hplc法測(cè)定不同產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛中燈盞乙素的含量

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1、HPLC法測(cè)定不同產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛中燈盞乙素的含量作者:劉鵬,周軍,秦向陽(yáng),王巧峰,李曉曄【關(guān)鍵詞】,燈盞乙素DeterminationofscutellarininErigeronbreviscapusfromdifferentplacesbyHPLC  【Abstract】AIM:TodevelopaHPLCmethodtodeterminatetheproportionofscutellarininErigeronbreviscapusfromdifferentplacesofproduction.METHODS:Thea

2、nalyticalcolumnm×150mm)filledstationaryphase.Themobilephaseconsistedofmethanol(0.02mol/L)phosphatebuffersolution[pH5.2(35∶65)].ThefloL/min.Theinjectionvolume.Thecolumntemperatureethodethodethodisconvenient,economicalandaccuratem×150mm,5μm)為色譜柱,流動(dòng)相為甲醇-0.02mol/L,磷酸緩沖

3、液pH為5.2(35∶65),檢測(cè)波長(zhǎng)為335nm,流速0.8mL/min,柱溫25℃,以外標(biāo)法測(cè)定燈盞細(xì)辛中燈盞乙素含量.結(jié)果:燈盞乙素在0.74~3.70μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系,r=0.9996,燈盞乙素平均加樣回收率為97.24%,RSD為0.82%(n=6).結(jié)論:本方法可靠性高,準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性好,適用于燈盞細(xì)辛中燈盞乙素的含量測(cè)定.  【關(guān)鍵詞】燈盞乙素;高效液相色譜法;燈盞細(xì)辛  0引言  燈盞細(xì)辛為菊科植物短葶飛蓬[Erigeronbreviscapus(Vant.)Hard.Mazz]的干燥全草.主

4、要分布于我國(guó)云南、貴州、廣西、四川等地,是一種民間常用中藥.該藥具有散寒解表、祛風(fēng)除濕、活血化瘀、通經(jīng)活絡(luò)等功效.臨床主要用于治療缺血性腦血管疾病、冠心病、心絞痛等癥,其療效較好,毒副作用小,運(yùn)用范圍廣[1].燈盞細(xì)辛主要有效成分為黃酮類化合物燈盞乙素[2-3],由于不同產(chǎn)地的燈盞花藥材主成分含量差異較大,為了控制藥材質(zhì)量,本研究參考  1.2.3線性關(guān)系考察精密吸取燈盞乙素對(duì)照品溶液(370mg/L)0.5,1,1.5,2,2.5mL分別置于5mL容量瓶中,加流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,0.45μm微孔濾膜濾過(guò),分別吸取各對(duì)照

5、品溶液20μL進(jìn)樣,按上述色譜條件測(cè)定峰面積.  1.2.4穩(wěn)定性試驗(yàn)取燈盞乙素對(duì)照品溶液,分別在0,1,5,10,24和48h依次進(jìn)樣20μL,測(cè)定燈盞乙素含量.  1.2.5精密度試驗(yàn)精密吸取370mg/L燈盞乙素對(duì)照品溶液20μL,重復(fù)進(jìn)樣6次,測(cè)定峰面積,計(jì)算精密度.  1.2.6重現(xiàn)性試驗(yàn)取1號(hào)燈盞細(xì)辛樣品6份,按供試品溶液的制備方法制備供試品溶液,按上述色譜條件測(cè)定含量.  1.2.7加樣回收率試驗(yàn)精密稱量6份已知含量(1號(hào)樣品,燈盞乙素含量為7.13mg/g)的燈盞細(xì)辛樣品70mg,分別準(zhǔn)確加入燈盞乙素對(duì)照品(

6、370,740,1110mg/L)1mL,按樣品測(cè)定法,測(cè)定燈盞乙素含量,計(jì)算加樣回收率.  2結(jié)果  2.1線性關(guān)系線性關(guān)系的考察中測(cè)定峰面積,以峰面積積分值為縱坐標(biāo),進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程Y=-27.34+3876.04X,r=0.9996(n=6).結(jié)果表明燈盞乙素在0.74~3.70μg范圍里呈良好線性關(guān)系.  2.2燈盞乙素穩(wěn)定性穩(wěn)定性試驗(yàn)中,6次所測(cè)燈盞乙素峰面積RSD為1.03%,燈盞乙素在流動(dòng)相溶液中48h內(nèi)穩(wěn)定.精密度試驗(yàn)中,6次測(cè)量峰面積的精密度RSD為0.98%.重現(xiàn)性試驗(yàn)中,測(cè)

7、得燈盞乙素的RSD為0.94%(n=6),表明此法重現(xiàn)性良好.加樣回收率試驗(yàn)中,測(cè)定的平均加樣回收率為97.24%,RSD為0.82%(n=6)(表1).  2.3樣品測(cè)定結(jié)果對(duì)不同產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛樣品進(jìn)行測(cè)定,分別精密吸取對(duì)照品與各供試品溶液20μL,注入高效液相色譜儀,依上述色譜條件,依外標(biāo)法計(jì)算含量,測(cè)得樣品中燈盞乙素的含量.四批樣品結(jié)果見(jiàn)表2.燈盞細(xì)辛生藥樣品色譜圖見(jiàn)圖1.  表1加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(略)  表2樣品測(cè)定結(jié)果(略)  A:燈盞乙素對(duì)照品;B:燈盞細(xì)辛生藥樣品.  圖1燈盞乙素對(duì)照品與燈盞細(xì)辛生藥樣品色譜圖

8、(略)  3討論  3.1流動(dòng)相選擇

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