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1、中藥半枝蓮對(duì)肝癌H22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究【摘要】 目的探討不同劑量半枝蓮對(duì)H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法觀察不同劑量半枝蓮對(duì)H22荷瘤小鼠腫瘤的抑瘤率、生命延長(zhǎng)率、肝/體比、肺/體比、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)以及用藥前后的體重變化等指標(biāo)的影響。結(jié)果不同劑量半枝蓮與對(duì)照組比較,具有顯著性差異(P0.05);半枝蓮與順鉑(DDP)合用組與單用DDP組比較,有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論半枝蓮能有效地抑制H22腫瘤生長(zhǎng),并能顯著加強(qiáng)化療藥DDP的抑瘤效果?!娟P(guān)鍵詞】半枝蓮H22抑瘤 中藥半枝蓮(HerbaScute
2、llariaeBarbatae)為唇形科(Labiatae)植物半枝蓮ScutellariabarbataD.Don的干燥全草。半枝蓮性味辛、苦、寒,歸肺、肝、腎經(jīng),是中醫(yī)處方和成藥中的常用中藥,具有清熱解毒、化淤利尿的功效〔1〕。近代藥理學(xué)研究表明半枝蓮抗腫瘤、抗病原、抑菌、解熱、保肝等活性。半枝蓮作為一種常用的抗腫瘤中藥,在臨床上應(yīng)用多年,對(duì)肝癌、肺癌、胃癌、直腸癌、鼻咽癌等均有一定的療效。本實(shí)驗(yàn)觀察了不同劑量半枝蓮提取物對(duì)肝癌H22荷瘤小鼠腫瘤生長(zhǎng)的影響,以及生命延長(zhǎng)率、肝/體比、肺/體比、胸腺指數(shù)、脾臟指
3、數(shù)以及用藥前后的體重變化等指標(biāo),來(lái)探討半枝蓮的抗腫瘤作用機(jī)制,以期為半枝蓮抗腫瘤新藥的開(kāi)發(fā)和研制提供依據(jù)?! ?材料與儀器 1.1藥材半枝蓮HerbaScutellariaeBarbatae購(gòu)自濟(jì)南市建聯(lián)中藥店,并由山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院生藥系石俊英教授鑒定為唇形科(Labiatae)植物半枝蓮ScutellariabarbataD.Don的干燥全草?! ?.2動(dòng)物及瘤株昆明種小鼠,雄性,體重(20±2)g,由山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供?! 22肝癌小鼠購(gòu)自山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所?! ?.3儀器與試劑超凈工作
4、臺(tái)(北京半導(dǎo)體設(shè)備廠);FA2004型電子天平(上海天平儀器廠);蒸氣消毒器(山東新華醫(yī)療器械廠);注射用順鉑(DDP,批號(hào)20041113,規(guī)格20mg/支)(齊魯制藥有限公司)?! ?方法與結(jié)果〔2,3〕 2.1半枝蓮水提取物的制備稱(chēng)取半枝蓮200g,加相當(dāng)于藥材量的5~7倍的水浸泡1~2h,煮沸30min,過(guò)濾,藥渣加3~5倍藥材量的水繼續(xù)煎煮,煮沸30min,過(guò)濾,合并濾液,于水浴上濃縮成每毫升相當(dāng)于原生藥材1g的濃度,即得半枝蓮水提取物。 2.2H22肝癌腫瘤細(xì)胞懸液的制備取傳代后14d的H22肝癌
5、小鼠,脫頸椎處死,固定于鼠板上,依次用碘酊、酒精消毒操作部位皮膚,置于超凈工作臺(tái)中,無(wú)菌條件下,剝?nèi)∧[瘤,選擇生長(zhǎng)良好無(wú)壞死及液化的腫瘤組織,剔除纖維包膜,在無(wú)菌表面皿中剪碎,置組織研磨器中,加入少量4℃生理鹽水輕輕研磨,制成腫瘤細(xì)胞懸液,調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107/ml?! ?.3昆明種小鼠移植H22肉瘤模型的制作取體重20g左右的昆明種小鼠,每鼠0.2ml接種于右前肢腋窩皮下(腫瘤細(xì)胞數(shù)約為2×106個(gè)),24h后稱(chēng)重,隨機(jī)分成6組,分組情況為:對(duì)照組,順鉑組,半枝蓮大、中、小3個(gè)劑量組,順鉑+半枝蓮中劑量組。
6、以上共分兩大組,其中一組觀察存活期以計(jì)算平均生存率,另一組計(jì)算瘤體重及其他相關(guān)指標(biāo)?! ?.4給藥與記錄觀察指標(biāo)各組給藥情況如下:對(duì)照組:移植腫瘤后,每日灌服0.4ml生理鹽水;DDP組:按2.0mg/kg體重隔日腹腔注射DDP0.2ml/只/次,共兩次;半枝蓮小劑量組:每天按10g/kg體重灌服1次,連續(xù)10d;半枝蓮中劑量組:每天按20g/kg體重灌服1次,連續(xù)10d;半枝蓮大劑量組:每天按40g/kg體重灌服1次,連續(xù)10d;DDP+半枝蓮中劑量組:除每天按20g/kg體重灌服半枝蓮中劑量1次,連續(xù)10d外
7、;按2.0mg/kg體重隔日腹腔注射DDP0.2ml/只/次,共兩次。 給藥10d后停止給藥,停藥次日處死小鼠,稱(chēng)取小鼠體重,解剖瘤體、肝、肺、脾、胸腺,分別稱(chēng)重,出現(xiàn)提早死亡的動(dòng)物則提前解剖稱(chēng)重紀(jì)錄。計(jì)算抑瘤率、生命延長(zhǎng)率、肝/體比、脾/體比、肺/體比、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)以及用藥前后的體重變化等指標(biāo)。抑瘤率=(C-T)/C×100%?! 為實(shí)驗(yàn)組平均瘤重,C為對(duì)照組平均瘤重。結(jié)果見(jiàn)表1~4?! ”?不同劑量半枝蓮對(duì)H22荷瘤小鼠抑瘤率的影響(略) 與荷瘤對(duì)照組比較,△△P<0.01;與DDP組比較,*P<0
8、.05,**P<0.01;n=10 3討論 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立H22荷瘤小鼠動(dòng)物模型,觀察了抑瘤率、生命延長(zhǎng)率、肝/體比、肺/體比、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)以及用藥前后的體重變化等指標(biāo),對(duì)半枝蓮的體內(nèi)抗腫瘤藥理作用進(jìn)行了研究,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,半枝蓮確實(shí)具有良好體內(nèi)抗腫瘤作用,大、中、小劑量組的抑瘤率分別為38.01%,36.26%,31.58%,與對(duì)照組比較,具有顯著性差異(P0