桑杏湯對溫燥小鼠血清與呼吸道抗體的影響論文

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1、桑杏湯對溫燥小鼠血清與呼吸道抗體的影響論文丁建中，龔權(quán)，張六通，邱幸凡，陳剛，朱慧玲，張淵【關(guān)鍵詞】外燥；,,桑杏湯；,,血清；,,呼吸道；,,抗體摘要：目的觀察桑杏湯對溫燥小鼠血清IgG（IgGS）、呼吸道液IgG(IgGR)與呼吸道黏多糖（RS）的影響。方法54只SPF級昆明小鼠隨機(jī)分為常溫常濕組（A組）、溫燥對照組（B組）和溫燥治療組（C組），每組18只。藥物處理后第5天檢測IgGS.freell）與脾臟及胸腺平均重量（mg）。結(jié)果B組IgGR（2.30±0.32）明顯低于A組（5.68±0.64，P0.01），C組RS、IgGS明顯高于A組，且該組IgGR接近A組，但胸

2、腺平均重量低于其它二組（P＜0.01）。結(jié)論溫燥可致小鼠氣道IgGR降低而抵抗力下降；桑杏湯主要作用機(jī)理是促進(jìn)肺津生成而潤燥，加之增加氣道IgGR，共同增強(qiáng)氣道御邪能力。結(jié)果還為中藥藥物歸經(jīng)理論提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)。關(guān)鍵詞：外燥；桑杏湯；血清；呼吸道；抗體Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsonIgGinSerum(IgGS)andrespiratory(IgGR)andmucus(RS)andus(mg)inASTERK30H,韓國），低溫冰箱（VXE380，85℃,法國），酶標(biāo)檢測儀（KHBST360,上海），分析天平（MonoBioc

3、AB304S,瑞士）。IgGELISA試劑盒（華美生物工程公司，批號：200501）。主要試劑：咔唑（Singam）、D葡萄糖醛酸內(nèi)酯（Singam）、四硼酸鈉（上海），其余試劑均為A.R。1.2實(shí)驗(yàn)動物SPF級昆明小鼠54只，體重(18±1)g，雌雄各半，湖北省實(shí)驗(yàn)動物研究中心提供，許可證號：SCXK（鄂）20032005。1.3實(shí)驗(yàn)藥物桑杏湯（《溫病條辨》）組方：桑葉9g，杏仁9g，沙參15g，象貝母12g，香豉6g，梔子皮12g，梨皮12g。生藥由湖北省荊州中藥材公司提供。取1劑，加3倍水浸泡2h后微火煎至100ml，重復(fù)3次，將3次煎液過濾并混勻，水浴濃縮至200ml，

4、其生藥量為364g/L。按臨床成人劑量計(jì)算，C組動物按0.009gkg1d1生藥量給予灌胃處理，1次/d，連用5d。A組與B組用無菌生理鹽水代替藥物。1.4方法1.4.1實(shí)驗(yàn)動物在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)飼養(yǎng)7d后隨機(jī)分為3組：常溫常濕組（A組）、溫燥對照組（B組）、溫燥治療組（C組），每組18只，置人工氣候箱內(nèi)常規(guī)飼養(yǎng)，按表1“溫度－相對濕度－風(fēng)”條件綜合刺激進(jìn)行造模。第7天進(jìn)行藥物治療。表1各組小鼠“溫度相對濕度風(fēng)”處理?xiàng)l件（略）1.4.2呼吸道液黏多糖測定（RS,μg/ml）：咔唑比色法［2］。藥物處理后第5天、各組小鼠在剖殺前4h禁食、禁水。斷頸處死小鼠并暴露氣管，從喉頭處行氣管插管

5、，緩慢推注37℃預(yù)溫的無菌生理鹽水1ml，回抽此液并重復(fù)2次，離心取上清液檢測RS。每份標(biāo)本分為2個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度測定2次,取均值。用3mmol/L氯化鈉稀釋D葡萄糖醛酸內(nèi)酯為25~300μg/ml并制作工作曲線（n=8,r=0.8992）。1.4.3血清IgG檢測（IgGS）：ELISA方法［3］。藥物處理后第5天、各組小鼠在處死前4h禁食、禁水。常規(guī)眼球取血并分離血清、置65℃?zhèn)錂z。每份標(biāo)本重復(fù)測定2次，取均值。以包被液作空白對照，PBSpH7.4（10%小牛血清）作陰性對照。記錄標(biāo)本均值與陰性對照（P/N）倍數(shù)之平均值。1.4.4呼吸道液IgG檢測（IgGR）:各組標(biāo)

6、本獲取方式同RS測定，用ELISA方法［3］。1.4.5小鼠脾臟與胸腺平均重量檢測（均重，mg）：由專人常規(guī)剖取實(shí)驗(yàn)小鼠脾臟與胸腺后，立即經(jīng)1/萬分析天平重復(fù)稱重3次，取均值。1.4.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示，采用SSPS13.0軟件，資料之間比較用ANOVA分析，顯著性檢驗(yàn)采用多個(gè)樣本均數(shù)間q檢驗(yàn)（NeanKeuls法），P0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為雙側(cè)α=0.05。2結(jié)果2.1小鼠一般情況：溫燥組、涼燥組動物在造模處理后2~3d飲水量增加、飲食減少；活動度明顯下降，喜歡群聚、多睡，毛色粗糙，血液黏稠，溫燥組動物排出的糞便明顯干燥。2.2桑杏湯對溫燥小鼠

7、RS、IgGS、IgGR和對脾臟與胸腺的影響結(jié)果見表2。表2桑杏湯對溫燥小鼠RS，IgGS，IgGR與脾臟與胸腺的影響（略）3討論根據(jù)氣象學(xué)“候平均氣溫”，以平均氣溫10~20℃為春、秋季節(jié)，用“季平均溫度”（指各季中間所在月分的月平均氣溫代表各季的氣溫）、以10月的平均氣溫為秋季的溫度，課題組提出以平均氣溫15℃和相對濕度70%±2%為常溫常濕氣候，（22±2）℃為溫燥氣候，取相對濕度33%±2%模擬秋季干燥氣候，人工外燥環(huán)境中風(fēng)速定為2.5m/s。以表1條件的已有研究資料顯示，外燥可致小