香菇菌富硒液體發(fā)酵條件的優(yōu)選試驗(yàn)

香菇菌富硒液體發(fā)酵條件的優(yōu)選試驗(yàn)

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1、香菇菌富硒液體發(fā)酵條件的優(yōu)選試驗(yàn)[摘要]在香菇菌液體發(fā)酵的基礎(chǔ)上,先對香菇菌種加硒馴化,再進(jìn)行富硒香菇液體深層發(fā)酵的工藝條件實(shí)驗(yàn)。研究香菇菌絲體在發(fā)酵過程中對有機(jī)硒的耐受力和生物轉(zhuǎn)化力。結(jié)果表明:經(jīng)過馴化后的香菇菌在含有60mg/kg亞硒酸鈉(Na2SeO3)的固體培養(yǎng)基上和含有80mg/kg亞硒酸鈉(Na2SeO3)的液體種子培養(yǎng)基及含有130mg/kg亞硒酸鈉(Na2SeO3)的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中生長良好,并可以在菌絲體內(nèi)富集硒。  [關(guān)鍵詞]富硒香菇;菌種加硒馴化;液體發(fā)酵    [Abstract]Onthebasisoflentinusedod

2、esliquidfermentation,firstlydomesticationofseleniumonlentinusedodes,theneddeepfermentationtechnicsexperimentsforlentinusedodesliquidofselenium-enriched,ationoflentinusedodesmyceliumtoorganicseleniumintheprocessoffermentation.Theresultsshogroediumscontaining60mg/kgNa2SeO3,liquids

3、eedmediumscontaining80mg/kgNa2SeO3andliquidfermentationmediumscontaining130mg/kgNa2SeO3,andenrichseleniuminthemycelium.  [Key-enrichedLentinusedodes;Bacterialdomestication;Liquidfermentation    香菇(lentinusedodes)屬擔(dān)子菌綱傘菌目香菇屬。從香菇中提取的香菇多糖頗受醫(yī)藥學(xué)科研究工作者的重視,特別是富硒香菇多糖。據(jù)現(xiàn)代研究證實(shí)它具有較強(qiáng)的抗病毒、抗腫

4、瘤、抗衰老等作用。是輔助性T細(xì)胞活性的恢復(fù)劑和巨噬細(xì)胞參與的T細(xì)胞免疫增強(qiáng)劑。但是,由于產(chǎn)量低價格昂貴,臨床應(yīng)用受到一定限制[1-3]?! ∪绻谙愎骄后w發(fā)酵時,把亞硒酸鈉添加到培養(yǎng)基中,通過菌絲細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)代謝轉(zhuǎn)化,使有機(jī)硒結(jié)合到大分子活性物質(zhì)上,成為有機(jī)硒多糖和硒蛋白。用這種方法得到的富硒香菇產(chǎn)品,較栽培法具有周期短,效率高,成本低等優(yōu)點(diǎn),是食藥兩用的優(yōu)良產(chǎn)品?! ”緦?shí)驗(yàn)在原香菇菌深層發(fā)酵的基礎(chǔ)上,對富硒香菇的液體發(fā)酵條件,進(jìn)行了初步的探討?! ?實(shí)驗(yàn)材料  1.1出發(fā)菌株  由本室提供  1.2培養(yǎng)基  1.2.1基礎(chǔ)斜面培養(yǎng)基(PDA)土豆(去

5、皮)200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、磷酸二氫鉀(KH2PO4)3g、硫酸鎂(MgSO4·7H2O)1.5g、水1L、pH6.0。  1.2.2基礎(chǔ)種子培養(yǎng)基蔗糖20g、葡萄糖20g、黃豆餅粉10g(浸出液)、酵母粉4g(酶解)、蛋白凍2g、玉米粉10g、磷酸二氫鉀(KH2PO4)1g、硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.6g、水1L、pH6.0?! ?.2.3基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基蔗糖20g、葡萄糖20g、黃豆餅粉15g(不必制成浸出液)、酵母粉4g(酶解)、蛋白凍2g、玉米粉10g、磷酸二氫鉀(KH2PO4)1g、硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.6g、水

6、1L、pH6.0?! ?.3化學(xué)試劑  亞硒酸鈉(Na2SeO3)及其他化學(xué)試劑均為國產(chǎn)分析純?! ?實(shí)驗(yàn)方法  2.1香菇菌種加硒馴化  將4℃冰箱保存的香菇菌,接種到基礎(chǔ)斜面培養(yǎng)基上,進(jìn)行活化培養(yǎng),傳至3代后,菌絲生長豐滿,為實(shí)驗(yàn)用斜面。采用梯度法,在固體培養(yǎng)基中逐步增加硒的含量,濃度分別為20、40、60、80、100mg/kgNa2SeO3誘導(dǎo)菌絲體對硒的耐受能力。方法為:將活化好的母斜面在無菌條件下,取適量菌絲,接種到含硒20mg/kg的斜面培養(yǎng)基上,26℃恒溫培養(yǎng)。72h后,每隔24h觀察一次菌絲生長情況。當(dāng)菌絲長滿斜面時,再接入到含硒40

7、mg/kg斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)。以此類推逐級馴化,每個梯度接種5支斜面并根據(jù)菌絲生長情況進(jìn)行重復(fù)培養(yǎng)?! ?.2搖瓶種子培養(yǎng)  在500ml三角瓶內(nèi),裝入80ml分別含有60、70、80、90、100mg/kgNa2SeO3種子培養(yǎng)基,以無硒種子培養(yǎng)基作對照,取經(jīng)過初步馴化的香菇菌斜面,挖塊約1cm2接入瓶內(nèi),置26℃恒溫?fù)u床,170r/min,培養(yǎng)7h,測定菌絲干重。  2.3搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)  在500ml三角瓶內(nèi),裝入100ml分別含有70、90、110、130、150、170mg/kgNa2SeO3發(fā)酵培養(yǎng)基,以無硒發(fā)酵培養(yǎng)基作對照,將加硒培養(yǎng)的種子液

8、接入發(fā)酵瓶內(nèi)。初始pH值6.0,26℃恒溫?fù)u床170r/min,培養(yǎng)7h,測定菌絲干重。每個梯

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