中藥半枝蓮對肝癌h22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究

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1、中藥半枝蓮對肝癌H22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究【摘要】　　目的探討不同劑量半枝蓮對H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法觀察不同劑量半枝蓮對H22荷瘤小鼠腫瘤的抑瘤率、生命延長率、肝/體比、肺/體比、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)以及用藥前后的體重變化等指標(biāo)的影響。結(jié)果不同劑量半枝蓮與對照組比較，具有顯著性差異（P<0.05）；半枝蓮與順鉑（DDP）合用組與單用DDP組比較，有顯著性差異（P<0.05）。結(jié)論半枝蓮能有效地抑制H22腫瘤生長，并能顯著加強(qiáng)化療藥DDP的抑瘤效果?！娟P(guān)鍵詞】半枝蓮H22抑瘤　　中藥半枝蓮(HerbaScutellariaeBarbatae)為唇形科(Labiatae

2、)植物半枝蓮ScutellariabarbataD.Don的干燥全草。半枝蓮性味辛、苦、寒，歸肺、肝、腎經(jīng)，是中醫(yī)處方和成藥中的常用中藥，具有清熱解毒、化淤利尿的功效［1］。近代藥理學(xué)研究表明半枝蓮抗腫瘤、抗病原、抑菌、解熱、保肝等活性。半枝蓮作為一種常用的抗腫瘤中藥，在臨床上應(yīng)用多年，對肝癌、肺癌、胃癌、直腸癌、鼻咽癌等均有一定的療效。本實驗觀察了不同劑量半枝蓮提取物對肝癌H22荷瘤小鼠腫瘤生長的影響，以及生命延長率、肝/體比、肺/體比、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)以及用藥前后的體重變化等指標(biāo)，來探討半枝蓮的抗腫瘤作用機(jī)制，以期為半枝蓮抗腫瘤新藥的開發(fā)和研制提供依據(jù)。　　1材料與儀器　　1.1

3、藥材半枝蓮HerbaScutellariaeBarbatae購自濟(jì)南市建聯(lián)中藥店，并由山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院生藥系石俊英教授鑒定為唇形科(Labiatae)植物半枝蓮ScutellariabarbataD.Don的干燥全草。　　1.2動物及瘤株昆明種小鼠，雄性，體重（20±2）g，由山東大學(xué)實驗動物中心提供?！　22肝癌小鼠購自山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所?！　?.3儀器與試劑超凈工作臺（北京半導(dǎo)體設(shè)備廠）；FA2004型電子天平（上海天平儀器廠）；蒸氣消毒器（山東新華醫(yī)療器械廠）；注射用順鉑（DDP，批號20041113，規(guī)格20mg/支）(齊魯制藥有限公司)?！　?方法與結(jié)果［2，3

4、］　　2.1半枝蓮水提取物的制備稱取半枝蓮200g，加相當(dāng)于藥材量的5～7倍的水浸泡1～2h，煮沸30min，過濾，藥渣加3～5倍藥材量的水繼續(xù)煎煮，煮沸30min，過濾，合并濾液，于水浴上濃縮成每毫升相當(dāng)于原生藥材1g的濃度，即得半枝蓮水提取物?！　?.2H22肝癌腫瘤細(xì)胞懸液的制備取傳代后14d的H22肝癌小鼠，脫頸椎處死，固定于鼠板上，依次用碘酊、酒精消毒操作部位皮膚，置于超凈工作臺中，無菌條件下，剝?nèi)∧[瘤，選擇生長良好無壞死及液化的腫瘤組織，剔除纖維包膜，在無菌表面皿中剪碎，置組織研磨器中，加入少量4℃生理鹽水輕輕研磨，制成腫瘤細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107/ml。　　2.

5、3昆明種小鼠移植H22肉瘤模型的制作取體重20g左右的昆明種小鼠，每鼠0.2ml接種于右前肢腋窩皮下（腫瘤細(xì)胞數(shù)約為2×106個），24h后稱重，隨機(jī)分成6組，分組情況為：對照組，順鉑組，半枝蓮大、中、小3個劑量組，順鉑+半枝蓮中劑量組。以上共分兩大組，其中一組觀察存活期以計算平均生存率,另一組計算瘤體重及其他相關(guān)指標(biāo)?！　?.4給藥與記錄觀察指標(biāo)各組給藥情況如下：對照組：移植腫瘤后，每日灌服0.4ml生理鹽水；DDP組：按2.0mg/kg體重隔日腹腔注射DDP0.2ml/只/次，共兩次；半枝蓮小劑量組：每天按10g/kg體重灌服1次，連續(xù)10d；半枝蓮中劑量組：每天按20g/kg體重

6、灌服1次，連續(xù)10d；半枝蓮大劑量組：每天按40g/kg體重灌服1次，連續(xù)10d；DDP+半枝蓮中劑量組：除每天按20g/kg體重灌服半枝蓮中劑量1次，連續(xù)10d外；按2.0mg/kg體重隔日腹腔注射DDP0.2ml/只/次，共兩次?！　〗o藥10d后停止給藥，停藥次日處死小鼠，稱取小鼠體重，解剖瘤體、肝、肺、脾、胸腺，分別稱重，出現(xiàn)提早死亡的動物則提前解剖稱重紀(jì)錄。計算抑瘤率、生命延長率、肝/體比、脾/體比、肺/體比、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)以及用藥前后的體重變化等指標(biāo)。抑瘤率＝（C－T）/C×100％。　　T為實驗組平均瘤重，C為對照組平均瘤重。結(jié)果見表1～4。　　表1不同劑量半枝蓮對H22

7、荷瘤小鼠抑瘤率的影響（略）　　與荷瘤對照組比較，△△P＜0.01；與DDP組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；n=10　　3討論　　本實驗通過建立H22荷瘤小鼠動物模型，觀察了抑瘤率、生命延長率、肝/體比、肺/體比、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)以及用藥前后的體重變化等指標(biāo)，對半枝蓮的體內(nèi)抗腫瘤藥理作用進(jìn)行了研究，實驗結(jié)果表明，半枝蓮確實具有良好體內(nèi)抗腫瘤作用，大、中、小劑量組的抑瘤率分別為38.01%，36.26%，31.58%，與對照組比較，具有