物流開題報告畢業(yè)論文

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1、物流開題報告畢業(yè)論文[物流開題報告畢業(yè)論文]研究背景眼科最常見致盲眼病有白內(nèi)障、青光眼、糖尿病視網(wǎng)膜病變和黃斑病等，其中青光眼是繼白內(nèi)障后的第二致盲原因，物流開題報告畢業(yè)論文。我國青光眼的發(fā)病率為0.52%，患病人數(shù)約為700萬。2006年資料顯示世界青光眼發(fā)病人數(shù)到2010年將達到7000萬，雙眼盲目人數(shù)達到840萬(Quigleyetal.，2006)。眾多的青光眼患者和青光眼盲者，不僅給患者帶來極大的身心痛苦，而且還造成社會和經(jīng)濟的巨大負擔，因此，預防、控制及治療青光眼十分重要且迫切！青光眼是一種由于病理性眼壓增高導致的具有特征性視神經(jīng)結構損傷和視野缺損為表現(xiàn)的神經(jīng)

2、性退行性視神經(jīng)病變，其最終的結局是視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(RGCs)凋亡、視功能逐漸喪失(Buckinghametal.，2008)。目前已有大量保護RGCs的研究結果，主要包括：改善視乳頭微循環(huán)、谷氨酸途徑抑制劑、神經(jīng)營養(yǎng)因子，誘導熱休克蛋白表達及抗氧化治療等。然而，青光眼的發(fā)病機制至今尚未完全闡明。信號轉導、受體通道研究在RGCs損傷與保護中的作用近年來正得到關注。最新的研究方向和靶點之一是關于能感受壓力的受體通道可能參與傳遞病理刺激造成神經(jīng)損傷(Quigleyetal.，2006)。TRPC6(Transientreceptorpotential，C6)是一個新發(fā)現(xiàn)的、壓

3、力敏感、參與神經(jīng)元存活與凋亡的鈣離子通透膜通道蛋白。本人曾參與課題TRPC6通道在視網(wǎng)膜缺血再灌模型中對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)的保護作用的研究，并獲得了有價值的前期研究結果：較為全面而精確的定位了TRPC6通道基因和蛋白在SD大鼠視網(wǎng)膜、尤其是RGCs上的表達和分布，TRPC6在RGC層上有選擇性的高表達；探討了TRPC6在大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌(Ischemiareperfusion,IR)損傷過程中的表達變化，TRPC6基因和蛋白在視網(wǎng)膜缺血損傷中的再灌注后24小時，出現(xiàn)一過性的表達升高；在體的藥理學實驗結果顯示，其激動劑OAG具有保護視網(wǎng)膜IR模型誘導的RGCs免受損傷，而拮抗劑

4、SKF96365則促進了RGCs凋亡的發(fā)生，本研究擬進一步探討TRPC6的作用機制。研究發(fā)現(xiàn)，腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)與TRPC通道在信號轉導、調(diào)控細胞存活的過程中有密切的聯(lián)系。2007年4月中國科學院上海神經(jīng)科學研究所王以政研究員課題組在NatureNeuroscience上發(fā)表論文，首次證實過表達TRPC6/TRPC3可保護小腦神經(jīng)元對抗因血清剝奪而導致的細胞死亡，且發(fā)現(xiàn)BDNF位于TRPC3/6介導的細胞保護信號通路的上游(Taietal.，2008a；Jiaetal.，2007)。本課題擬探討B(tài)

5、DNF介導TRPC6通道蛋白保護視網(wǎng)膜跟模型誘導的RGCs免受損傷的作用機制，對深入闡明青光眼的發(fā)病機制，為臨床干預治提供新的思路和藥物干預靶點，具有一定的現(xiàn)實意義。本課題的研究主要分為以下二部分：第一部分視網(wǎng)膜IR模型中調(diào)控TRPC通道時BDNF的表達變化一、研究目的在SD大鼠視網(wǎng)膜IR模型中檢測bdnf基因不同再灌注時間點的表達變化，同時檢測抑制TRPC通道時BDNF蛋白水平變化、探討其表達類型對RGCs凋亡的影響。二、研究方法1、在視網(wǎng)膜IR模型中檢測bdnf基因的表達。采用視神經(jīng)血管鉗夾法建立視網(wǎng)膜IR模型，夾閉視網(wǎng)膜血供60分鐘，分別于再灌注后3小時、24小時、

6、48小時、7天處死大鼠，摘取眼球，顯微鏡下剝離視網(wǎng)膜，提取視網(wǎng)膜總RNA，利用反轉錄多聚酶鏈反應(RT-PCR)及實時熒光定量PCR(Real-timePCR)測定bdnf基因表達變化。2、抑制TRPC通道時檢測BDNF蛋白的表達。建立大鼠視網(wǎng)膜IR模型，于視網(wǎng)膜缺血術前30分鐘，右眼通過玻璃體腔注射TRPC拮抗劑SKF96365為實驗組，左眼注射溶劑PBS為陰性對照組，分別于再灌后3小時、6小時、12小時、24小時、48小時、72小時處死大鼠，摘取眼球，顯微鏡下剝離視網(wǎng)膜，提取視網(wǎng)膜總蛋白，蛋白質免疫印跡(SO為陰性對照，分別于再灌后24小時、48小時、72小時、7天處

7、死大鼠，常規(guī)心臟灌流取視網(wǎng)膜，平鋪后熒光顯微鏡下行RGCs計數(shù)，對結果進行統(tǒng)計分析。三、研究結果統(tǒng)計分析結果顯示，在再灌注后48小時，玻璃體腔注射p75NTR信號通路拮抗劑TAT-pep5組較之注射溶劑DMSO對照組顯著增加RGCs的數(shù)目(p<0.05，N=6)。四、小結在IR模型中proBDNF-p75NTR信號通路可能參與抑制TRPC通道誘導的促進RGCs死亡的過程。結論本研究提示BDNF可能是TRPC6通道蛋白保護視網(wǎng)膜IR模型誘導的RGCs免受損傷的上游通路，當TRPC通道受到抑制時，能反饋性影響B(tài)DNF轉錄后翻