松茸多糖提取工藝及質(zhì)量測(cè)定

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1、松茸多糖提取工藝及質(zhì)量測(cè)定廖麗娟,李英姬,金光洙【摘要】〔目的〕探討松茸多糖的提取工藝.〔方法〕采用20g/LNa2CO3溶液在90℃條件下提取松茸多糖,采用苯酚硫酸比色法測(cè)定松茸多糖質(zhì)量.〔結(jié)果〕每kg松茸中可測(cè)得的松茸多糖質(zhì)量為33.1g.〔結(jié)論〕最佳提取條件為90℃,20g/L的Na2CO3.【關(guān)鍵詞】多糖類;植物提取物;植物,藥用ABSTRACT:OBJECTIVETostudythemethodsofextractionanddeterminationofpolysaccharidesinthetricholomamatsutake.

2、METHODSCrudepolysaccharidesthetricholomamatsutakethrouth20g/LNa2CO3extractionin90℃,boilingetryinethecontentofpolysaccharidesofthetricholomamatsutake.RESULTSThecontentofpolysaccharidesofthetricholomamatsutakeis33.1g.CONCLUSIONTheconditionofextractionofpolysaccharidesinthetrich

3、olomamatsutakeis20g/LNa2CO3extractionin90℃.Keyedicinal松茸〔Tricholomamatsutake（S.ItoetImai）Sing〕屬擔(dān)子菌門(Basidiomycota)擔(dān)子菌綱(Basidiomycetes)傘菌目(Agaricales)口蘑科(Tricholomataceae)口蘑屬(Tricholoma),它的菌肉肥厚,有香氣,味道鮮美,是名貴的野生食藥用菌〔1〕.臨床試驗(yàn)結(jié)果表明,松茸具有治療糖尿病,抑制癌細(xì)胞增植及抗應(yīng)激反應(yīng)等功效，主要藥理活性成分為多糖類物質(zhì)〔2,3〕.因此,松

4、茸多糖的提取和含量測(cè)定對(duì)松茸的開發(fā)及應(yīng)用有重要意義.1材料1.1試藥與試劑松茸采自吉林省龍井市三合松茸野生基地，用清水洗凈,榨汁后切片放置3h,在60℃條件下干燥90min,準(zhǔn)確稱取質(zhì)量,加入10倍量的二氯甲烷回流2次,每次３h,過濾,濾渣用10倍量的甲醇回流2次,每次4h,過濾,濾渣去除甲醇至無醇味，備用.葡萄糖對(duì)照品溶液的配制：精密稱取105℃干燥至恒質(zhì)量的葡萄糖25mg,用蒸餾水溶解并定容至100mL，備用.苯酚溶液的配制：取苯酚100g,加入鋁片0.1g及NaHCO350mg,蒸餾,收集182℃餾分,稱取餾分,配制質(zhì)量濃度為50g／L的水

5、溶液,置于棕色瓶?jī)?nèi)放入冰箱備用.其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純.1.2儀器所用儀器有UV2201型紫外分光光度儀(日本津島)、RE52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮儀器有限公司)、HHL，置于2個(gè)具塞試管中,加入蒸餾水1.0mL,苯酚液1.0mL,迅速滴加濃硫酸5.0mL.另取2個(gè)試管分別滴加蒸餾水2.0mL,同上操作,為空白液.1份在40℃水箱中恒溫放置30min,余1份在沸水箱中放置30min，取出冷卻至室溫,15min后在490nm處測(cè)定吸光度值，分別為1.445，1.530,最終確定選擇溫度及時(shí)間為在沸水箱中放置30min.2.1.2濃硫酸用量精

6、密吸取1.0mL葡萄糖對(duì)照品溶液5份,分別加入苯酚液1.0mL,再分別滴加濃硫酸4.0,5.0,6.0,7.0,8.0mL,加入蒸餾水稀釋至10.0mL,所測(cè)得的吸光度值分別為1.110,1.115,1.210,1.312,1.552,1.553.最終確定濃硫酸用量為7.0mL以上,即體積分?jǐn)?shù)為0.625以上.2.1.3反應(yīng)時(shí)間精密吸取1.0mL葡萄糖對(duì)照品溶液3份,分別滴加蒸餾水1.0mL,再分別滴加濃硫酸7.0mL,分別于沸水浴內(nèi)恒溫反應(yīng)20,30,40min，所測(cè)得的吸光度值分別為1.412,1.552,1.553,最終選擇的反應(yīng)時(shí)間為30

7、min.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8mL，置入具塞試管中,分別加入蒸餾水至2.0mL,再分別加入苯酚溶液1.0mL，搖勻,加入濃硫酸7.0mL,充分搖勻,靜置10min,置于沸水箱內(nèi)30min,取出,冷卻至室溫；另取1個(gè)試管以蒸餾水代替葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液作為空白對(duì)照,在490nm處測(cè)定吸光度值,以濃度為橫坐標(biāo),吸光度值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,建立回歸方程:A=6.0249X+1.1044,r=0.9995(n=8).結(jié)果表明,葡萄糖質(zhì)量濃度在2.5～20.0mg／L范圍內(nèi)線性

8、關(guān)系良好.2.3提取松茸多糖的影響因素2.3.1溫度分別于80℃,85℃,90℃,95℃,100℃條件下提取松茸多糖，所測(cè)得的松茸水提取