實驗總黃酮含量的測定

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1、《有機分析實驗講義》植物中總黃酮的提取與測定黃酮類化合物主要指以2—苯基色原酮為基核的化合物，主要有黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮、花色素、查爾酮等以及它們的衍生物。其主要結(jié)構(gòu)式如圖。2?苯基色原酮2-苯蓽苯并吡喃圖黃酮類化合物分子結(jié)構(gòu)式黃酮類化合物主要結(jié)構(gòu)類型見表。表黃酮類化合物主要結(jié)構(gòu)類型名稱故酮類黃W醇二氣黃銅類二氯黃?W炎：花色索類齒烷-3.4-一醇類雙笨吡《類（咄W類〉F碳鏈郎分結(jié)構(gòu)OOOOXLOH?卒O名稱黃烷-3-酵類異班銅類二氫異黃酮類杏琿銅類二氫卉耳酮炎橙酗類::磙格郎分結(jié)構(gòu)A,,,OOVVOOO原理黃酮母核中含有堿性氧原子，一般又多帶酚羥基，能和鋁離子產(chǎn)生黃色

2、絡(luò)合物，乂加入亞硝酸鈉和氫氧化鈉，使在堿性溶液中呈紅色，溶液在510nm處有最大吸收，顯色反應(yīng)在60min內(nèi)穩(wěn)定。用蘆丁作為對照品，用硝酸鋁作為黃酮類比色測定的顯色劑，吸光度與蘆丁的濃度呈線形關(guān)系，采用分光光度法對總黃酮進行了含量測定。儀器與試劑新銳T6型紫外可見分光光度計；Explrer型電子天平（0.lmg）。60%的乙醇溶液；5%亞硝酸鈉溶液；10%硝酸鋁溶液。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱量13.2mg蘆丁，用60%乙醇定容到25ml容量瓶作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作準(zhǔn)確吸取0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0ml蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液，放入10毫升容量瓶內(nèi)（寫明標(biāo)記），分別加入2.0、1.6、1

3、.2、0.8、0.4、0ml的60%乙醇溶液；再加入5%亞硝酸鈉溶液0.5ml搖勻，放置6min；加入10%硝酸鋁溶液0.5ml,放置6min后；加入4%氫氧化鈉溶液4.0ml,加60%乙醇定容，搖勻后，放置15min；（掃描找到最人吸收）在510nm處測定吸光度。用0.0ml作為空白，用蘆丁含量的濃度作為橫坐標(biāo)，縱坐標(biāo)作為一定濃度下所對應(yīng)的吸光度，作標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.6.4總黃酮提取與測定和計算稱取0.6—0.8g樣品粉末，加入60ml60%乙醇放于100ml圓底燒瓶內(nèi)，置于水浴鍋上，70°C條件下回流提取60miri。過濾、定容于100ml.吸取樣品量（根據(jù)樣品的吸光度調(diào)整）1.0ml，放入

4、10毫升容量瓶內(nèi)（寫明標(biāo)記），用60%乙醇加到2.0ml;加入5%亞硝酸鈉溶液0.5ml搖勻,放置6min;加入10%硝酸鋁,溶液0.5ml,放置6min后;加入4%氫氧化鈉溶液4.0ml,搖勻后，加60%乙醇定容，放置15min;在510nm處測定吸光度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算總黃酮的含景。A總黃酮含量=2-100X稀釋倍數(shù)MA為標(biāo)準(zhǔn)曲線中的含量。例如：測得的吸光度=0.504Y=0.0101x+0.0017AK-0.00170.504-0.0017=49.73A——0.01010.0101M為樣品的質(zhì)量（mg）上述是一組對比案例，但有著共同的特點:1、兩位學(xué)生都有很強的自尊心，她們一心想獲得好

5、成績2、兩位學(xué)生在遇到挫折后，均陷入了強大的心理壓力之中，但結(jié)果不同。從根本上李某需要調(diào)節(jié)自己的心理問題，從而激發(fā)出內(nèi)在的動力;而張某通過一次小小的數(shù)學(xué)測驗這一外界因素激發(fā)了內(nèi)在的信心和功力，獲得了學(xué)習(xí)上一種成就感，步入了良性循環(huán)的發(fā)展軌道。上述兩個案例代表了初中絕大多數(shù)學(xué)生的心理壓力問題，而這種心理壓力問題往往導(dǎo)致學(xué)生走兩個極端。所以，把握和調(diào)適這種心理壓力，并探索出一種科學(xué)的對策是班級管理中的重要內(nèi)容。一、心理壓力的基本狀況1、大部分同學(xué)認(rèn)為自己有心理壓力。成績越好，比例愈高，好多同學(xué)用“好煩，好累”來形容心理壓力，顯然心理壓力已經(jīng)超負(fù)荷2、心理壓力主要來自于學(xué)習(xí)、人際關(guān)系或環(huán)境方面二、

6、心理壓力的調(diào)適面對心理壓力，我們應(yīng)積極進行心理健康教冇，主動幫助學(xué)生進行心理調(diào)適，如①運動，游戲；②向朋友傾訴；③寫日記；④與師生談心；⑤大笑一場；⑥大睡一覺；⑦聽音樂等。心理壓力的疏導(dǎo)與宣泄對丁?學(xué)生的身心發(fā)展很足重耍，老師耍主動做他們的知心朋友和引路人，教會他們?nèi)绾握{(diào)整心態(tài)，減輕壓力，面對人生。三、心理壓力的對策針對心理壓力的基本狀況和產(chǎn)生的主要因素，我們應(yīng)運用心理科學(xué)的理論和方法開展心理教育，切實做好攻“心”的藝術(shù)。1、針對學(xué)習(xí)方面的壓力。我們既要讓學(xué)生明確學(xué)習(xí)是學(xué)生的主要任務(wù)，明確學(xué)習(xí)H的、學(xué)習(xí)方向；又要重視社會實踐和校園文化生活，以可能減較負(fù)擔(dān)；?！笆谌艘詽O”，培養(yǎng)學(xué)生的能力和方法

7、，樹立正確的考試觀和分?jǐn)?shù)觀。2、針對人際關(guān)系方面的壓力。一方面，耍加強人際交往教育，鼓勵學(xué)生相互溝通，相互信任，自我反省。另一方面，父母與孩子要“和平共處”，在和諧、平等的氣氛中進行交流；根據(jù)孩子的實際情況，要給予正確的評價和適當(dāng)?shù)闹笇?dǎo)；宵定成功的同時，也有失敗和挫折。再之，教師耍對學(xué)生公平、公正、尊重、信任，史要有“讓我們一起努力”的思想。3、針對環(huán)境方面的壓力。一方旭，家庭足學(xué)生學(xué)習(xí)的重耍場所，父母耍潔身