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《正交實驗優(yōu)選強骨膠囊水提部分制備工藝論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、正交實驗優(yōu)選強骨膠囊水提部分制備工藝論文王慶偉劉雪英胡玉珍梅其炳劉莉?qū)O陽朱彥榮【摘要】目的：通過正交試驗優(yōu)選強骨膠囊水提部分的制備工藝.方法：建立高效液相色譜法測定二苯乙烯苷含量的方法，以二苯乙烯苷的含量為考察指標(biāo)，考察提取時間、提取次數(shù)及水用量3個因素對提取結(jié)果的影響.結(jié)果：水提最佳工藝為:6倍量的水，回流提取2次，每次3h.結(jié)論：優(yōu)選的提取工藝穩(wěn)定，可行.【關(guān)鍵詞】強骨膠囊；正交實驗設(shè)計；高效液相色譜；二苯乙烯苷0引言骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis,OP)以骨組織骨量減少、顯微結(jié)構(gòu)退化為特征,易發(fā)生低創(chuàng)性
2、或無創(chuàng)性骨折的系統(tǒng)性骨胳疾病.該病所致的疼痛、畸形及骨折嚴(yán)重降低了中老年人的生活質(zhì)量，已成為世界范圍內(nèi)流行的危害人類健康的主要疾病.本單位研制的強骨膠囊由續(xù)斷、丹參、白術(shù)、黃芪、牛膝、山茱萸、熟地黃、制何首烏、山藥等組成.為了提高產(chǎn)品的質(zhì)量，本研究通過正交實驗.freelpog，用500mL/L乙醇溶解并定容于10mL棕色量瓶中制備儲備液，4℃避光保存?zhèn)溆?1.2.3樣品及空白樣品制備按照處方比例的1/10稱取制何首烏、山茱萸、熟地黃、山藥4味藥，置回流提取器中，按L9（34）正交表安排實驗，回流提取，提取液過濾，
3、合并，減壓濃縮，冷凍干燥.精密稱取干燥產(chǎn)品適量，加10mL流動相超聲溶解并定容于25mL量瓶中，0.45μm微孔濾膜過濾，高效液相色譜法測定.取處方量山茱萸、熟地黃、山藥加8倍量水，水提取3次，每次2h，合并濾液，減壓濃縮，冷凍干燥.按照樣品的制備方法制備空白樣品.2結(jié)果2.1二苯乙烯苷含量測定方法建立2.1.1色譜條件及方法專屬性［2］色譜柱:KromasilC18柱（250mm×4.6mm）；流動相:乙腈∶水=22∶78(v/v)；流速:1mL/min；檢測波長:320nm；柱溫:25℃.在該色譜條件下，所用中
4、藥中的其他成分對二苯乙烯苷的測定幾乎無干擾，分離良好，保留時間t=7.85min(圖1).A：二苯乙烯苷對照品；B：空白樣品；C：樣品.圖1二苯乙烯苷對照品、空白樣品及樣品色譜圖2.1.2二苯乙烯苷標(biāo)準(zhǔn)曲線制備與線性考察精密移取二苯乙烯苷儲備液適量，用流動相逐步稀釋成0.506,5.06,10.12,20.12,30.36,50.60,101.20mg/L的二苯乙烯苷對照品溶液，于上述色譜條件下測定，記錄色譜圖，以對照品濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，二苯乙烯苷的回歸方程為：Y=34031.46X+
5、569.87，r=0.9998，二苯乙烯苷在0.506~101.20mg/L的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系.2.1.3精密度測定和穩(wěn)定性實驗將濃度分別為0.506,30.36,.freelg/L的二苯乙烯苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液于同一天（12h內(nèi)）進(jìn)樣5次，于不同的3天再進(jìn)樣5次(室溫和正常照明條件下儲存)，記錄色譜圖，按回歸方程計算濃度，測定工作曲線范圍內(nèi)低、中、高3個濃度的日內(nèi)精密度和日間精密度以及二苯乙烯苷在該實驗環(huán)境下的穩(wěn)定性（表2）.表2精密度與穩(wěn)定性實驗結(jié)果精密度實驗結(jié)果表明，二苯乙烯苷在該實驗環(huán)境下，12h內(nèi)比較穩(wěn)定，
6、精密度小于3；而較長時間放置后不穩(wěn)定；3d后濃度明顯降低，與文獻(xiàn)報道［3］一致.2.1.4加樣回收率實驗精密移取5mL二苯乙烯苷含量為145.83mg/L的樣品溶液3份，分別精密加101.20mg/L的二苯乙烯苷標(biāo)準(zhǔn)溶液1，2，4mL，50mL/L乙醇定容于25mL棕色容量瓶中，0.45μm微孔濾膜過濾，于上述色譜條件下，每次進(jìn)樣20μL，記錄色譜圖，依照標(biāo)準(zhǔn)曲線計算二苯乙烯苷含量，并計算回收率（表3）.表3回收率實驗結(jié)果2.2正交實驗樣品中二苯乙烯苷含量的測定及結(jié)果分析按照上述樣品制備方法及色譜條件，依法測定正交
7、實驗樣品，記錄色譜圖，依照標(biāo)準(zhǔn)曲線計算二苯乙烯苷含量（表4），結(jié)果進(jìn)行方差分析.3討論補益類中藥在骨質(zhì)疏松的防治中占有重要的地位［3］.研究結(jié)果表明何首烏煎劑及水提物可抑制骨吸收，但不明顯抑制骨形成.而二苯乙烯苷為何首烏的主要水溶性成分［4-5］.故本實驗選用二苯乙烯苷為指標(biāo).本實驗建立的HPLC法測定二苯乙烯苷含量的方法靈敏、精密度高、重現(xiàn)性好，二苯乙烯苷在0.506~101.20mg/mL的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，可用于該實驗樣品中二苯乙烯苷的測定.文獻(xiàn)報道［6］，酸性、強堿性、光線、甲醇等是促使二苯乙烯苷發(fā)生
8、化學(xué)變化的主要因素.本實驗的日間精密度實驗也顯示，即使在中性環(huán)境的溶液中，二苯乙烯苷在常溫和正常光照的條件下儲存時也不穩(wěn)表4正交試驗設(shè)計的結(jié)果定，在500mL/L的乙醇溶液里，3d后含量可下降7%左右，因此測定二苯乙烯苷含量時，盡可能避免用酸或堿性溶液配制，須避光儲存，流動相中避免使用甲醇，盡可能在較短的時間內(nèi)完成實驗.以二苯乙烯苷的含量為考察指標(biāo)，根據(jù)正交
