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1、頭花蓼總黃酮提取工藝研究【關(guān)鍵詞】頭花蓼；總黃酮；提取工藝；正交實(shí)驗(yàn) Abstract：ObjectiveTooptimizetheconditionsfortheextractionofthetotalflavonoidsofPolygonumcapitatum.MethodsTheoptimumextractionprocessofthetotalflavonoidsent.ThecontentoftotalflavonoidsinedbyUV-spectrophotometry.ResultsSignificanteffectof
2、alcoholconcentrationisdiscovered.ConclusionTheoptimumextractionprocessisasfollocapitatumes,onehourpertime,e12timesamount. Keycapitatum;Totalflavonoids;Extractionprocess;Orthogonalexperiment 頭花蓼，別名石莽草，石辣蓼和四季紅，為蓼科蓼屬植物頭花蓼PolygonumcapitatumBuch.-Ham.exD.Don的干燥全草或地上部分，主產(chǎn)于貴州、云南
3、、四川、西藏、廣西等省區(qū)，具有清熱利濕、解毒止痛、和血散瘀、利尿通淋等功效。頭花蓼長(zhǎng)期以來(lái)為民間常用草藥，國(guó)內(nèi)外對(duì)其化學(xué)成分、藥理作用研究較少，經(jīng)文獻(xiàn)檢索，其主要成分為黃酮類(lèi)化合物［1，2］，還包括苯甲醛、乙酸、沒(méi)食子酸、β-谷甾醇等［3］，具有抗菌、降溫、利尿等藥理活性，臨床上主要用于治療泌尿生殖系統(tǒng)感染和排石［4～9］。關(guān)于頭花蓼總黃酮的提取工藝研究未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道，我們以總黃酮得率為指標(biāo)，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)考察了乙醇濃度、乙醇體積、提取時(shí)間和提取次數(shù)4個(gè)對(duì)提取因素的影響，確定了頭花蓼總黃酮的最佳提取工藝?！ ?材料與儀器 1.1材料與試劑頭花蓼
4、，產(chǎn)地貴州，由本所天然藥物化學(xué)研究室鑒定為蓼科蓼屬植物頭花蓼PolygonumcapitatumBuch.-Ham.exD.Don的干燥全草，蘆丁對(duì)照品，由本所天然藥物化學(xué)研究室杜成林博士提供，實(shí)驗(yàn)所用試劑均為AR?！ ?.2儀器梅特勒萬(wàn)分之一電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司），U-3000紫外分光光度計(jì)（日立有限公司)?！ ?方法與結(jié)果 2.1總黃酮含量測(cè)定方法 2.1.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱(chēng)取120℃干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品6.5mg，置25ml量瓶中，加60%乙醇適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取6.0ml至25ml量瓶中，6
5、0%乙醇稀釋至刻度，得對(duì)照品溶液。精密吸取對(duì)照品溶液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分別置10ml量瓶中，各加0.1mol/ml三氯化鋁溶液2ml，1mol/ml醋酸鉀溶液3ml，60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，放置30min，以相應(yīng)的溶液作空白，在420nm處測(cè)定吸收度，以濃度對(duì)吸收度作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程為：A=33.307C+0.0004，r=0.9998，線性范圍：0.0030864～0.030864mg/ml?！ ?.1.2供試品溶液的制備及測(cè)定稱(chēng)取一定量頭花蓼原藥材，石油醚索氏提取8h，取出藥材晾干，得脫脂頭花蓼
6、。精密稱(chēng)取脫脂頭花蓼5g，共9份，按正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（見(jiàn)表2）回流提取，過(guò)濾，合并濾液，濃縮，用60%乙醇轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶并稀釋至刻度，再精密量取1ml至25ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，濾過(guò)，作為樣品溶液。精密吸取1ml不同提取條件下的樣品溶液至10ml容量瓶中，按“2.1.1”項(xiàng)測(cè)定，并用回歸方程計(jì)算總黃酮含量?！ ?.1.3回收率實(shí)驗(yàn)精密吸取一定量的已知黃酮含量的頭花蓼提取液，分別加入一定量的蘆丁對(duì)照品溶液，按上述方法測(cè)定總黃酮的含量，平均回收率為98.1%（n=6），RSD為1.07%?！ ?.2正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)以總黃酮得率為考察
7、指標(biāo)，選擇溶媒（乙醇）濃度、溶媒用量、提取時(shí)間和提取次數(shù)為考察因素，每個(gè)因素取3個(gè)水平，進(jìn)行L9(34)正交實(shí)驗(yàn)，因素水平見(jiàn)表1。結(jié)果見(jiàn)表2。表1頭花蓼總黃酮提取因素水平（略）表2L9(34)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析（略） 根據(jù)以上正交分析結(jié)果可知，各考察因素的極差關(guān)系為：RA＞RD＞RB＞RC，理論最佳提取工藝為：A1B3C1D3，對(duì)于提取效率影響最小者為C項(xiàng)，即提取時(shí)間因素影響最小，把C作為空列，作為誤差項(xiàng)處理，進(jìn)行方差分析。結(jié)果見(jiàn)表3。表3影響頭花蓼總黃酮提取因素方差分析表（略） 3討論 由正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果的極差分析可以直觀的看出，頭花蓼總黃
8、酮的最佳提取工藝為A1B3C1D3，即用15倍量55%乙醇提取3次，1h/次。另從表3方差分析結(jié)果可知，對(duì)提取工藝影響因素的大小順序?yàn)锳>D>B，除溶媒
