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1、正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選參芪補(bǔ)血顆粒的提取工藝作者：李曉曄，劉文星，米存云，裴軍平，秦向陽【關(guān)鍵詞】參芪補(bǔ)血顆粒；,,正交實(shí)驗(yàn)；,,高效液相色譜法；,,黃芪甲苷 摘要：目的研究參芪補(bǔ)血顆粒劑的最佳提取工藝。方法選用L9（34）正交表設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，并以黃芪甲苷(C41H68O14)和干膏得率作為考察指標(biāo)，考察乙醇濃度、乙醇用量、提取次數(shù)、提取時(shí)間對(duì)提取效果的影響。結(jié)果參芪補(bǔ)血顆粒的最佳提取工藝為用65%的乙醇8倍量，回流提取3次，1.5h/次。結(jié)論采取正交設(shè)計(jì)篩選出最佳提取方法較好，操作簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好，有效成分提取率高，工藝可行。 關(guān)鍵詞：參芪補(bǔ)血顆粒；正交實(shí)驗(yàn)；高效液相色譜法；黃芪甲苷 Ab
2、stract：ObjectiveTodeveloptheoptimalextractivetechniquesofShenqibuxueGranules.MethodsL9（34）orthogonalexperimententsinextractivetechniques.Theyieldofastragaloside(C41H68O14)anddryextractconditionedextractingcrudedrugsfromalcohol.Moneover,inthelightofcontentindexes,fourfactorsmustbetakenintoconsid
3、eration:thefrequencyandtimeofextracting,thequantityandconcentrationofalcohol.ResultsTheoptimalextractivetechniqueses,eachtimefor1.5h.ConclusionTheproposedmethodsresultingoodreproducibilityasalextractivetechniques. Keyent;HPLC;Astragaloside 參芪補(bǔ)血顆粒是由黃芪、當(dāng)歸、制首烏、黨參等6味中藥組成的中藥復(fù)方制劑。主要用于治療貧血和放射、化療時(shí)引起的
4、白細(xì)胞、血小板減少等血虛癥。黃芪系方中君藥，黃芪甲苷為其活性成分之一，對(duì)藥物和放射所致白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞降低具有明顯的改善作用［1］，并且其穩(wěn)定性好。因此，測(cè)定提取液中黃芪甲苷的含量可作為評(píng)價(jià)本制劑質(zhì)量的客觀指標(biāo)之一，浸膏提取量也可作為有效成分提取率的指標(biāo)。故為了發(fā)揮藥物的最佳療效，優(yōu)化制備工藝，本文以黃芪甲苷含量為指標(biāo)、結(jié)合浸膏得率，用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選本制劑的最佳提取工藝，為工業(yè)化生產(chǎn)提供依據(jù)?！ ?儀器與試劑 DIONEXSummit680高效液相色譜儀(美國)：DIONEXP680HPLCPUMP，ThermostattedColumnpartmemtTCC-100，Alltec
5、h2000ES型ELSD、DIONEXChromenleonChromatographyManagementSystem；SK250LH型超聲波清洗器（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）；ZORBAXExtendC18（4.6mm×150mm，5μm美國安捷倫科技有限公司）色譜柱。黃芪甲苷對(duì)照品（0781200311）中國藥品生物制品檢定所；參芪補(bǔ)血顆粒由第四軍醫(yī)大學(xué)藥物研究所和化學(xué)教研室研制；乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑為分析純。 2方法與結(jié)果 2.1高效液相色譜方法的建立 2.1.1色譜條件流動(dòng)相乙腈水（32∶68）；流速：1.0ml・min-1；柱溫：25℃；
6、Alltech2000ES型ELSD；飄移管溫度：100.6℃；氣體流速：2.7L・min-1；進(jìn)樣量：20μl；理論塔板數(shù)以黃芪甲苷峰計(jì)算大于5000。色譜圖見圖1?！ -對(duì)照品b-供試品 圖1色譜圖（略） 2.1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取黃芪甲苷對(duì)照品12.5mg置于25ml容量瓶中，加入無水甲醇定容至25ml，配制為0.5mg・ml-1的黃芪甲苷對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。用移液管分別精密移取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml黃芪甲苷對(duì)照品儲(chǔ)備溶液置10ml容量瓶中，加甲醇定容，分別得到濃度為0.05，0.10，0.15，0.20，0.25
7、,0.30mg・ml-1的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，用0.45μm微孔濾膜濾過，進(jìn)樣20μl在給定色譜條件下進(jìn)行測(cè)定。以進(jìn)樣量的常用對(duì)數(shù)值（x）為橫坐標(biāo)，蒸發(fā)光峰面積的常用對(duì)數(shù)值（y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為：y=0.957+1.635x，r=0.9992，黃芪甲苷在1.0~6.0μg的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系?！ ?.2提取方法的選擇 2.2.1醇提正交實(shí)驗(yàn)根據(jù) 2.2.2提取液中黃芪甲苷和干浸膏得率的測(cè)定提取液中黃芪：甲苷含量測(cè)定用移液管
