomsicbraintissueprovebehaviordisorderinducedb

3、yMCAOandreducebraininfractedareathroughincreasingtheactivityofSODandGSHPX,decreasingthelevelofMDAinbraintissue.ConclusionBerPCcouldprotectagainstfocalbraininjuryinducedbyreperfusioninjuryinmiddlecerebralarteryofratsandcouldbeapromisingproduct.　　Keyia；perfusion;rat　　燈盞花素(Ber)是從菊科植物短葶

4、飛蓬中提取的有效活性成分，是治療心腦血管疾病的常用天然藥物。它能有效清除氧自由基和過多的NO，防止腦缺血造成的細(xì)胞膜離子轉(zhuǎn)運紊亂，阻止細(xì)胞內(nèi)鈣超載，保護(hù)腦細(xì)胞，增加腦血流量，改善腦血管循環(huán)等［1，2］。但其結(jié)構(gòu)特點決定其口服不易吸收，生物利用度較低［3］。因此筆者將燈盞花素與磷脂(PC)復(fù)合，形成燈盞花素磷脂復(fù)合物(BerPC)，以提高生物利用度，改善臨床療效。本實驗研究BerPC對大鼠腦缺血再灌注(IR)損傷的保護(hù)作用，并與Ber進(jìn)行比較，旨在為新藥開發(fā)提供藥效學(xué)依據(jù)?！　?材料與方法　　1.1藥物與試劑　　Ber（云南植物藥廠，批號000908），PC（上

5、海試劑二廠，批號031104）。BerPC由武漢俊民醫(yī)藥研究所提供，批號010311，其制備方法為：取Ber溶于丙酮中，加溫至60℃促溶，以質(zhì)量比1∶1.6比例加入大豆磷脂，攪拌2.5h后，揮除有機(jī)溶劑，殘余物室溫減壓干燥10h后得磷脂復(fù)合物。三苯基氯化四氮唑(TTC)染液（中國醫(yī)藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑公司，批號010411）?？捡R斯亮藍(lán)蛋白測定試劑盒（批號030307），超氧化物歧化酶(SOD)測定試劑盒（批號030704），谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPX)測定試劑盒（批號030715），丙二醛(MDA)測定試劑盒（批號030715）均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)

6、品?！　?.2動物　　C（10mL·kg-1）溶液。動物每天灌胃給藥1次，連續(xù)給藥14d?！　?.2大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型的制備［4］　　末次給藥后1h，大鼠稱重，腹腔注射3%的戊巴比妥鈉溶液1mL·kg-1麻醉，仰臥固定于恒溫手術(shù)臺上。頸部皮膚正中切口，分離左側(cè)頸總動脈及其分支。將直徑為0.26mm，頭端灼燒膨大且光圓的尼龍線經(jīng)頸總動脈插入頸內(nèi)動脈入大腦中動脈分支處，進(jìn)線深度均距頸內(nèi)、頸外動脈分叉18mm處，阻斷左側(cè)大腦中動脈血流2h，拔出尼龍線予以再灌注24h，Sham組僅手術(shù)分離，不插尼龍線?！　?.3對大鼠神經(jīng)功能的影響　　大鼠清醒后，觀察其行為學(xué)

7、變化，神經(jīng)癥狀按　　2.4對大鼠腦梗死面積的影響　　各組大鼠再灌注24h后，開顱取腦，取梗死側(cè)腦組織冰浴上（4℃以下）冠狀切成5片，迅速將腦片置于2%TTC染液中，37℃染色20min，10%（φ）甲醛固定。經(jīng)染色后非缺血區(qū)腦組織呈玫瑰紅色，梗死區(qū)呈白色，將白色組織挖下稱重。以梗死區(qū)腦質(zhì)量與總切片腦質(zhì)量的百分比作為梗死范圍。　　2.5對SOD、GSHPX活性及MDA含量的影響　　各組大鼠于再灌注24h后，取缺血側(cè)同一部位腦組織用0.9%冰氯化鈉溶液制成10%腦組織勻漿，將勻漿以3000r·min-1離心10min，取上清液，按試劑盒說明書操作，分別測定SOD、G

8、SHPX