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1、響應(yīng)面法優(yōu)化微波提取寬葉獨行菜多糖工藝研究徐傳遠,王麗萍,王濤(河北聯(lián)合大學生命科學學院,河北唐山063000)摘要:為優(yōu)化寬葉獨行菜(LepidiumlatifoliumL.)多糖的提取工藝,在單因素試驗的基礎(chǔ)上,選取粒度、液料比、微波功率和微波時間作為優(yōu)化因素,根據(jù)Box-Behnken試驗設(shè)計原理,進行4因素3水平試驗。利用響應(yīng)面分析方法,建立了寬葉獨行菜多糖提取得率的多元二次回歸方程,并得到最佳提取工藝條件。試驗結(jié)果表明,粒度、液料比和微波時間對寬葉獨行菜多糖提取得率的影響均為極顯著,微波功率表現(xiàn)為顯著。當工藝條件為粒度120目、液料比35∶1mL/g、微波功率400W、微波時
2、間150s時,寬葉獨行菜多糖的理論最高提取得率為0.434%,驗證值為0.429%。..關(guān)鍵詞:寬葉獨行菜(LepidiumlatifoliumL.);微波輔助;多糖;響應(yīng)面法中圖分類號:R284.2;S567.23+9;TS202.3文獻標識碼:A:0439-8114(2015)05-1176-05DOI:10.14088/j.ki.issn0439-8114.2015.05.038收稿日期:2014-12-16基金項目:國家自然科學基金項目(31301355);河北省自然科學基金項目(C2012209013)簡介:徐傳遠(1978-),男,山東長清人,副教授,博士,主要從事油菜分子
3、細胞遺傳研究,()0315-3726527(電子信箱)chuanyuanxu@aliyun.com。寬葉獨行菜(LepidiumlatifoliumL.)為十字花科獨行菜屬多年生草本植物,又名羊辣辣或大辣辣,植株高30~150cm,廣泛分布于我國北方的濱海及內(nèi)陸的鹽堿土上。寬葉獨行菜抗逆性強,生長旺盛,常在濱海和內(nèi)陸的鹽堿土上形成大面積的單純?nèi)郝?。其干燥全草可入藥,主治腸胃炎、菌痢等疾病,是傳統(tǒng)中草藥葶藶子的藥源之一[1,2]。寬葉獨行菜的蛋白質(zhì)含量較高,可作為青飼料飼喂豬、羊等家畜[2]。也有部分地區(qū)將其作為野菜食用[3]。其種子中含有豐富的棕櫚酸,含量占總油分的50%以上[4]。寬
4、葉獨行菜與油菜同屬十字花科,通過遠緣雜交,可以將其高棕櫚酸特性轉(zhuǎn)入油菜。同時,該種所具有的抗鹽堿特性也為油菜的抗逆育種提供了寶貴的遺傳資源,所以寬葉獨行菜是一種極具開發(fā)前景的資源植物。植物多糖具有多種生物活性,如提高免疫力、抗腫瘤、調(diào)節(jié)血糖等,從而在腫瘤和糖尿病的治療中有很好的應(yīng)用價值[5-7]。作為一種優(yōu)良的食品添加劑,多糖可以有效改善食品的外觀以及加工和食用品質(zhì),同時還有良好的保健功效,在食品中被廣泛應(yīng)用[8-10]。本研究在單因素試驗基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)面分析法對寬葉獨行菜多糖的微波輔助提取工藝進行優(yōu)化,以期為寬葉獨行菜的進一步加工利用提供參考。1材料與方法1.1材料與試劑寬葉獨行菜
5、,采自唐山地區(qū)。葡萄糖、苯酚、硫酸、95%乙醇、氯仿和正丁醇均為分析純試劑,購于天津大茂化學試劑廠。1.2儀器與設(shè)備WG700SL23-K6微波爐,佛山市格蘭仕電器有限公司;FCC-2000恒溫水浴鍋,上海比朗儀器有限公司;DNP-902電熱鼓風干燥箱,上海精宏儀器設(shè)備有限公司;722S可見分光光度計,上海佑科儀器儀表有限公司;FA1204B電子天平,上海精科天美科學儀器有限公司;不銹鋼分選篩,浙江上虞市華豐五金儀器有限公司;TDL-80-2B臺式離心機,上海安亭科學儀器廠;RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,上海亞榮生化儀器廠。1.3試驗方法1.3.1寬葉獨行菜多糖的提取工藝寬葉獨行菜洗凈→6
6、0℃烘干→粉碎、過篩→微波處理→Sevag法去蛋白→醇沉→定容→測定。1.3.2多糖提取得率的測定采用葡萄糖為標準品,以硫酸-苯酚法測定多糖含量。式中:吸光度測定濃度為多糖質(zhì)量濃度(mg/mL);樣品稀釋倍數(shù)為1;樣品溶液體積為100mL;試驗樣品質(zhì)量為1.0g。1.3.3試驗設(shè)計試驗選?。磦€對多糖提取得率起主要作用的因素,即粒度、液料比、微波功率和微波時間,首先進行了單因素試驗。在單因素試驗的基礎(chǔ)上,采用Box-Behnken試驗設(shè)計方案,并利用響應(yīng)面分析方法對微波輔助提取寬葉獨行菜多糖的工藝條件進行了優(yōu)化。2結(jié)果與分析2.1單因素試驗2.1.1粒度對多糖提取得率的影響微波功率400
7、W,粒度40、60、80、100、120目,液料比30∶1(mL/g),后同,微波時間60s,考察材料粒度對多糖提取得率的影響,結(jié)果如圖1所示。由圖1可知,粒度為100目時,具有最高的多糖提取得率。目數(shù)過小時,材料顆粒較大,細胞不易破碎,從而多糖不易溶出。而目數(shù)過大,材料具有較強的表面吸附作用,限制了多糖的進一步溶出,在過濾時也會吸附部分多糖。因此,最佳的提取粒度為100目。2.1.2液料比對多糖提取得率的影響微波功率400W,粒度100目,液