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《人胃癌裸鼠原位移植和轉(zhuǎn)移模型的建立及其生物學(xué)特性》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、人胃癌裸鼠原位移植和轉(zhuǎn)移模型的建立及其生物學(xué)特性【摘要】目的建立一種能很好模擬人體內(nèi)生物學(xué)行為的胃癌裸小鼠原位移植和轉(zhuǎn)移模型。方法采用人胃癌SGC-7901細(xì)胞株在裸鼠皮下經(jīng)反復(fù)傳5代形成實(shí)體瘤的完整組織塊，建立人胃癌裸小鼠原位移植生長和轉(zhuǎn)移模型16個。觀察所建立的模型腫瘤生長狀況、移植成功率和自發(fā)轉(zhuǎn)移的發(fā)生率，常規(guī)H-E染色光鏡下觀察胃癌原位移植瘤、胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和肝轉(zhuǎn)移情況。電鏡下觀察腫瘤超微結(jié)構(gòu)及免疫組化S-P法檢測腫瘤誘導(dǎo)型環(huán)氧化酶-2（COX-2）。結(jié)果胃癌裸鼠原位移植塊再次原位移植的原位成瘤率達(dá)100％（16/16），淋巴結(jié)廣泛轉(zhuǎn)移率為8
2、7.5%（14/16），肝轉(zhuǎn)移發(fā)生率為75.0％（12/16），腹腔積液形成率為12.5%（2/16）。結(jié)論原位移植和轉(zhuǎn)移模型均具有人胃癌自然生長過程的特點(diǎn)，具有人胃癌的生物學(xué)活性?！娟P(guān)鍵詞】胃腫瘤腫瘤細(xì)胞原位移植疾病模型裸小鼠Abstract：ObjectiveTodevelopanudemousemodelofhumangastriccancerthatcanmimicitsnaturalhumanbiologicactivities.MethodsHumangastriccancercelllineSGC-7901icerepeatedlyfo
3、r5generationstogetthesubcutaneoussolidtumor,ulsifiedandorthotopiclyinplantedintotheanteriorachin16nudemice.Thetumorgroor-takerateandmetastaticrateoranditslymphaticandhepaticmetastases,afterroutineH-Estaining;theultrastructures,byelectronmicroscopy;andCOX-2,byimmunohistochemical
4、method．ResultsThetumor-takerateetastasistolymphnodesandliverationodelofhumanstomachcancerestablishedisqualified,exhibitingnaturalgroachneoplasms;orthotopicthansplantation;diseasemodel;nudemouse既往胃癌動物模型的建立多采用皮下接種方式，雖然這種移植方式簡單易行，腫瘤的生長情況也便于觀察，且在一定程度上也近似地模擬了原有腫瘤的形態(tài)學(xué)、生物學(xué)及生物化學(xué)特性；然而接種
5、于裸小鼠皮下組織畢竟屬于異位移植，脫離了其起源組織器官的微環(huán)境，因此在實(shí)驗(yàn)中移植瘤的某些行為常不同于患者原發(fā)惡性腫瘤的生物學(xué)行為。如移植瘤常有包膜、局限性生長、很少發(fā)生局部或遠(yuǎn)處器官的轉(zhuǎn)移，故未能很好地被應(yīng)用于研究人癌潛在的侵襲與轉(zhuǎn)移特性。我們選用低分化胃腺癌細(xì)胞系SGC-7901通過裸鼠皮下傳5代后再原位移植建立的動物模型局部呈浸潤性生長、局部或遠(yuǎn)處有腫瘤轉(zhuǎn)移，為胃癌的研究提供了一個很好的載體。1材料和方法1.1材料1.1.1實(shí)驗(yàn)動物BALB/C/nu/nu裸小鼠由中科院國家嚙齒類上海實(shí)驗(yàn)分中心購買，繁育自無特殊致病原(specialpathoge
6、nfree，SPF)實(shí)驗(yàn)動物屏障環(huán)境。雌雄兼用，5～6周，體重（17±2.5）g，分籠飼養(yǎng)（每籠5只）。實(shí)驗(yàn)過程中均在SPF屏障環(huán)境內(nèi)飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)前1周購入小鼠，使之適應(yīng)新環(huán)境。1.1.2瘤株人胃腺癌SGC-7901細(xì)胞株，由中科院上海細(xì)胞生物研究所提供。癌細(xì)胞在含10%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中，于CO2恒溫孵育箱中培養(yǎng)，常規(guī)傳代。1.1.3COX-2羊抗人單克隆抗體及其免疫組化染色試劑盒購自蘇州福佑生物技術(shù)有限公司。1.2方法1.2.1人胃癌裸鼠原位移植和轉(zhuǎn)移模型的建立1.2.1.1皮下移植瘤模型的建立收集體外培養(yǎng)的SGC-7901細(xì)胞，
7、使細(xì)胞含量為2×1010個/L，取0.1ml注入裸小鼠頸部皮下形成實(shí)體瘤。至腫瘤直徑1.5cm左右時，處死裸小鼠，切取腫瘤放入生理鹽水（含105U/L青霉素和105U/L鏈霉素）中，去除包膜，選擇近邊緣新鮮組織大約1mm3以粗針穿刺接種于另一只小鼠，每次傳代4只，反復(fù)傳5代后作為原位移植用瘤源。1.2.1.2原位移植模型的建立裸小鼠術(shù)前禁食12h，以0.6％戊巴比妥鈉腹腔內(nèi)注射（50mg/kg）麻醉。常規(guī)消毒皮膚，取上述傳5代后生長3周左右處于對數(shù)生長期的荷瘤鼠，常規(guī)消毒，從頸部皮下剝?nèi)∧[瘤組織，剔除纖維包膜，切開選取生長良好、呈淡紅色、魚肉狀的瘤組
8、織，剪成1mm×1mm×1mm小塊，以8-0絲線穿過漿肌層將上述一塊瘤組織荷包縫扎在刮破漿膜的胃大彎前壁，荷
