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1、滇桂艾納香中氨基酸提取工藝探究作者:李倩,黃麗,林翠梧,韋保耀,滕建文【摘要】目的優(yōu)選滇桂艾納香中氨基酸的提取純化工藝。方法采用不同的溶劑提取法,考察不同吸附時間、不同的pH值、洗脫劑種類、洗脫劑濃度對717陰離子樹脂性能的影響。結(jié)果超聲波輔助水提取得到較高的氨基酸提取率為0.220%,吸附時間6h,在提取液pH=12時上柱,用氯化鞍梯度洗脫,氨基酸的收率可達(dá)87.11%,氨基酸純度達(dá)到92.12%o結(jié)論該工藝條件回收率高且穩(wěn)定達(dá)到了理想的實(shí)驗(yàn)效果。【關(guān)鍵詞】氨基酸;提取純化;717陰離子交換樹脂Abstract:O
2、bjectiveTooptimizeatechnicalprocessforextractionandpurificationofaminoacidsfromBlumeariparia(BL?)DC?MethodsDifferentsolventswereusedtoextractaminoacidsandtheeffectsofdifferentabsorptiontime,pH,eluateandeluateconcentrationon717anionexchangeresinwerestudied.ResuI
3、tsTheextractionyieldofaminoacidswas0.220%byultrasonicwavewaterextraction.Theyieldofaminoacidswas87.ll%andthepuritywas92.12%undertheconditionofabsorptiontime6h,pH=12,NH4C1gradientelution.ConclusionThismethodisefficient,stableandreasonable.Keywords:Aminoacids;Ext
4、ractionandpurification;717Anionexchangeresin滇桂艾納香Blumeariparia(BL.)DC,在《中國植物志》里亦有收載,稱假東風(fēng)草[1],民間習(xí)用全草入藥?!吨腥A藥?!分杏涊d,滇桂艾納香性味歸經(jīng):淡、甘平,入肝、腎、膀胱三經(jīng);功效主治活血止血一一本品甘淡入肝,養(yǎng)肝活血,收斂止血,具有活血不傷血、止血不留淤之功,可用于各種出血癥;利水消腫本品甘淡滲利,可利濕行水,主治小便不利浮腫癥,用其性平、無寒熱、偏熱頗,故寒癥、熱癥可用之,尤對產(chǎn)后浮腫癥佳。起活血養(yǎng)血、利水消腫之效[
5、2]?!缎氯A本草綱要》中亦提到其有活血、止血、利水的功能,用于治經(jīng)期提前,產(chǎn)后血崩,產(chǎn)后浮腫,不孕癥[3]。滇桂艾納香提取物的強(qiáng)極性部分富含氨基酸成分。氨基酸類化合物是一類重要的天然產(chǎn)物,廣泛存在于動植物中[4]。有構(gòu)成生物有機(jī)體的蛋白質(zhì)氨基酸,和非蛋白質(zhì)氨基酸,都具有多種生理活性,在醫(yī)藥及食品產(chǎn)業(yè)方面都有廣泛的應(yīng)用[5]。隨著研究的深入,其種類也日趨增多,1981年日本小菅卓夫首次從三七中分得了三七素,一種特殊的氨基酸B-N-乙二酸酰基-L-a,B-二氨基丙酸(B—N—oxalo-L-a,B—diaminoprop
6、ionicacid)具有縮短出血和凝血時間,有止血活性[6]。在臨床術(shù)后常用的止血氨基酸,有止血芳酸、止血環(huán)酸和6-氨基已酸等,它們的結(jié)構(gòu)類似賴氨酸,可以和纖溶酶(原)上的賴氨酸位點(diǎn)結(jié)合。從而阻止纖溶酶(原)與纖溶蛋白(原)的結(jié)合,防止纖溶酶原激活和纖溶酶的破壞作用,減少纖維蛋白降解產(chǎn)物(FDP)和D-二聚體的產(chǎn)生,可間接保護(hù)血小板功能,起到止血作用⑺。目前主要對滇桂艾納香地上部分的化學(xué)成分進(jìn)行研究,集中在揮發(fā)性化學(xué)成分,有機(jī)酸,黃酮類物質(zhì)[8?14]。未見對其氨基酸成分的研究報道,由于滇桂艾納香與三七都具有止血化淤
7、功效,而滇桂艾納香的藥理作用機(jī)理尚未明確,本文對滇桂艾納香進(jìn)行不同溶劑提取,717陰離子交換樹脂富集純化氨基酸,旨在進(jìn)一步揭示其藥效物質(zhì)基礎(chǔ),為其進(jìn)一步研究提供一定的科學(xué)依據(jù)。1材料與儀器滇桂艾納香全草干草(廣西桂西制藥廠提供)。超聲清洗器(上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司SK3310LHC);紫外可見分光光度計(上海光譜儀器有限公司SP-756P)o717陰離子交換樹脂(三星樹脂科技有限公司);谷氨酸對照品(上海昊化化工有限公司)。2方法2.1氨基酸含量的測定采用國標(biāo)GB/T8314-2002茶游離氨基酸含量測定方法,用谷
8、氨酸標(biāo)準(zhǔn)品。2.2游離氨基酸的提取及提取率測定分別采用50%乙醇,70%乙醇,水,8(TC回流提取,及超聲輔助水提法。提取率按以下公式計算:A=C/BX100%,A為提取率(%),B為原藥料質(zhì)量(g),C為提取得氨基酸質(zhì)量(g)O2.3樹脂的預(yù)處理及總交換容量的測定717陰離子交換樹脂用過量的蒸徭水浸泡后,經(jīng)1mol/L氫氧化鈉和1mol/L鹽