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1、咳喘落口服液對(duì)哮喘模型小鼠肺組織中嗜酸性粒細(xì)胞凋【摘要】觀察咳喘落口服液對(duì)哮喘小鼠嗜酸性粒細(xì)胞(eosinophil,EOS)凋亡及調(diào)控因素的影響,旨在進(jìn)一步闡明咳喘落抑制氣道炎癥的機(jī)制。方法:56只BALB/c小鼠分為正常組、模型組、咳喘落組和西藥(強(qiáng)的松龍)組。除正常對(duì)照組外,其余各組小鼠用卵白蛋白和硫酸鋁鉀致敏激發(fā)BALB/c小鼠,復(fù)制哮喘模型。在不同時(shí)相(末次激發(fā)后0h,第3、7和14天)分別采用改良的Giemsa染色法檢測(cè)各組小鼠肺組織中EOS數(shù)量;免疫組化結(jié)合圖像分析方法檢測(cè)各組小鼠肺組織中Fas、Fas配體(Fasligand,FasL)和BclXL表達(dá)的情況;采用T
2、dT介導(dǎo)的帶生物素dUTP缺口末端標(biāo)記技術(shù)(terminaldeoxynucleotidyltransferasemediatedbiotindUTPnickendlabeling,TUNEL)檢測(cè)EOS凋亡率。結(jié)果:末次激發(fā)后第3、7和14天,哮喘模型組小鼠氣道炎癥明顯,以末次激發(fā)后第3天最為嚴(yán)重,而咳喘落組、西藥組各時(shí)相氣道組織炎癥均明顯減輕,EOS數(shù)量低于模型組(P<0.05)??却浣M末次激發(fā)后第3天,其肺組織內(nèi)FasL、EOSFas陽性面積和凋亡率較模型組升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),且凋亡率達(dá)頂峰,而BclXL的陽性面積及EOS數(shù)量低于模型組,
3、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);末次激發(fā)后第7和14天,中藥組EOS中Fas陽性面積和BclXL的陽性面積較模型組明顯下降(P<0.01);且第14天,其肺組織中FasL表達(dá)和EOS凋亡率均明顯下降(P<0.01)。西藥陽性對(duì)照組的作用與中藥治療組類似。結(jié)論:哮喘小鼠存在以EOS浸潤(rùn)為主的氣道炎癥,同時(shí)伴有凋亡受抑和凋亡延遲??却淇梢蕴岣哐装Y早期肺組織EOS凋亡率,可能是通過減少EOS,提高FasL、Fas表達(dá)和降低BclXL表達(dá)實(shí)現(xiàn)的?!娟P(guān)鍵詞】支氣管哮喘;復(fù)方;肺嗜酸性粒細(xì)胞增多;細(xì)胞凋亡;Fas配體;Fas;BclXL;小鼠 Objective:T
4、oexplorethemechanismofKechuanluooralliquid,apoundChineseherbalmedicine,ininhibitingallergicairmationbyobservingtheeffectsofKechuanluooneosinophil(EOS)apoptosisanditsregulationfactorsinasthmaticmice.Methods:FiftysixBALB/cmicelydividedintonormalcontrolgroup(n=16),untreatedgroup(n=16),edicinegrou
5、p(n=12)andKechuanluogroup(n=12).Exceptforthemiceinnormalcontrolgroup,asthmaicebyusingovalbumin(OVA)andpotassiumaluminiumsulfate.Themiceinisteredalsaline,Kechuanluo(30ml/kgdaily)andprednisolonetablets(10mg/kgdaily)respectivelyfortprovedGiemsastainingmethod;immunohistochemicalmethodandimageanaly
6、sisaticmiceinaldeoxynucleotidyltransferasemediatedbiotindUTPnickendlabeling(TUNEL)technique.Results:paredmationsofthemiceintheKechualuogroupandedicinegroupore,theEOSapoptoticratereachedthepeaklevel.Inversely,theEOScountandtheexpressionareaofBclXLintheEOSswereobviouslylowerintheKechuanluogrou
7、p(P<0.05).Onthe7thand14thday,theexpressionareasofFasandBclXLintheEOSsweresignificantlydecreasedintheKechuanluogroup(P<0.01),andonthe14thday,theEOSapoptoticrateandtheexpressionareaofFasLinthelungtissuesedicinegroupilartothos