低劑量順鉑并ifnα對(duì)小鼠移植性肝癌血管生成影響論文

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1、低劑量順鉑并IFNα對(duì)小鼠移植性肝癌血管生成影響論文【摘要】目的了解持續(xù)低劑量順鉑(DDP)聯(lián)合α干擾素(IFNα)對(duì)小鼠移植性肝癌血管生成的影響。方法將48只接種H22肝癌的昆明小鼠隨機(jī)分為4組，各12只。低劑量DDP組（DDP組）：腹腔注射DDP0.2mL(0.6mg/kg)；IFNα組（IFN組）：皮下注射IFNα0.2mL(2×104U)；低劑量DDP聯(lián)合IFNα組（聯(lián)合組）：腹腔注射DDP0.2mL(0.6mg/kg）并皮下注射IFNα0.2mL(2×104U)；生理鹽水對(duì)照組（對(duì)照組）：腹腔注射生理鹽水0.

2、2mL，每天1次，連續(xù)2周。觀察腫瘤體積、小鼠體質(zhì)量的變化和藥物毒副反應(yīng)，采用免疫組織化學(xué)方法測定腫瘤微血管密度(MVD)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)。結(jié)果DDP組和IFN組腫瘤生長比較緩慢,聯(lián)合組抑瘤效果更為明顯(F=260.58,q=0.72～1.08，P0.05)，且毒、副反應(yīng)未增加。與對(duì)照組比較，DDP組和INF組的MVD、VEGF表達(dá)均下降(F=157.04、52.97.freelicea.MethodsFortyeightKunmingmiceplantedaizedintofourgroupsasDDPgro

3、up:DDP0.6mg/kg，intraperitonealinjection;IFNgroup:IFNα,0.2mL(2×104U),hypodermic;binationgroup:DDP,0.6mg/kg,intraperitoneal,andIFNα,0.2mL(2×104U),hypodermic;controlgroup:normalsaline,0.2mL,intraperitoneal.Allinjectionseandors,asiceeasured.Theexpressionofmicrovesseldens

4、ity(MVD)andvascularendothelialgroinedimmunohistochemically.ResultsTumorgreorinhibitionoresignificantinbinationgrouporedramaticdeclineobservedinbinationgroup(q=5.25-9.47,P0.05).ConclusionLoorinhibitionandlesssidereactions.［KEYVD)及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達(dá)的檢測采用免疫組織化學(xué)方法。腫瘤組織常規(guī)石蠟包埋

5、、切片、脫蠟、水化后，按試劑盒說明進(jìn)行PV免疫組化二步法染色。以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，以已知陽性的切片作為陽性對(duì)照。1.3.4染色結(jié)果判定MVD：以CD34單抗標(biāo)記內(nèi)皮細(xì)胞,任何胞漿染成棕色的內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán),均按獨(dú)立的微血管分別計(jì)數(shù)，是否有管腔不作為計(jì)數(shù)的必要條件,管腔大于8個(gè)紅細(xì)胞面積或管壁周圍有平滑肌包繞的血管不納入計(jì)數(shù)范圍。計(jì)數(shù)時(shí)先于低倍鏡下選擇癌灶浸潤最明顯處,然后在200倍鏡下計(jì)數(shù)5個(gè)視野內(nèi)微血管數(shù)目,取其平均值作為MVD5。VEGF的表達(dá)：以胞漿內(nèi)含有棕黃或棕褐色、顆粒狀、定位明確且染色明顯的瘤細(xì)胞為陽性細(xì)胞

6、。每只動(dòng)物均隨機(jī)選取5張切片，顯微鏡下每張切片隨機(jī)觀察10個(gè)高倍視野(400倍)，每個(gè)視野觀察100個(gè)細(xì)胞，記數(shù)VEGF的陽性細(xì)胞數(shù)，計(jì)算VEGF陽性細(xì)胞表達(dá)率。VEGF陽性細(xì)胞表達(dá)率＝陽性細(xì)胞數(shù)/計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)×100%。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理計(jì)量資料以±s表示，采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析。2結(jié)果2.1各組小鼠體質(zhì)量變化和毒、副反應(yīng)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間，各組小鼠體質(zhì)量均逐漸增加，但在后期對(duì)照組小鼠腫瘤負(fù)荷較大，與各用藥組比較，體質(zhì)量增加減慢。給藥1周后，對(duì)照組小鼠食欲下降，皮毛失去光澤，行動(dòng)遲緩；各用藥組小鼠食欲良好，

7、毛色有光澤，行動(dòng)靈活，且聯(lián)合組與DDP組和IFN組之間無明顯差別。見表1。表1各組小鼠在給藥過程中體質(zhì)量比較（略）2.2各組抑瘤效果與對(duì)照組比較，DDP組、IFN組及聯(lián)合組腫瘤生長延緩(F=396.84,q=741.32～1040.00，P0.05)。各用藥組的瘤質(zhì)量均顯著性低于對(duì)照組(F=260.58,q=0.72～1.08，P0.05)，且聯(lián)合用藥組的瘤質(zhì)量較DDP組和IFN組均顯著降低(q=0.37、0.29，P0.05)。見表2。表2各組小鼠給藥過程中瘤體積和瘤質(zhì)量比較(略）2.3腫瘤組織MVD和VEGF表達(dá)水平比較與對(duì)照組

8、比較，各用藥組腫瘤組織MVD和VEGF陽性表達(dá)率均顯著性降低(F=157.04、52.97,q=9.55～19.02，P0.05)。與DDP組和IFN組比較，聯(lián)合組的MVD和VEGF陽性表達(dá)率均降低，差異有顯著意義(q=5.25～9.