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1、中藥天年飲對(duì)衰老大鼠肝功能的保護(hù)作用楊振軍謝紅林李皓巖薛景鳳【摘要】目的觀察中藥天年飲對(duì)衰老大鼠肝功能的保護(hù)作用。方法40只SD大鼠隨機(jī)分為4組:正常組、衰老模型組、天年飲用藥組和陰性對(duì)照組,每組10只;D-半乳糖連續(xù)腹腔注射(200mg·kg-1·d-1,連續(xù)40d)制作亞急性衰老的大鼠模型,并給予天年飲灌胃(30d)。分別采用黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法檢測(cè)大鼠血清SOD活性和MDA含量,IFCC連續(xù)監(jiān)測(cè)法檢測(cè)大鼠血清ALT,AST,ALP和γ-GT等各項(xiàng)肝功能指標(biāo)。結(jié)果天年飲可明顯提高衰老大鼠血清的SOD活性、降低MDA含量,天年飲用藥組與衰老模型組比較差異顯著(P<0.05或P<0
2、.01);天年飲可明顯降低衰老大鼠血清ALT、AST、ALP和γ-GT含量,天年飲用藥組與衰老模型組比較差異顯著(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論天年飲可提高衰老機(jī)體的抗氧化能力,改善肝細(xì)胞脂質(zhì)代謝、保護(hù)肝細(xì)胞的功能,具有一定延緩衰老的作用。【關(guān)鍵詞】天年飲衰老肝功能大鼠衰老是一種在遺傳和環(huán)境等多種因素作用下的正常生理過(guò)程。許多實(shí)驗(yàn)證實(shí),機(jī)體的衰老與自由基生成過(guò)多有關(guān),過(guò)多的自由基可導(dǎo)致生物膜功能障礙,引起肝、腦、腎等重要器官的功能障礙〔1〕。天年飲由何首烏、肉蓯蓉、丹參等中藥制成,具有補(bǔ)肝腎、益精血、延年益壽等功效。我們的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)天年飲可改善衰老大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能,延緩性腺衰老〔2~
3、3〕,本研究繼續(xù)觀察了天年飲對(duì)衰老大鼠肝功能的保護(hù)作用。 1材料和方法 1.1藥品與試劑D-半乳糖由北京化學(xué)試劑公司生產(chǎn)(批號(hào):020402),用生理鹽水配制成25%的溶液,按200mg·kg-1·d-1給藥。天年飲由何首烏、肉蓯蓉、丹參、淫羊藿、懷牛膝、茯苓6味中藥組成,經(jīng)熬制后每毫升含生藥1.5g灌胃。檢測(cè)血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的試劑盒由南京建成生物工程研究所提供;檢測(cè)血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的試劑盒購(gòu)自北京首都醫(yī)科大學(xué)臨床醫(yī)療科技中心?! ?.2動(dòng)物的選擇及分組成年雌性SD大鼠40只,體重180~250g,由
4、河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供。將40只大鼠隨機(jī)分為4組:正常組、模型組、天年飲用藥組和陰性對(duì)照組,每組均為10只。其中模型組、用藥組、陰性對(duì)照組大鼠均采用D-半乳糖連續(xù)腹腔注射(1次/d,共40d)制作亞急性衰老的大鼠模型,模型組大鼠造模成功后不再做任何處理;天年飲用藥組大鼠于造模成功后每天用天年飲灌胃,共30d;陰性對(duì)照組于造模成功后每天用同等劑量的生理鹽水灌胃,時(shí)間同用藥組大鼠?! ?.3指標(biāo)檢測(cè)大鼠經(jīng)內(nèi)眥取血,2000r/min離心10min,取上清液,-20℃冰箱保存待測(cè)?! ?.3.1SOD活性及MDA含量分別采用黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法檢測(cè)大鼠血清SOD活性和MDA含量?!?/p>
5、 1.3.2肝功能應(yīng)用HITACHI717全自動(dòng)生化分析儀、IFCC連續(xù)監(jiān)測(cè)法檢測(cè)大鼠血清中的ALP和AST?! ?.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件以方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,P<0.05為差異顯著性的標(biāo)準(zhǔn)?! ?結(jié)果 2.1大鼠血清SOD活性和MDA含量見(jiàn)表1?! ∨c正常組大鼠比較,模型組大鼠血清SOD活性明顯降低(P<0.05)、MDA含量明顯升高(P<0.01);與模型組大鼠比較天年飲用藥組大鼠血清SOD活性明顯升高(P<0.05)、MDA含量明顯降低(P<0.01),差異顯著?! ”?大鼠血清SOD活性和MDA含量(略) 與正常組比較,#P<0.05,*P<0.01;與模型
6、組比較,##P<0.05,**P<0.01;n=10 2.2各組大鼠的肝功能見(jiàn)表2?! ∷ダ夏P徒M大鼠各項(xiàng)肝功能指標(biāo)均明顯高于正常組大鼠(P<0.01);天年飲可明顯降低模型組大鼠各項(xiàng)肝功能指標(biāo),與模型組比較差異顯著(P<0.05或P<0.01)?! ”?各組大鼠的肝功能(略) 與正常組比較,*P<0.01;與模型組比較,**P<0.05,#P<0.01;n=10 3討論 《靈樞·天年》中詳細(xì)描述了人衰老過(guò)程中五臟功能衰退的時(shí)間順序:“五十歲,肝氣始衰,肝葉始薄,膽汁始滅,目始不明。六十歲,氣始衰,苦憂悲,血?dú)庑付?,故好臥。七十歲,脾氣虛皮膚枯……”其中肝在五臟中最先出現(xiàn)衰老征象。天
7、年飲方由劉河間《宣明論方》何首烏丸加味而成,何首烏丸本由何首烏、肉蓯蓉、懷牛膝組成,能填精補(bǔ)髓、烏發(fā)延年;于此基礎(chǔ)上加淫羊藿補(bǔ)腎壯陽(yáng)以強(qiáng)筋骨,丹參活血化淤以通心脈,茯苓健脾利濕以寧心神。諸藥相配通調(diào)心脾肝腎四臟,而以腎為主,氣機(jī)條達(dá),血脈流通,衰從何由?! ∷ダ鲜巧^(guò)程中正常的生理現(xiàn)象,自1956年英國(guó)學(xué)者Haman提出自由基學(xué)說(shuō)以來(lái),大量實(shí)驗(yàn)表明自由基及其引起的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)是引起生物衰老的主要原因。在正