急性毒性試驗-ld50的測定

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1、開放性實驗總結(jié)報告學(xué)生姓名班級學(xué)號所在院系專業(yè)開放實驗室名稱日期2013-5-5北京理工大學(xué)實驗室設(shè)備處制7一、實驗項目概況開放實驗題目:實驗動物的基本操作及其相關(guān)技術(shù)實驗題目類型:□參與科研□科技活動√自選實驗□素質(zhì)培養(yǎng)指導(dǎo)教師及實驗技術(shù)人員姓名:李巖實驗項目起止日期:2013-4-5至2013-5-5利用何種時間段開展實驗:課余時間開展實驗的累計總學(xué)時數(shù):32學(xué)時實驗項目基本原理:急性毒性試驗是臨床前新藥安全性評價的第一步,與其它毒性實驗相比具有簡單、經(jīng)濟、易行等特點。因此新藥研究開發(fā)時往往

2、通過該項試驗,盡可能多的了解一些新藥的毒理學(xué)特點,為早期判斷侯選新藥是否具有研究開發(fā)價值提供毒性強度資料。通常測定藥物ED50及LD50以初步估計藥物毒性大小。實驗項目的實驗方法概述:給不同組的小白鼠腹腔注射不同劑量的戊巴比妥鈉,并觀察記錄各組別小鼠的行為變化,通過比較不同組別小鼠出現(xiàn)死亡的數(shù)量來計算LD50。實驗項目的儀器設(shè)備組成情況:天平,1000ul的移液槍,200μl移液槍,2ml離心管,1ml注射器,手術(shù)器械(包括剪刀、鑷子等),鼠籠,離心管架實驗項目的消耗材料明細:乳膠手套,KM小鼠

3、,封口膜實驗項目的主要結(jié)論:戊巴比妥鈉的半數(shù)致死量為134.32mg/kg用Bliss法計算半數(shù)致死量,回歸方程y(Probit)=-24.916+14.058Log(D)半數(shù)致死量LD50=134.32mg/kgLD50(Feiller校正)95%的可信限=92.405--205.57mg/kgLD5=102.59mg/kgLD95=175.85mg/kg7二、實驗項目技術(shù)報告1.實驗原理戊巴比妥鈉屬于巴比妥類鎮(zhèn)靜催眠藥,對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有普遍性抑制作用,可起到鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥作用。一定劑量的

4、戊巴比妥鈉引起一般實驗動物死亡。半數(shù)致死量(LD50),即在一群實驗動物中,能使實驗動物一半死亡的藥量,其值越大越好。2.實驗內(nèi)容(1)探測戊巴比妥鈉LD50的劑量范圍。(2)確定組數(shù)并計算各組劑量。(3)正式實驗:給不同組的小白鼠腹腔注射不同劑量的戊巴比妥鈉,并觀察記錄各組別小鼠的行為變化及死亡情況。(4)記錄實驗結(jié)果,并計算LD50。3.實驗方法:1、預(yù)試溶液配制和樣品處理(預(yù)實驗)(1)探索劑量范圍:取小鼠9到12只,以3只為一組,分成3到4組,包括組距較大的一系列劑量,按組分別腹腔注射戊

5、巴比妥鈉溶液,觀察出現(xiàn)的癥狀并記錄動物死亡數(shù),找出引起0及100%有效劑量的所在范圍,此即上下限劑量Dn和Dm。(2):確定組數(shù)并計算各組劑量確定組數(shù)《G》:根據(jù)適宜的組距確定組數(shù),一般分為5到8個劑量,這里我們分為5組,按等比級數(shù)增減計算各組劑量:在找出Dm、Dn和確定組數(shù)后,課7按下列公式求出公比r.再按公比計算各組劑量Dl-Dm,其中D1=Dn=最小劑量。配置等比藥液系列,讓每只小鼠給藥量相等,一般為0.1ml/10g體重經(jīng)過預(yù)實驗的五

6、個劑量濃度分別是77、96、120、150、190mg/kg,相應(yīng)濃度:0.77、0.96、1.2、1.5、1.9%,在隨后的急性毒實驗中對這些劑量進行驗證2、急性毒性試驗:昆明種小鼠共15只,實驗前一天晚禁食不禁水,實驗當天稱重,標記,隨機分組。給5組小鼠分別按77、96、120、150、190mg/kg,腹腔注射,給藥后觀察動物死亡情況。記錄小鼠死亡時間,死亡數(shù)目。利用Bliss法計算LD50。分組動物數(shù)(N)劑量(mg/kg)對數(shù)劑量(X)動物死亡數(shù)(n)死亡率(P=n/N)1234533

7、33377961201501901.891.982.082.182.28001230%0%33.3%66.7%100%表1藥物對小白鼠產(chǎn)生效應(yīng)情況【實驗結(jié)果】:LD50的測定依據(jù)藥物劑量依次給藥。利用Bliss法計算LD507樣品名稱戊巴比妥鈉實驗動物昆明小鼠給藥途徑腹腔注射實驗日期2013.5.5用Bliss法計算半數(shù)致死量--------------------------------------------------------------------------劑量對數(shù)劑量動物數(shù)死亡數(shù)

8、死亡百分率實驗機率單位回歸機率單位(x)(只)(只)(%)(Y)(Y)--------------------------------------------------------------------------771.8865300.00----1.6031961.9823300.00----2.94951202.07923133.004.56974.31191502.17613267.005.43035.67421902.2788331E2----7.1173-------------

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