中藥天年飲對脾衰老的延緩作用研究

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1、中藥天年飲對脾衰老的延緩作用研究作者：陳志宏程麗梅張宏凱謝利德高福祿【摘要】目的觀察脾的衰老變化及中藥天年飲延緩免疫器官衰老的作用。方法D半乳糖連續(xù)腹腔注射建立亞急性衰老的大鼠模型；待模型成功建立后，用藥組大鼠給予天年飲灌胃。分別檢測各組大鼠血脂和脾臟指數(shù)的變化，觀察脾增殖細(xì)胞核抗原(PA)、p53和p16表達(dá)的變化。結(jié)果與正常組大鼠比較，模型組大鼠的血脂和脾p53、p16的表達(dá)明顯升高，模型組的脾臟指數(shù)和脾PA的表達(dá)明顯下降(P＜0.05，P＜0.01)。中藥天年飲可明顯改善模型大鼠脾的各種變化：與模型組大鼠比較，天年飲

2、用藥組大鼠血脂和脾p53、p16的表達(dá)明顯下降，而脾臟指數(shù)和脾PA的表達(dá)明顯升高(P＜0.05，P＜0.01)。結(jié)論天年飲可通過阻止脾臟的萎縮、促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖能力，提高衰老機(jī)體的免疫功能，可能具有延緩衰老的作用?！娟P(guān)鍵詞】衰老；脾；天年飲；PA；p53；p16【Abstract】ObjectiveToobservethesenescentchangesofspleenandtheantiagingeffectsoftraditionalChinesedrugTiannianyinonimmuneorgans.Metho

3、ds30SDratslydividedinto3groupsandeachgrouphad10rats:normal,agingmodelandTiannianyingroups.ThesubacutelyagingmodelratsadebyinjectingDgalintoabdominalcavitycontinually.AftertheagingmodelinistratedTiannianyinbyintragastricadministration.Thebloodlipidandthespleeninde

4、xofratsineachgroupeasured,andtheexpressionsofPA,p53andp16ofspleenalrats,thespleenindexandtheexpressionofPAinspleenofagingmodelratsdecreasedobviously;odelratsincreasedobviously(P＜0.05,P＜0.01).Tiannianyincouldimprovethesenescentchangesinspleenofagingratssignificantly

5、:paredodelrats,thespleenindexandtheexpressionofPAinspleenincreasedremarkablyandthebloodlipid,theexpressionsofp53andp16inspleendecreasedinTiannianyingroupremarkably(P＜0.05,P＜0.01).ConclusionsTiannianyincanimprovetheimmunefunctionofagedbypreventingatropyofspleenandfa

6、cilitatingthereproductiveactivityoflymphocytes,thushasbetterantiagingeffects.【Keyg/kg給藥，每天1次，連續(xù)40d)制作亞急性衰老的動物模型；模型組大鼠造模成功后不再做任何處理，用藥組大鼠造模成功后每天用天年飲灌胃，共30d。1.2藥品與試劑天年飲由灸何首烏、懷牛膝、肉從蓉、淫羊藿、丹參、茯苓六味中藥組成，煎制后每ml含生藥1.5g，按16.2g/kg灌胃給藥。檢測血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDLC)含量的試劑

7、盒購自北京中法生物公司；增殖細(xì)胞核抗原(proliferatingcellneuclearantigen,PA)、p53、p16免疫組化試劑盒購自武漢博士德生物工程公司。1.3血脂大鼠經(jīng)內(nèi)眥取血，離心后取上清，應(yīng)用日本日立公司BoehringerMannhein/Hitachi717全自動生化分析儀分別采用酶法和直接法檢測TC、TG和HDLC。1.4脾臟指數(shù)大鼠稱重，斷頭處死，迅速取出脾臟后去除脂肪、筋膜后稱重，計(jì)算脾臟指數(shù)，脾臟指數(shù)=脾臟重量/體重。1.5HE及免疫組化染色稱重后的脾臟入Bouin液固定，常規(guī)石蠟包埋，連

8、續(xù)切片(片厚6μm)，貼于涂有APES的載玻片上。1.5.1HE染色蘇木精伊紅染色觀察脾的組織結(jié)構(gòu)。1.5.2免疫組化染色及定量分析采用SABC免疫組化染色觀察大鼠脾PA、p53、p16的表達(dá)情況(PA一抗為小鼠抗體，p53、p16一抗均為兔抗體，一抗稀釋比例均為1∶100)，以細(xì)胞核出