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1、蘆薈膏中蘆薈苷的含量測定【摘要】目的建立測定蘆薈膏中蘆薈苷含量的方法。方法采用KromasilC18柱(150mm×4.6mm,5μm)色譜柱;流動(dòng)相為甲醇水0.1%磷酸溶液(45∶50∶0.5);流速為1.0ml·min-1,檢測波長為356nm,柱溫為25℃。結(jié)果蘆薈苷線性范圍為29.8~596μg·ml-1;r=0.9999,精密度實(shí)驗(yàn)RSD為1.0%,重復(fù)性實(shí)驗(yàn)RSD為0.6%,平均回收率98.3%,RSD為1.0%(n=5)。結(jié)論該方法簡便、可靠、準(zhǔn)確,可用于該制劑的含量質(zhì)量控制?!娟P(guān)鍵詞】蘆薈膏高效液相色譜蘆薈苷 蘆薈是多年生百合科肉質(zhì)草本植物,主要藥用品種為庫拉索
2、蘆薈、好望角蘆薈、中華蘆薈等[1]。其中蘆薈在燒傷、燙傷領(lǐng)域的應(yīng)用在我國已有一千多年的歷史[2]。為了保證蘆薈在燒傷、燙傷領(lǐng)域應(yīng)用的質(zhì)量和療效,我們建立了蘆薈膏中的主要成分蘆薈苷的含量控制方法,以期為蘆薈膏的質(zhì)量控制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 1儀器與試藥美國戴安SUMMITP880型高效液相色譜儀,Chromeleon色譜工作站。蘆薈苷對照品:中國藥品生物生物制品檢定所,批號(hào)0787-200102,含量98.0%;蘆薈膏(規(guī)格:0.1g·g-1,湖北省黃石市中醫(yī)醫(yī)院);甲醇為色譜純,水為二次重蒸且過濾膜水,其余試劑均為分析純。 2方法與結(jié)果 2.1色譜條件 色譜柱為KromasilC18
3、柱(150mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相為甲醇-水-0.1%磷酸溶液(45∶50∶0.5);檢測波長356nm;柱溫25℃。理論塔板數(shù)按蘆薈苷峰計(jì)算為2113,峰尖銳,對稱性好。在此色譜條件下基線平穩(wěn),柱效高,分離效果好?! ?.2供試品溶液與對照品溶液的制備 精密稱取本品0.15g,置50ml量瓶中,加入甲醇適量,置水浴中加熱使溶解,放冷,用甲醇稀釋到至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液即得供試品溶液。另取不含蘆薈的膏劑0.15g,依法處理,得缺蘆薈陰性樣品液。精密稱取蘆薈苷對照品適量,加甲醇制成每毫升中含0.596mg的溶液,即得蘆薈苷對照品溶液?! ?.3線性關(guān)系精密稱取對照品溶液
4、0.5,1,3,5,7,9,10ml置10ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻;分別進(jìn)樣20μl,按上述色譜條件測定峰面積,以峰面積積分值為縱坐標(biāo),以蘆薈苷的濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為:A=47.26C+8.688,r=0.9999結(jié)果表明蘆薈苷濃度在29.8~596μg·ml-1范圍內(nèi)與色譜峰面積呈良好的線性關(guān)系。 2.4精密度實(shí)驗(yàn) 取對照品溶液,分別測定6次,峰面積的RSD為1.0%,表明有良好的精密度?! ?.5穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取同一批樣品溶液,分別在0,1,3,5,7,9,12h依法測定,記錄色譜峰的峰面積,RSD為0.7%。表明供試品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定?! ?.6
5、重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一批蘆薈膏樣品6份,按照“2.8”項(xiàng)樣品測定法操作,測得蘆薈苷含量的RSD為0.6%(n=6)。結(jié)果表明,該方法的重復(fù)性良好?! ?.7加樣回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取已知含量為100.3mg·g-1的蘆薈膏5份(約0.075g),分別精密加入蘆薈苷對照品溶液(1.51mg·ml-1)5ml,按供試品溶液制備及“2.8”樣品測定項(xiàng)下操作,測定蘆薈苷含量,計(jì)算平均加樣回收率為98.3%,RSD為1.0%(n=5)?! ?.8樣品測定 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl,注入高效液相色譜儀,依上述色譜條件,以外標(biāo)法計(jì)算含量,測定樣品中蘆薈苷的含量。3批樣品中蘆薈苷含量分
6、別為99.8,100.8,100.3mg·g-1;RSD分別為1.0%,0.9%,0.5%(n=3)。色譜圖見圖1。 3討論 3.1流動(dòng)相選擇 我們采用