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《藥物分析輔導(dǎo)：hplc故障及排除方法》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、藥物分析輔導(dǎo)：HPLC故障及排除方法(一)保留時(shí)間變化1.柱溫變化：柱恒溫；2.等度與梯度間未能充分平衡：至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱3.緩沖液容量不夠：用>25mmol/L的緩沖液4.柱污染：每天沖洗柱5.柱內(nèi)條件變化：穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動(dòng)相6.柱快達(dá)到壽命：采用保護(hù)柱(二)保留時(shí)間縮短1.流速增加：檢查泵,重新設(shè)定流速2.樣品超載：降低樣品量3.鍵合相流失：流動(dòng)相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向4.流動(dòng)相組成變化：防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀5.溫度增加：柱恒溫(三)保留時(shí)間延長(zhǎng)1.流速下降：管路泄漏,更換泵
2、密封圈,排除泵內(nèi)氣泡2.硅膠柱上活性點(diǎn)變化：用流動(dòng)相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱3.鍵合相流失：同前(二)34.流動(dòng)相組成變化：同前(二)45.溫度降低：同前(二)5(四)出現(xiàn)肩峰或分叉1.樣品體積過大：用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于第一峰的15%2.樣品溶劑過強(qiáng)：采用較弱的樣品溶劑3.柱塌陷或形成短路通道：更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效：更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品5.進(jìn)樣器損壞：更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子(五)鬼峰1.進(jìn)樣閥殘余峰：每次用后用強(qiáng)溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗2.樣品中未知
3、物：處理樣品3.柱未平衡：重新平衡柱,用流動(dòng)相作樣品溶劑(尤其是離子對(duì)色譜)4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽譜)：每天新配,用抗氧化劑5.水污染(反相)：通過變化平衡時(shí)間檢查水質(zhì)量，用HPLC級(jí)的水(六)基線噪聲1.氣泡(尖銳峰)：流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓2.污染(隨機(jī)噪聲)：清洗柱,凈化樣品,用HPLC級(jí)試劑3.檢測(cè)器燈連續(xù)噪聲：更換氘燈4.電干擾(偶然噪聲)：采用穩(wěn)壓電源,檢查干擾的(如水浴等)5.檢測(cè)器中有氣泡：流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓(七)峰拖尾1.柱超載：降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相2.峰干擾：清潔樣
4、品,調(diào)整流動(dòng)相3.硅羥基作用：加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相PH值,鈍化樣品4.同前(四)4：同前(四)45.同前(四)3：同前(四)36.死體積或柱外體積過大：連接點(diǎn)降至最低,對(duì)所有連接點(diǎn)作合適調(diào)整,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管7.柱效下降：用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護(hù)柱(八)峰展寬1.進(jìn)樣體積過大：同(四)12.在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展：進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散3.數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢：設(shè)定速率應(yīng)是每峰大于10點(diǎn)4.檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)過大：設(shè)定時(shí)間常數(shù)為感興趣第一峰半寬的10%5.流動(dòng)相粘度過高：增
5、加柱溫,采用低粘度流動(dòng)相6.檢測(cè)池體積過大：用小體積池,卸下熱交換器7.保留時(shí)間過長(zhǎng)：等度洗脫時(shí)增加溶劑含量也可用梯度洗脫8.柱外體積過大：將連接管徑和連接管長(zhǎng)度降至最小9.樣品過載：進(jìn)小濃度小體積樣品
