橙皮苷對小鼠免疫性肝損傷的保護作用及部分作用機制研究

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1、安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文橙皮苷對小鼠免疫性肝損傷的保護作用及部分作用機制研究姓名:李曉冬申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):藥理學(xué)指導(dǎo)教師:李俊20100601安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文橙皮苷對小鼠免疫性肝損傷的保護作用及部分作用機制研究研究生李曉冬導(dǎo)師李俊教授(摘要)本文采用了免疫性小鼠肝損傷模型,分別從免疫調(diào)節(jié)和細胞因子水平變化的角度,研究分析了橙皮苷對免疫性肝損傷保護作用的部分機制。目的研究HDN對ConA誘導(dǎo)的小鼠免疫性肝損傷的保護作用及部分作用機制研究。方法:采用尾靜脈一次性注射給予一定劑量的ConA(20mg/kg),誘導(dǎo)小鼠免疫性肝損傷模

2、型,造模8h后采血,并處死動物,剖腹取肝,制備肝勻漿。稱量肝臟重量并計算臟器指數(shù);測定不同劑量的橙皮苷對肝損傷血清中ALT、AST活性、白細胞介素-1(IL-1)、干擾素-γ(IFN-γ)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的含量、肝勻漿中ALT、AST活性、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響;RT-PCR檢測肝臟中TNF-αmRNA表達水平;同時對肝組織進行病理學(xué)檢查查并進行病理學(xué)分級;免疫組化法檢測橙皮苷對小鼠肝細胞中α-SMA、NF-κBp65表達的影響。結(jié)果HDN能降低小鼠

3、免疫性肝損傷血清ALT、AST、TNF-α、IFN-γ和IL-1的水平,降低肝勻漿中ALT、AST、MDA、NO的含量,升高GSH的含量增強SOD的活性,RT-PCR法顯示HDN能顯著降低模型小鼠肝勻漿中TNF-α水平,從而達到保護肝臟的目的,同時HDN減輕ConA對肝組織的病理損傷,抑制ConA引起的肝臟α-SMA、NF-κBp65的過度表達,從而保護肝臟。結(jié)論HDN對ConA致小鼠免疫性肝損傷具有一定的保護作用,其機制可能與他清除自由基,增強機體抗脂質(zhì)過氧化能力及降低IL-1、3安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文TNF-α和IFN-γ等炎性細胞

4、因子的表達有關(guān)。關(guān)鍵詞:橙皮苷,免疫性肝損傷,白介素-1,腫瘤壞死因子-α,平滑肌肌動蛋白,機制4安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文Protectiveeffectofhesperidinagainstimmunehepaticinjury inMiceanditsmechanismPH.Mcandidate:LiXiaodongSupervisor:Prof.liJun(Abstract)Theessayusedtheimmunehepaticinjurymodels.Itinvestigatedthemechanismofitsprotecti

5、veeffectonimmunehepaticinjuryfrommodulationofimmunologicalfunctionandthelevelsofcytokinesproduction.ObjectiveTostudytheprotectiveeffectofhesperidinagainstimmunehepaticinjuryinducedbyconcanavalinAinMiceanditsmechanism..MethodsAllgroupswereinjectedwithConAonceagainwithConA(

6、20mg/kg)fromtailveininordertoinduceimmunehepaticinjuryexceptthemiceinnormalgroup.Animalsweresacrificedatthe8thhourandbloodwascollected,theliverwasharvestedforliverhomogenate.Indexofliverweretested.ThelevelsofALT,AST,IL-1,IFN-γandTNF-αinserum,thecontentsofMDA,SOD,NOandGSHi

7、nliverhomogenateweremeasured.thelevelsofTNF-αmRNAexpressioninliverweretestedbyreversetranscriptionpolymerasechainreaztion(RT-PCR).Histopathlogicalexaminationwasobserved.TNF-αandNF-κBp65inhepatictissuesweredeterminedbythemethodofimmunohistochemistry,ResultsComparedwiththat

8、ofmodelgroup,thelevelsofALT,AST,MDA,NO,IL-1,IFN-γandTNF-αweresignificantlyloweredbyhesperidinwhe

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