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1、樹(shù)舌多糖抑制胃癌MGC作者：李榮輝，王玉，鄭麗紅，張春晶，許惠玉，張英博，潘洪明【摘要】目的研究樹(shù)舌多糖(Ganodermaapplanatumpolysaccharides,GAPS)粗提物對(duì)人胃粘液性腺癌MGC-803細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及其對(duì)受體蛋白酪氨酸激酶EGFR表達(dá)的影響，探討樹(shù)舌多糖抗腫瘤作用機(jī)制。方法MTT法檢測(cè)不同時(shí)間不同濃度樹(shù)舌多糖對(duì)胃癌細(xì)胞MGC-803增殖抑制作用;流式細(xì)胞儀檢測(cè)2.0g/L樹(shù)舌多糖作用72h后MGC-803細(xì)胞的周期分布，流式細(xì)胞儀檢測(cè)和免疫熒光顯微鏡觀察樹(shù)舌多糖對(duì)MGC-803細(xì)胞EGFR表達(dá)的影響。結(jié)果樹(shù)舌多糖
2、對(duì)胃癌細(xì)胞MGC-803具有增殖抑制作用，并呈時(shí)間及濃度依賴性。2.0g/L樹(shù)舌多糖作用72h后，MGC-803細(xì)胞被阻滯于G0/G1期，S期和G2/M期細(xì)胞減少，與細(xì)胞對(duì)照組比較有差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。熒光顯微鏡下觀察樹(shù)舌多糖組MGC-803細(xì)胞EGFR熒光強(qiáng)度較對(duì)照組明顯減弱;流式細(xì)胞儀檢測(cè)樹(shù)舌多糖能下調(diào)MGC-803細(xì)胞EGFR表達(dá)，與細(xì)胞對(duì)照組比較有差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論樹(shù)舌多糖可以抑制胃癌MGC-803細(xì)胞的增殖，這與樹(shù)舌多糖能夠阻止腫瘤細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期、延緩細(xì)胞周期進(jìn)程，降低受體型酪氨酸蛋白
3、激酶EGFR的表達(dá)、阻斷細(xì)胞增殖信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的信息傳遞有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】樹(shù)舌多糖;MGC-803細(xì)胞;增殖;細(xì)胞周期 Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofcrudepolysaccharideextractedfromGanodermaapplanatum(GAPS)onproliferation,cellcycleandEGFRexpressionofhumangastriccancercelllineMGC-803anditspossiblemechanisms.MethodsMTTassayetry(FCM).
4、ThefluorescenceintensityofEGFRexpressioninMGC-803cellsicroscope.ResultsGAPSinhibitedtheproliferationofMGC-803cellsindose-dependentandtime-dependentmanners.AfterMGC-803cellsaMGC-803cellsandpreventcellcyclefromsteppingdoationtransmissionofcellproliferationsignaltransductionpathaapp
5、lanatum又稱“老牛肝”“扁芝”或“扁木靈芝”，是一種大型擔(dān)子菌，靈芝科植物樹(shù)舌靈芝的干燥子實(shí)體。我國(guó)大部分地區(qū)均有分布，生長(zhǎng)在闊葉樹(shù)樹(shù)干上或根部，其性平，味微苦，具有清熱、止痛、化積、止血、化痰、抗癌等功效。國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)樹(shù)舌多糖抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究，從增加宿主免疫功能到對(duì)腫瘤細(xì)胞的直接作用、對(duì)癌基因,抑癌基因的調(diào)控以及對(duì)蛋白質(zhì)組表達(dá)的影響等研究[1～7]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)樹(shù)舌多糖作用于體外培養(yǎng)胃癌細(xì)胞MGC-803，觀察其對(duì)胃癌細(xì)胞增殖和EGFR表達(dá)的影響及探討機(jī)制?！ ?材料與儀器 1.1細(xì)胞株胃癌MGC-803細(xì)胞購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院,細(xì)
6、胞以1×105/ml接種于培養(yǎng)瓶中，加入含有10%滅活的胎牛血清、100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素的RPMI-1640完全培養(yǎng)液，置于37℃恒溫，5%CO2及飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，每2～3d傳代1次。當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%時(shí)傳代，用0.25%胰蛋白酶消化，棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基吹打均勻，按1∶3傳代?！ ?.2藥物樹(shù)舌多糖(含量30%)購(gòu)于哈爾濱樂(lè)泰藥業(yè)有限公司岔林河中藥提取廠。按照 3結(jié)果 3.1樹(shù)舌多糖對(duì)MGC-803細(xì)胞增殖抑制作用MTT檢測(cè)結(jié)果顯示樹(shù)舌多糖抑制MGC-803細(xì)胞的增殖，并呈時(shí)間和劑量依賴性，即隨著藥物
7、濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞增殖抑制作用明顯加強(qiáng)。2.0g/L樹(shù)舌多糖作用72h后對(duì)MGC-803抑制率為45.2%。結(jié)果見(jiàn)圖1?！ D1樹(shù)舌多糖對(duì)MGC-803細(xì)胞增殖抑制曲線 3.2樹(shù)舌多糖對(duì)細(xì)胞周期分布的影響MGC-803細(xì)胞在2.0g/L樹(shù)舌多糖作用72h后，收集細(xì)胞上流式細(xì)胞儀并檢測(cè)分析細(xì)胞周期分布，經(jīng)ModFitLTformacv3.0軟件分析結(jié)果：樹(shù)舌多糖使MGC-803細(xì)胞的G0/G1期細(xì)胞比例有所增加，而S、G2/M期細(xì)胞比例下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果見(jiàn)表1及圖2。表1樹(shù)舌多糖對(duì)MGC-803細(xì)胞周期的影響
8、 3.3樹(shù)舌多糖對(duì)MGC-803細(xì)胞EGFR表達(dá)的影響2.0g/L樹(shù)舌多糖作用
