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1、短波近紅外光譜法測(cè)定葛根中總異黃酮含量論文【摘要】目的建立短波近紅外光譜法測(cè)定葛根中總異黃酮含量的方法。方法應(yīng)用吸光光度法測(cè)定葛根中總異黃酮的含量，并在此基礎(chǔ)上建立葛根中總異黃酮含量的短波近紅外數(shù)學(xué)模型。結(jié)果在850～1100nm分析譜區(qū)內(nèi)，建模樣品集的標(biāo)準(zhǔn)值與短波近紅外預(yù)測(cè)值的相關(guān)系數(shù)r=0.981,檢驗(yàn)樣品集的標(biāo)準(zhǔn)值與短波近紅外預(yù)測(cè)值的相關(guān)系數(shù)r=0.972。結(jié)論應(yīng)用短波近紅外光譜法測(cè)定葛根中總異黃酮含量的方法是可行的。【關(guān)鍵詞】短波近紅外光譜法葛根總異黃酮Abstract：ObjectiveTodetermi
2、nethecontentoftotalisoflavonesofP.lobatabyshort.MethodsTakingthecontentoftotalisoflavonesofP.lobatabyspectrephotometryasthereferencevalue,athematicalmodelofthecontentoftotalisoflavonesofP.lobata.Results850～1100nmonstratedthatthecorrelationbetodelingsamplesetan
3、dtheshortplesetandtheshortinationofthecontentoftotalisoflanonesofP.lobatabyshortisfeasible.Key；P.lobata；Totalisoflavones葛根為常用中藥，其主要有效成分為異黃酮［1］。葛根中的總異黃酮成分一般是利用紫外250nm處的吸收進(jìn)行比色［2～6］，但前處理較復(fù)雜，需要時(shí)間較長。而原料質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到產(chǎn)品的質(zhì)量和企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益，因此生產(chǎn)上迫切需要快速、簡(jiǎn)便的分析方法。近紅外光是指波長介于可見區(qū)與中紅外區(qū)的
4、電磁波，其波長范圍約為0.8～2.5μm.freel-1。在實(shí)際應(yīng)用中通常把近紅外譜區(qū)分為兩段，即800～1100nm的短波近紅外譜區(qū)和1100～2500nm的中長波近紅外譜區(qū)。短波近紅外譜區(qū)更適合做透射分析，故又叫近紅外透射區(qū)，中長波近紅外區(qū)更適合做反射或漫反射分析，故又叫近紅外反射區(qū)。近紅外光譜分析的最大特點(diǎn)是對(duì)樣品無破壞性、操作簡(jiǎn)便、分析迅速，采用近紅外透射、散射、漫反射法可直接對(duì)樣品進(jìn)行分析［7］。用中長波近紅外光譜法測(cè)定葛根中總異黃酮等成分的含量已有研究［1］，作者使用的是德國BRUKER儀器公司生產(chǎn)的V
5、ECTOR22/N傅立葉變換近紅外光譜儀，但是由于該儀器的價(jià)格昂貴，在實(shí)際應(yīng)用和普及中有一定的局限性。利用我國自行設(shè)計(jì)研發(fā)的短波近紅外光譜儀（國家“十五”科技專項(xiàng)），來建立快速檢測(cè)葛根中總異黃酮含量的數(shù)學(xué)模型，以探索其實(shí)際應(yīng)用可行性。現(xiàn)報(bào)道如下。1器材1.1儀器短波近紅外谷物分析儀（CCD陣列硅檢測(cè)器、波長范圍為650～1100nm），北京世農(nóng)綠方高新技術(shù)發(fā)展中心；UV8500型紫外可見光光度計(jì)，上海天美科學(xué)儀器公司；Glanzg，用無水乙醇定容至25ml，即為母液。按照表1要求移取母液和無水乙醇，用蒸餾水定容至1
6、0ml，配成標(biāo)準(zhǔn)溶液。于紫外分光光度計(jì)250nm處測(cè)其吸光度，以葛根素計(jì)算總異黃酮的含量，以其吸光度對(duì)葛根素濃度作圖，其線性回歸方程為：Y=9.0947X+0.0603，相關(guān)系數(shù)r=0.9998，線性范圍為0～19.20μg/ml。表1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制體積比例（略）2.2葛根中總異黃酮含量的測(cè)定將葛根粉末樣品置烘箱中于80℃下烘4h，精密稱取葛根粉末樣品0.2g，置于50ml三角瓶中，加入70%乙醇10ml，稱重，微波加熱60s，取出冷卻，再處理60s，取出冷卻，稱重，補(bǔ)足損失重量，混勻。取0.2ml于25ml試管中，
7、加入無水乙醇2.5ml，定容至刻度，作為供試品溶液。于紫外分光光度計(jì)250nm處測(cè)供試品溶液吸光度，計(jì)算葛根樣品中總異黃酮的百分含量，作為其標(biāo)準(zhǔn)值。2.3葛根中總黃酮含量的近紅外光譜法測(cè)定將葛根粉末樣品不經(jīng)任何化學(xué)預(yù)處理,直接進(jìn)行近紅外光譜的測(cè)定。測(cè)定的方法是將樣品置于一可旋轉(zhuǎn)的直徑為5cm，光程為3mm的圓柱狀樣品池中，使樣品的松緊度基本保持一致，掃描區(qū)間為800～1100nm，掃描分辨率為8cm-1。將已測(cè)得化學(xué)值的葛根樣品光譜分成兩組，一組為建模集樣品，用以建立總異黃酮的近紅外分析數(shù)學(xué)模型。一組為檢驗(yàn)集樣品，
8、用以檢驗(yàn)所建模型的效果。利用PLS法建立建模集樣品圖譜和葛根總異黃酮含量之間的數(shù)學(xué)模型。由于波長處于800～850nm時(shí)儀器噪聲較大，通過對(duì)模型的優(yōu)化，確定選取850～1100nm作為分析譜區(qū)，采用中心化和一階導(dǎo)數(shù)法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理。所建模型和預(yù)測(cè)模型可以用化學(xué)值和近紅外預(yù)測(cè)值的相關(guān)系數(shù)（R）和標(biāo)準(zhǔn)差兩個(gè)指標(biāo)來共同評(píng)價(jià)，結(jié)果見表2。表2葛根中總異黃酮建模集和
