乙草胺對(duì)生物的急性毒理研究論文

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1、乙草胺對(duì)生物的急性毒理研究論文【摘要】目的研究乙草胺對(duì)泥鰍的的毒害作用，為魚(yú)類養(yǎng)殖和影響人類身體健康的環(huán)境監(jiān)測(cè)提供依據(jù)。方法對(duì)泥鰍進(jìn)行了乙草胺急、慢性毒性試驗(yàn)。結(jié)果安全濃度為1.41μl/L。在乙草胺污染的水體中殘存的個(gè)體,.freelentalmonitoring.MethodsApairofacetochloracuteandchronictoxicitytestsforloachutationrateintheacetochloruchhigherthanthatinnormalutationrate.【Keyalies乙草胺（acetochlor

2、）是酰胺類最具代表性的、我國(guó)使用最多的3種除草劑中的一種［1］。乙草胺原藥在我國(guó)的使用量已超過(guò)107kg［2］。自1994年美國(guó)環(huán)保局EPA批準(zhǔn)乙草胺有條件注冊(cè)使用以來(lái)，乙草胺在美國(guó)的使用量也迅速增加，1996年美國(guó)的乙草胺使用量已經(jīng)達(dá)到1.35×107kg。據(jù)報(bào)道［3］，美國(guó)的淺層地下水和塞納河水中乙草胺的檢出量為0.05～0.17μg/L。眾所周知，農(nóng)藥自身通過(guò)其在環(huán)境中的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物直接或間接地影響人類的身體健康。采取生物標(biāo)志物來(lái)對(duì)乙草胺這種低毒、長(zhǎng)期的污染物進(jìn)行合理地評(píng)價(jià)是一值得探討的問(wèn)題。泥鰍（Misgurnusanguillicadatus）屬魚(yú)

3、綱.freel×25cm×25㎝，充氣泵15個(gè)，中型塑料水桶6個(gè)。乙草胺為江蘇昆山化工廠生產(chǎn)。1.2實(shí)驗(yàn)魚(yú)養(yǎng)殖與分組實(shí)驗(yàn)用水為陽(yáng)光曝氣7d的自來(lái)水，水溫為（22±1）℃，pH7.4左右。在消毒好的水桶中暫養(yǎng)泥鰍若干尾，以供整個(gè)試驗(yàn)所需。魚(yú)缸中水量為50cm×25cm×20cm。每個(gè)魚(yú)缸中投放30尾魚(yú)暫養(yǎng)，每天上午10：00換一次水。發(fā)現(xiàn)死亡的要及時(shí)撈出。泥鰍暫養(yǎng)一周后，在每個(gè)魚(yú)缸中挑選健康活潑，體表無(wú)損、個(gè)頭均等的個(gè)體10尾繼續(xù)試驗(yàn)，采用完全隨機(jī)方法進(jìn)行分組。1.3半數(shù)致死濃度和安全濃度的測(cè)定方法通過(guò)預(yù)試驗(yàn)，設(shè)計(jì)3.4、3.6、3.8、4.0、4.2、4

4、.6、4.8、5.0μl/L的藥液共8個(gè)濃度組，每個(gè)濃度放10尾魚(yú)。每個(gè)魚(yú)缸中按設(shè)計(jì)濃度加入藥液，外設(shè)一個(gè)魚(yú)缸用曝氣自來(lái)水做對(duì)照。分別記錄24、48h各濃度的泥鰍死亡數(shù)目。根據(jù)加權(quán)概率法計(jì)算半數(shù)致死濃度TLm，并根據(jù)以下公式計(jì)算安全濃度。安全濃度=TLm48×0.3（TLm24/TLm48）21.4對(duì)紅細(xì)胞核異常的誘導(dǎo)作用血涂片的制備以24h內(nèi)泥鰍不出現(xiàn)死亡和明顯異常（如形態(tài)、行為異常等）為標(biāo)準(zhǔn)，確定最高染毒濃度為2.0μl/L。以2.0μl/L為標(biāo)準(zhǔn)，依次以1/2濃度梯度遞減，確定5個(gè)試驗(yàn)組。由此，將乙草胺用曝曬好的自來(lái)水配制成2.0、1.0、0.5、

5、0.25、0.125μl/L5個(gè)濃度組，分別為最高使用濃度的1/1000、1/2000、1/4000、1/8000、1/16000。另設(shè)一不加乙草胺的對(duì)照組。對(duì)照組和每一試驗(yàn)組均投放10尾泥鰍，每24h更換一次處理液。5個(gè)魚(yú)缸中按設(shè)計(jì)濃度加入藥液，分別在24、48、96h時(shí)從各濃度的處理液中隨機(jī)取2條泥鰍斷尾取血，制作血涂片，每組制作兩張。涂片先用無(wú)水乙醇固定3min，再浸入新鮮配制的姬姆薩染色液中染30min，用水沖洗后在空氣中晾干。對(duì)照組按同樣步驟制作血涂片兩張。將血涂片置于油鏡下觀察血紅細(xì)胞形態(tài)有無(wú)畸變，記錄異常數(shù)。紅細(xì)胞異常的判斷按照婁允東等［4

6、］的標(biāo)準(zhǔn)，包括微核、核空泡、核凸出、核內(nèi)凹、雙核等。每張片觀察3000個(gè)左右。統(tǒng)計(jì)微核及核異常細(xì)胞率，結(jié)果以千分率（‰）表示。選取紅細(xì)胞微核和核異常的經(jīng)顯微攝影拍照。微核及核異常鑒別見(jiàn)薛開(kāi)先等［5］。采用二項(xiàng)分布的單樣本檢驗(yàn)對(duì)統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行分析。微核細(xì)胞率=帶有微核的細(xì)胞數(shù)/觀察的細(xì)胞總數(shù)×1000‰核異常細(xì)胞率=具有核異常（除微核外）的細(xì)胞總數(shù)/觀察的細(xì)胞總數(shù)×1000‰總核異常細(xì)胞率=微核細(xì)胞率+核異常細(xì)胞率2結(jié)果2.1泥鰍在乙草胺中的染毒試驗(yàn)反應(yīng)泥鰍在放入染毒液后呈現(xiàn)不安游動(dòng)和上竄的現(xiàn)象，幾分鐘后趨于平靜。濃度越高，不安現(xiàn)象越長(zhǎng)。5h后泥鰍個(gè)體開(kāi)始出

7、現(xiàn)上頜潰爛，有的出現(xiàn)大量出血點(diǎn)、肛門外翻、體壁變薄等體表變化。死前1min左右圍繞缸壁做劇烈運(yùn)動(dòng)，繼而死亡。死后體表出現(xiàn)粘液，但全身未見(jiàn)充血現(xiàn)象。2.2半數(shù)致死濃度和安全濃度的計(jì)算每染毒濃度各放10尾魚(yú)，染毒24h泥鰍死亡數(shù)見(jiàn)表1。表1染毒試驗(yàn)?zāi)圉q死亡情況采用加權(quán)概率單位法，計(jì)算24h急性中毒試驗(yàn)的半數(shù)致死量為4.7μl/L；95%置信區(qū)間為（4.5μl/L，4.9μl/L）。48h中毒試驗(yàn)的半數(shù)致死量為4.4μl/L；95%置信區(qū)間為（4.1μl/L，4.6μl/L）。安全濃度=TLm48×0.3（TLm24/TLm48)2=(4.4×0.3)÷(4.

8、7/4.4)2=1.41(μl/L)2.3乙草胺污染液對(duì)泥鰍紅細(xì)胞核異常的誘導(dǎo)作