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1、香附總黃酮的超聲波提取工藝研究論文黃鎖義羅建華張麗丹蒙春越劉嬌馮玲張煒志【摘要】目的探討香附總黃酮的提取及鑒別方法，以充分利用香附植物資源，避免資源的浪費(fèi)。方法采用超聲波乙醇浸提法從香附中提取黃酮類物質(zhì)，對(duì)所提取的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證，并用分光光度法測(cè)定含量。結(jié)果測(cè)得樣品中總黃酮的含量C=0.1864mg/ml，回收率為102.7%，其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論該方法采用全物理過(guò)程，無(wú)任何污染.freelethodsofextractionandidentificationfortotalflavonoidsfromCrperusrotundus.Me
2、thodsTheflavonoidsCyperusrotundusbyultrasonicetryinetheflavanoneofCyperusrotundus.ResultBythismethodthecontentofthetotalflavanoneofCyperusrotundusg/mlandtherateofrecoveryethodsforthetotalflavanoidsandthepurityishigh.ConclusionThismethodisapurelyphysicalprocessandhasnopollutio
3、n.Itisanidealent;Cyperusrotundus;Totalflavanone;Identification香附，異名雀頭香、莎草根等，為莎草科植物莎草CyperusrotundusL．的干燥根莖。秋季采挖，去毛須。歸肝、脾、三焦經(jīng)，有行氣解郁、調(diào)經(jīng)止痛之功效。用于肝郁氣滯，月經(jīng)不調(diào)［1］。香附目前尚無(wú)家種，商品全系野生，資源分布全國(guó)除黑龍江、內(nèi)蒙古、寧夏、新疆及西藏等省、自治區(qū)外的各地區(qū)，各地田野及陰濕地均常見(jiàn)生長(zhǎng)，尤其以海南貨量大且質(zhì)優(yōu)，產(chǎn)量約占全國(guó)總產(chǎn)量的2/3［2］。香附用途十分廣泛，婦科稱其為“圣藥”。李時(shí)珍《本草綱目》
4、指出：“諸書皆云益氣,.freell95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾。濾渣再加80ml95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇至濾液僅剩25ml左右為止，放置250ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，得樣品液。2.2測(cè)定方法依據(jù)以蘆丁為對(duì)照品測(cè)定香附中總黃酮的含量，加入鋁離子試劑，同時(shí)控制適宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形成絡(luò)合物，在可見(jiàn)光區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰。2.3定量實(shí)驗(yàn)-總黃酮的含量測(cè)定2.3.1波長(zhǎng)的選擇取樣品液適量，在0.30ml5%亞硝酸鈉溶液存在的堿性條件下，經(jīng)硝酸鋁顯色后，以試劑為空白參比液在420
5、～700nm波長(zhǎng)范圍測(cè)定絡(luò)合物的吸光度，絡(luò)合物于510nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故測(cè)定時(shí)選用此波長(zhǎng)。2.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精密吸取蘆丁對(duì)照液（0.10mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.30ml，搖勻，靜置6min；再加10%硝酸鋁溶液0.30ml，搖勻，靜置6min；再加4%氫氧化鈉溶液4.00ml，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置12min，以試劑作空白參比液，于510nm處測(cè)吸光度。結(jié)果見(jiàn)表1。表1分光光度法測(cè)定蘆丁對(duì)照液吸光度結(jié)果（略
6、）根據(jù)上表得回歸方程：A=-0.0311+13.5184C，r=0.9999。2.3.3提取物含量的測(cè)定精密吸取樣品液0.50ml，置10ml容量瓶，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法測(cè)定吸光度A=0.0949，根據(jù)回歸方程：A=-0.0311+13.5184C，計(jì)算樣品中總黃酮的含量C=0.1864mg/ml。2.3.4回收率實(shí)驗(yàn)精密量取樣品液2.00ml，加入標(biāo)準(zhǔn)蘆丁對(duì)照品2.00ml（0.10mg/ml），同前樣品測(cè)定方法操作測(cè)定吸光度，求出回收率為102.7%。2.4定性實(shí)驗(yàn)-總黃酮的鑒別2.4.1顏色反應(yīng)紫外光下呈色反應(yīng)：取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，在可
7、見(jiàn)光下呈灰黃色，在紫外光下呈灰褐色并有熒光斑點(diǎn)。濃氨水反應(yīng)：取該樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，將濾紙?jiān)诎彼戏窖?.5min，立即在紫外光下觀察，呈極明顯的黃褐色熒光斑點(diǎn)。三氯化鋁反應(yīng)：取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，滴加１％三氯化鋁乙醇溶液，吹干。在可見(jiàn)光下呈灰黃色，在紫外光下呈黃色熒光斑點(diǎn)。乙酸鎂反應(yīng)：取樣品溶液點(diǎn)在濾紙上，滴加1%乙酸鎂甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黃色斑點(diǎn)。鹽酸-鎂粉反應(yīng)：取乙醇提取液1ml于試管中加鎂粉，再加入濃鹽酸數(shù)滴（1次加入），在泡沫處呈紫紅色。2.4.2紙層析取樣品溶液10μl點(diǎn)在濾紙上。用正丁醇∶醋酸∶水=4∶1∶5體積比為展開(kāi)劑，上
8、行展開(kāi)5h，取出晾干。噴1%氯化鋁乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可見(jiàn)熒光斑點(diǎn)。3討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)方法工藝簡(jiǎn)單，回收率為102.7%
