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1、離子選擇性電極法測定離子鈣【關(guān)鍵詞】離子選擇性電極法 ?。坳P(guān)鍵詞]離子選擇性電極法;測定;離子鈣 MeasurementIonCalciument;IonCalcium鈣是體內(nèi)生存離不開的元素,離子鈣是生理活性鈣,它比總鈣更能反映出體內(nèi)鈣的代謝狀態(tài)。鈣的正常值范圍小,更需要掌握其特點(diǎn),創(chuàng)造良好的實(shí)驗(yàn)條件,用離子選擇性電極法(ISE)測定鈣優(yōu)點(diǎn)較多,比EDTA滴定法精確度大,我們用ISE法測鈣收到滿意效果。 1資料與方法 1.1資料來源門診病例52例,其中有小兒驚厥(1/12歲~10/12歲)
2、6例,晚期孕婦(22歲~37歲)15例,關(guān)節(jié)疼痛、四肢活動受限的老年人(58歲~70歲)11例共32例為癥狀組,正常體檢20例為正常組?! ?.2儀器 1.2.1儀器AFT500D電解質(zhì)系列分析儀:深圳康立科學(xué)儀器有限公司提供?! ?.2.2試劑EDTA滴定法測鈣試劑盒:北京北化精細(xì)化學(xué)品有限責(zé)任公司提供。 1.3方法 1.3.1抽早晨空腹靜脈血時,分別注入二支干燥試管內(nèi),一支定為一組,另一支定為二組?! ?.3.2一組測定 1.3.2.1抽血后立即分離血清,同時用ISE法和EDTA滴定法
3、;二種方向各測其鈣值?! ?.3.2.2用ISE法測定離子鈣 按儀器要求進(jìn)行開機(jī)、活化、標(biāo)定,待通過后進(jìn)行血清吸樣、測定,這一系列全由微機(jī)控制,電腦打印出結(jié)果。下面列表五項(xiàng)分別觀察?! ?.3.2.3用EDTA滴定法測總鈣 取0.1ml血清于15mm×150mm試管內(nèi);另設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管加標(biāo)準(zhǔn)液0.1ml;各加0.2mol/L的NaOH溶液1ml;各加鈣紅指示劑2滴;滴加EDTANa2溶液,邊加邊搖動試管,直至管內(nèi)淡紅色液變?yōu)榈m色為終點(diǎn),記錄各管EDTANa2用量;計(jì)算:測定管EDTANa2用量(m
4、l)標(biāo)準(zhǔn)管EDTANa2用量(ml)×2.5=mmol/L。 1.3.3二組測定 1.3.3.1抽血后標(biāo)本放置3h后離出血請進(jìn)行測定?! ?.3.3.2按一組的二種方法測定其離子鈣和總鈣?! ?結(jié)果 見表1~表5。表1到表4可以看出各組各方法測定的結(jié)果正常組與癥狀組比較均有明顯差別(P<0.01)。表1一組ISE濁測離子鈣結(jié)果比較(略)注:P<0.01差別有顯著意義。表2一組EDTA滴定法測總鈣結(jié)果比較表(略)注:P<0.01差別有顯著意義。表3二組ISE濁測離子鈣結(jié)果比較(略)
5、注:P<0.01差別有顯著意義表4二組EDTA滴定法測總鈣結(jié)果比較(略)注:P<0.01差別有顯著意義表5ISE法一組與二組值比較(略)注:正常組P>0.05差別無顯著意義。癥狀組P<0.01差別有顯著意義?! 谋?看出,用ISE法測定離子鈣,正常組的一組與二組差別不大(P>0.05),而癥狀組就有顯著的差別(P<0.01)。 一組測定,ISE法,正常組CV是4.65%,癥狀組CV是5.59%;EDTA滴定法測定正常組CV是5.56%;癥狀組CV是6.79%
6、,由此看來,ISE法精密度高于EDTA滴定法,二組測定基本相似?! ?討論 經(jīng)過統(tǒng)計(jì)處理,從表1到表4中可以看出各組各方法測定的結(jié)果,正常組與癥狀組比較均有顯著的差別P<0.01,即低鈣可以引起各種臨床癥狀,說明鈣在人體生存中占有重要地位?! ∫?yàn)殡x子鈣比總鈣更能反映出體內(nèi)鈣代謝的狀態(tài)。ISE法測的就是離子鈣,本法選擇性變,標(biāo)本用量少,操作簡便,程序由微機(jī)控制,優(yōu)點(diǎn)較多。從一組測定結(jié)果來看,正常組CV:4.65%,癥狀組CV:5.59%,EDTA滴定法正常組CV:5.56%癥狀組CV:6.
7、79%,說明ISE法精密度變于EDTA滴定法?! DTA滴定法測的是人體的總鈣,本法測定時鈣紅指示劑在堿性溶液中不穩(wěn)定,終點(diǎn)不易觀察,測定管和標(biāo)準(zhǔn)管變色有時不太一致,終點(diǎn)不好掌握,測定時必須了解,掌握其特點(diǎn)后加以改進(jìn)以達(dá)到檢驗(yàn)要求?! ⊙弘x體后CO2會很快丟失,使pH值升高,導(dǎo)致結(jié)合鈣增加,離子鈣測定偏低,經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,從表5看出,標(biāo)本放置3h后再離心測定(即二組測定),鈣值偏低,癥狀組P<0.01,所以在采血后要盡快分離出血清進(jìn)行測定(1h之內(nèi)),這樣才能使效果滿意。