高效液相色譜法測定人血漿中纈沙坦的藥物濃度論文

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1、高效液相色譜法測定人血漿中纈沙坦的藥物濃度論文.freel×200nm,5μm);流動相:乙腈-0?01mol/L的磷酸鹽緩沖液(50∶50,pH2?8);流速:1?5ml/min;熒光檢測器:λex為265nm,λem為378nm。結果:纈沙坦的保留時間為5?4min,定量線性范圍0?05~5μg/ml,方法回收率90%(n=5),日內、日間RSD10%(n=5)。結論:本法快速.freelinethevalsartanconcentrationinhumanplasma?METHODS:Theplasmasampleethodanddetermined×200nm,5μm),mobile

2、phaseconsistedofacetonitrileand0?01mol/LKH2PO4buffer(pH2?8)(50∶50)?Theflol/min?Detectioned,λem378nm?RESULTS:Theretentiontimeofvalsartaninutes,andthelinearrangeofquantityl?Therecoveriesofmethodologyorethan90%(n=5)?Inter-dayandintra-dayRSDethodisrapidandaccurate?Itcanbeappliedtodeterminingtheplasmava

3、lsartanconcentrationandstudyingonpharmacokiics?KEYillennium2010色譜管理系統(tǒng)(美國g,2?5ml)購于大連化學物理研究所。纈沙坦對照品(哈爾濱寧宇藥物研究所提供,含量99?6%);纈沙坦膠囊(批號:060200,有效期:2001年8月,規(guī)格:80mg/粒,購于諾華制有限公司);乙腈為色譜純,鹽酸、磷酸二氫鉀均為分析純,水為超純水。1.2各種試液的配制磷酸鹽緩沖液(0?01mol/L,pH2?8):稱取1?36g磷酸二氫鉀定容于1000ml容量瓶中,用磷酸調pH即得。稀鹽酸(0?1mol/L):量取9ml濃鹽酸定容于1000ml容量

4、瓶中,搖勻即得。標準貯備液:精密稱取纈沙坦對照品5?03mg,用流動相定容于50ml容量瓶中,使成100μg/ml的標準貯備液,置于?4℃冰箱保存。1.3色譜條件色譜柱:HpersilODSC18(5μm,4?6nm×200nm);流動相∶乙腈-磷酸鹽緩沖液(0?01mol/L,pH2?8)(50∶50);流速:1?5ml/min;柱溫:25℃。1.4血樣處理方法SPEC8固相萃取小柱依次用甲醇、稀鹽酸各2ml沖洗1次,取血漿1ml與稀鹽酸1ml旋渦混勻后上柱,然后用磷酸鹽緩沖液1ml沖洗1次,整個過程均在減壓下進行,抽干后除去減壓系統(tǒng),加入0?5ml流動相洗脫,收集洗脫液,進樣25μl,按

5、上述色譜條件測定。2結果2.1色譜行為在上述色譜條件下,纈沙坦與血漿內源性物質實現較好分離,色譜圖見圖1。纈沙坦的保留時間為5?4min。2.2標準曲線取空白血漿900μl,精密加入100μl不同濃度的標準液使成為0?05、0?1、0?25、0?5、1、2?5、5μg/ml的含藥標準血漿。按“血樣處理方法”項下操作,記錄峰面積,以峰面積A對濃度C做回歸,得回歸方程:C=2?01×10-6A+0?0348,r=0?9999。2.3回收率于空白血漿中準確加入定量的纈沙坦標準液,配成低、中、高濃度分別為0?05、1、5μg/ml的含藥標準血漿各5份。按“血樣處理方法”項下操作,記錄峰面積,代入標準

6、曲線方程計算濃度,以計算濃度與配制濃度的比值計算方法回收率,結果見表1。2.4精密度配制濃度為0?05、1、5μg/ml的纈沙坦標準含藥血漿各10份,按“血樣處理方法”項下操作,于當日不同時間測定低、中、高濃度各5份,計算日內變異,另低、中、高濃度的樣品各5份在連續(xù)的5日內測定,計算日間變異,結果見表2。按色譜峰信噪比(S/N≥3)計,該方法的最低檢測濃度為5ng/ml。3方法應用20名男性健康志愿者單劑量口服纈沙坦膠囊160mg,服藥前采空白血,分別于服藥后0?5、1、1.5、2、3、4、6、8、12、24h采靜脈血3ml,用本法測定血漿纈沙坦?jié)舛?,其藥-時曲線見圖2。由圖2可知,服藥后約

7、2h纈沙坦達血漿峰濃度1?6μg/ml。用梯型法計算該藥的AUC0~24為10?8μg/(h/ml)。表1纈沙坦測定的方法回收率(n=5)表2纈沙坦測定的精密度結果(n=5)4討論本文建立了一種靈敏、快速、準確的高效液相色譜法測定血漿中纈沙坦的藥物濃度,且該方法適用于纈沙坦的藥代動力學方面的研究。與文獻相比2,該方法的改進之處在于提取方法,試驗中發(fā)現用乙腈-磷酸鹽緩沖液(30∶50)1ml洗脫小柱,在去掉血中

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