滇桂艾納香中氨基酸的提取工藝研究

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1、滇桂艾納香中氨基酸的提取工藝研究作者：李倩，黃麗，林翠梧，韋保耀，滕建文【摘要】目的優(yōu)選滇桂艾納香中氨基酸的提取純化工藝。方法采用不同的溶劑提取法,考察不同吸附時(shí)間、不同的pH值、洗脫劑種類(lèi)、洗脫劑濃度對(duì)717陰離子樹(shù)脂性能的影響。結(jié)果超聲波輔助水提取得到較高的氨基酸提取率為0.220%,吸附時(shí)間6h,在提取液pH=12時(shí)上柱,用氯化銨梯度洗脫,氨基酸的收率可達(dá)87.11%，氨基酸純度達(dá)到92.12%。結(jié)論該工藝條件回收率高且穩(wěn)定達(dá)到了理想的實(shí)驗(yàn)效果?！娟P(guān)鍵詞】氨基酸;提取純化;717陰離子交換樹(shù)脂　　Abstract：ObjectiveTo

2、optimizeatechnicalprocessforextractionandpurificationofaminoacidsfromBlumeariparia(BL.)DC.MethodsDifferentsolventsinoacidsandtheeffectsofdifferentabsorptiontime,pH，eluateandeluateconcentrationon717anionexchangeresininoacidsinoacidse6h，pH=12，NH4Clgradientelution.ConclusionTh

3、ismethodisefficient，stableandreasonable.　　Keyinoacids;Extractionandpurification;717Anionexchangeresin　　滇桂艾納香Blumeariparia(BL.)DC，在《中國(guó)植物志》里亦有收載，稱(chēng)假東風(fēng)草[1]，民間習(xí)用全草入藥?！吨腥A藥海》中記載，滇桂艾納香性味歸經(jīng):淡、甘平，入肝、腎、膀胱三經(jīng);功效主治活血止血——本品甘淡入肝，養(yǎng)肝活血，收斂止血，具有活血不傷血、止血不留淤之功，可用于各種出血癥;利水消腫——本品甘淡滲利，可利濕行水，主治小便不利浮

4、腫癥，用其性平、無(wú)寒熱、偏熱頗，故寒癥、熱癥可用之，尤對(duì)產(chǎn)后浮腫癥佳。起活血養(yǎng)血、利水消腫之效[2]?！缎氯A本草綱要》中亦提到其有活血、止血、利水的功能，用于治經(jīng)期提前，產(chǎn)后血崩，產(chǎn)后浮腫，不孕癥[3]?！　〉峁鸢{香提取物的強(qiáng)極性部分富含氨基酸成分。氨基酸類(lèi)化合物是一類(lèi)重要的天然產(chǎn)物，廣泛存在于動(dòng)植物中[4]。有構(gòu)成生物有機(jī)體的蛋白質(zhì)氨基酸，和非蛋白質(zhì)氨基酸，都具有多種生理活性，在醫(yī)藥及食品產(chǎn)業(yè)方面都有廣泛的應(yīng)用[5]。隨著研究的深入，其種類(lèi)也日趨增多，1981年日本小菅卓夫首次從三七中分得了三七素，一種特殊的氨基酸β-N-乙二酸?；?L-

5、α，β-二氨基丙酸(β-N-oxalo-L-α,β-diaminopropionicacid)具有縮短出血和凝血時(shí)間，有止血活性[6]。在臨床術(shù)后常用的止血氨基酸,有止血芳酸、止血環(huán)酸和6-氨基已酸等，它們的結(jié)構(gòu)類(lèi)似賴(lài)氨酸，可以和纖溶酶(原)上的賴(lài)氨酸位點(diǎn)結(jié)合。從而阻止纖溶酶(原)與纖溶蛋白(原)的結(jié)合，防止纖溶酶原激活和纖溶酶的破壞作用，減少纖維蛋白降解產(chǎn)物(FDP)和D-二聚體的產(chǎn)生，可間接保護(hù)血小板功能，起到止血作用[7]?！　∧壳爸饕獙?duì)滇桂艾納香地上部分的化學(xué)成分進(jìn)行研究，集中在揮發(fā)性化學(xué)成分，有機(jī)酸，黃酮類(lèi)物質(zhì)[8～14]。未見(jiàn)對(duì)其

6、氨基酸成分的研究報(bào)道，由于滇桂艾納香與三七都具有止血化淤功效，而滇桂艾納香的藥理作用機(jī)理尚未明確，本文對(duì)滇桂艾納香進(jìn)行不同溶劑提取，717陰離子交換樹(shù)脂富集純化氨基酸，旨在進(jìn)一步揭示其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為其進(jìn)一步研究提供一定的科學(xué)依據(jù)?！　?材料與儀器　　滇桂艾納香全草干草(廣西桂西制藥廠提供)。超聲清洗器(上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司SK3310LHC);紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司SP-756P)。717陰離子交換樹(shù)脂(三星樹(shù)脂科技有限公司);谷氨酸對(duì)照品(上海昊化化工有限公司)?！　?方法　　2.1氨基酸含量的測(cè)定采用國(guó)標(biāo)GB/T8

7、314-2002茶游離氨基酸含量測(cè)定方法，用谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)品?！　?.2游離氨基酸的提取及提取率測(cè)定分別采用50%乙醇，70%乙醇，水，80℃回流提取，及超聲輔助水提法。提取率按以下公式計(jì)算:A=C/B×100%，A為提取率(%)，B為原藥料質(zhì)量(g)，C為提取得氨基酸質(zhì)量(g)。　　2.3樹(shù)脂的預(yù)處理及總交換容量的測(cè)定717陰離子交換樹(shù)脂用過(guò)量的蒸餾水浸泡后，經(jīng)1mol/L氫氧化鈉和1mol/L鹽酸重復(fù)處理后，最后再用1mol/L氫氧化鈉浸泡，用蒸餾水洗至中性備用。總交換容量按以下公式計(jì)算:　　Q=CHClVHCl/V。Q為樹(shù)脂總交換容量(mo

8、l/L濕樹(shù)脂)，CHCl為HCl的摩爾濃度，VHCl為滴定消耗的HCl體積，V為濕樹(shù)脂的體積?！　?.4靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確稱(chēng)取己處理好的用來(lái)裝柱的樹(shù)脂2g，置25ml