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1、細胞角蛋白在正常皮膚組織中的表達作者：孫莉，李紅，劉淑梅，徐志秀【摘要】目的觀察7種細胞角蛋白（cytokeratins，CK）在正常皮膚組織的表達，并探討其意義。方法應用免疫組織化學S-P法對20例不同部位的正常皮膚組織進行CK7（K72.2）、CK8（C-51）、CK10（DE-K10）、CK14（LL002）、CK17（E3）、CK18（DC10）、CK19（KS19.1）標記，觀察不同細胞角蛋白的表達情況。結果在正常皮膚上皮組織中，7種細胞角蛋白的表達和分布有所不同。結論有選擇地檢測一組CK的聯(lián)合表達，有助于各種皮膚上皮組織的識別?！娟P鍵詞】細胞角蛋白；皮膚；免疫組織化學【Abst
2、ract】ObjectiveToobserveimmunohistochemicalexpressionofsevencytokeratinsonskinandtoassessitsdiagnosticvalue.MethodsImmunohistochemicalmarkers，includingCK7（K72.2），CK8（C-51），CK10（DE-K10），CK14（LL002），CK17（E3），CK18（DC10）andCK19（KS19.1）munohistochemicalstainingmethods.Theexpressionofcytokeratinsalskinep
3、ithelialtissuesof20cases.Conclusionprehensiveanalysisofaselectivecytokeratingroup，canassistdistinguishedofvariousskinepithelialtissues.【Keymunohistochemistry哺乳動物的細胞質含有復雜的細胞骨架蛋白，包括微絲、微管和中間絲。中間絲有細胞角蛋白Ⅰ、細胞角蛋白Ⅱ、結蛋白、波形蛋白、膠質纖維酸性蛋白、神經纖維等6種。上皮細胞胞質中的骨架蛋白除微絲（肌動蛋白）、微管蛋白外，主要是細胞角蛋白（cytokeratins，CK）。CK是上皮細胞的特征性
4、標記物，由生物化學和免疫學方法根據(jù)CK分子量的不同，分為20種，是一個龐大復雜的家族。不同類型的上皮細胞和同類型上皮細胞的不同分化階段，表達不同的CK。當上皮組織發(fā)生瘤變甚至癌變后，仍然表達與正常組織基本相同的CK類型。皮膚的上皮性腫瘤，包括表皮和皮膚附屬器腫瘤，類型繁多，組織形態(tài)復雜，有時鑒別診斷十分困難。研究不同CK在正常皮膚組織的表達，可能對表皮和皮膚附屬器腫瘤的診斷具有一定價值。1材料與方法1.1材料所有正常皮膚的研究標本均來自勝利油田中心醫(yī)院2003～2004年收檢的病例，包括5例乳腺癌根治手術切除標本中遠離腫瘤的胸部皮膚，5例直腸癌手術切除標本遠離腫瘤的肛旁皮膚和10例不同部位
5、的色素痣切除標本的切緣皮膚。1.2試劑第一抗體為7種不同的細胞角蛋白單克隆抗體，包括CK7（K72.2）、CK8（C-51）、CK10（DE-K10）、CK14（LL002）、CK17（E3）、CK18（DC10）、CK19（KS19.1），均為工作液；免疫組織化學檢測系統(tǒng)采用過氧化物酶標記的即用型UltraSensitiveTMS-P試劑盒；顯色試劑為高敏感二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色試劑盒。以上試劑購自福州邁新生物技術開發(fā)有限公司。1.3方法復查勝利油田中心醫(yī)院2001～2004年收檢的所有皮膚上皮性腫瘤病例的存檔切片，從中選取所有皮膚附屬器腫瘤及部分皮膚癌病例為研究對象。對存檔蠟塊重新
6、切片，進行免疫組織化學染色?？乖迯?，CK7標記皮膚附屬器腫瘤采用胰酶消化法，胰酶濃縮液和稀釋液1∶3混勻，滴片后37℃孵育15min；CK8、CK10、CK14、CK17、CK18、CK19等6種抗體染色標記的切片，采用檸檬酸緩沖液高溫高壓法，高壓鍋內置pH6.0的0.01mmol/L檸檬酸緩沖液，加熱至沸騰，放入切片，密閉高壓鍋繼續(xù)加熱，噴汽后2min停止。S-P法免疫組化標記，DAB顯色。以PBS代替一抗做空白對照。1.4結果判定所有免疫組化染色結果在光鏡下進行觀察和評判。7種CK陽性表達位置均為細胞質。參照許良中等［1］的方法，綜合考慮切片中陽性細胞占所觀察同類細胞數(shù)的百分比和陽性
7、細胞著色強度兩項標準，半定量判斷結果。根據(jù)顯色程度判斷陽性強度，分為4級，無著色為陰性，記0分；淺黃色為弱陽性，記1分；棕黃色為中度陽性，記2分；棕褐色為強陽性，記3分。根據(jù)陽性細胞數(shù)量在觀察的同類細胞中所占比例，分為4類，即陽性細胞≤2%為“個別”，記0分；陽性細胞數(shù)3%～20%為“少量”，記1分；21%～60%為“中量”，記2分；>60%為“大量”，記3分。綜合評價值由兩類記分分值的乘積表示，0～3分為（-），
