資源描述：
《水浸束縛應(yīng)激對大鼠下頜下腺內(nèi)瘦素表達(dá)的影響》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、水浸束縛應(yīng)激對大鼠下頜下腺內(nèi)瘦素表達(dá)的影響作者：趙豫鳳，劉廣忠，楊加周，苗乃周【關(guān)鍵詞】應(yīng)激；水浸束縛；頜下腺；瘦素；大鼠 Effectofmersionrestraintstresssonleptinexpressioninsubmandibularglandofrats 【Abstract】AIM:Toobservethechangesofleptinexpressioninsubmandibularglandofratsfollomersionrestraintstressandtoexploretheeffectsandsignifica
2、nceofstressresponseonleptinsecretioninsubmandibulargland.METHODS:Tmersionrestraintstress(alcontrolgroup(n=10).Localizationanddistributionofleptininratsubmandibularglandmunohistochemistry,andtheconcentrationsofleptininserumandsubmandibularglandinedbyenzymelinkedimmunosorbentassa
3、y(ELISA).RESULTS：Leptinimmunoreactivecellsainlylocatedintheepithelialcellsofthegranularconvolutedandstriatedducts.TheimmunoplexesoftheductsbutnotinthenuclEi.Thestainingintensityforleptininthegranularconvolutedductuchhigherthanthatinstriatedduct.Theleptinstainingintheductsofsubm
4、andibularglandinandsubmandibularglandarkedlyparedalcontrolgroup(P<0.01).CONCLUSION:Leptinisandibulargland.andibulargland,andtheseresultssuggestedthatleptininsubmandibularglandmightbeinvolvedintheregulationofstressresponseprocess. 【Keymersionrestraint;submandibulargland;lept
5、in;rat 【摘要】目的：觀察應(yīng)激狀態(tài)下大鼠頜下腺內(nèi)瘦素表達(dá)的變化，探討應(yīng)激反應(yīng)對頜下腺瘦素分泌的影響及其意義.方法：采用水浸束縛應(yīng)激（ersionrestraint)組（n=10）和正常對照組（n=10）.采用水浸束縛應(yīng)激模型［4］.乙醚麻醉下將大鼠四肢固定于特制的木板上，待動物清醒后，置于高約30cm的方形塑料桶內(nèi)，桶內(nèi)加入溫度為21±1℃的冷水，使水面至大鼠的胸骨劍突，經(jīng)10h后，即可成功誘發(fā)L注射器心內(nèi)取血2mL于4℃靜置2h，離心（7000r/min）20min取上清，-20℃保存?zhèn)溆?然后從頸部取出雙側(cè)頜下腺組織，一側(cè)頜下腺于-70℃
6、保存、留待ELISA檢測；另一側(cè)頜下腺組織入Bouins液固定24h后，常規(guī)脫水、石蠟包埋、制成厚5μm切片，分別裱貼于預(yù)先用APES(3aminopropyltriethoxysilane,Sigma公司)處理過的載玻片上，于37℃恒溫箱烤干備用. 1.2方法 1.2.1免疫組織化學(xué)染色兔抗瘦素多克隆抗體購自武漢博士德公司（Boster）；生物素標(biāo)記的羊抗兔IgG以及ABC試劑盒均購自Sigma公司.根據(jù)免疫組化ABC染色程序，取制備好的石蠟切片入二甲苯脫蠟10min×2次，無水乙醇漂洗5min×2次.新鮮甲醇配制的3g/L(V/V)雙氧水漂洗
7、30min，以消除內(nèi)源性過氧化物酶.0.01mol/LPBS(pH7.3)漂洗5min×3次.用15g/L(V/V)正常羊血清封閉30min；甩去正常羊血清后，滴加第一抗體兔抗瘦素（1∶200），4℃冰箱內(nèi)孵育過夜；PBS漂洗5min×3次，滴加生物素標(biāo)記的羊抗兔IgG(1∶400)，室溫2h；PBS漂洗5min×3次，滴加ABC復(fù)合物1h(1∶200)；PBS漂洗5min×3次，DABH2O2顯色8~15min；常規(guī)脫水、透明、DPX封片.用正常兔血清替代瘦素抗體作為第一抗體進(jìn)行染色作為陰性對照實(shí)驗(yàn). 1.2.4頜下腺及血清中瘦素的檢測瘦素ELI
8、SA試劑盒購自武漢博士德公司（Boster），具體操作步驟按試劑盒說明書進(jìn)行.取凍存的頜下腺組織、稱重，用2
