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《探討黃芪、赤芍對(duì)小鼠免疫性肝損傷的保護(hù)作用》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、探討黃芪、赤芍對(duì)小鼠免疫性肝損傷的保護(hù)作用 肝臟擔(dān)負(fù)著物質(zhì)代謝和解毒的功能，是機(jī)體重要的器官，因而也易受到病毒、細(xì)菌、酒精等攻擊，誘發(fā)肝臟損傷。肝損傷時(shí)肝枯否細(xì)胞的激活和各種炎癥介質(zhì)、細(xì)胞因子和氧自由基、一氧化氮等物質(zhì)大量產(chǎn)生，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)的發(fā)生。2006年選擇毒性低，價(jià)廉的常用傳統(tǒng)中藥黃芪與赤芍對(duì)免疫性肝損傷保護(hù)作用進(jìn)行研究。黃芪活性成分黃芪甙具有抑制脂氧化酶,減少脂多糖(LPS)的生成,提高肝臟谷胱苷肽(GSH)含量，抗自由基，調(diào)節(jié)代謝，保護(hù)線粒體,尤其在調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗病毒、改善肝臟供血等方面有
2、重要作用[1，2]。有報(bào)道赤芍對(duì)乙型肝炎患者肝臟損害有保護(hù)作用[3]。單藥黃芪及赤芍對(duì)動(dòng)物免疫性肝損傷的保護(hù)作用國內(nèi)均有報(bào)道，黃芪與赤芍二者聯(lián)合用藥的效果及機(jī)制未見報(bào)道，本研究使用卡介菌（BCG）和脂多糖（LPS）誘導(dǎo)小鼠免疫性肝損傷模型，選擇血清酶學(xué)測(cè)定及超氧化物歧化酶（SOD）、肝臟脂質(zhì)過氧化物丙二醛(MDA)為測(cè)定指標(biāo)，觀察黃芪注射液、赤芍注射液聯(lián)合應(yīng)用對(duì)免疫性肝損傷的保護(hù)作用?！ 。辈牧吓c方法 ?。保辈牧稀 ?.1.1動(dòng)物 昆明系雄性小鼠，5～8周齡，體重（２０±２）g，由黑龍江
3、中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。 1.1.2試劑 BCG由衛(wèi)生部生物制品研究所提供，LPS購自Sigma公司，黃芪注射和赤芍注射液為成都地奧九泓制藥廠藥品，SOD、MDA試劑盒為南京建成生物工程公司產(chǎn)品，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）試劑購于北京中生生物工程高科技公司?！ ?.1.3儀器 SpectraMAX190酶標(biāo)儀、日立7600-020全自動(dòng)生化分析儀?！ ?.2方法 1.2.1分組 60只小鼠隨機(jī)分為5組，對(duì)照組、模型組、黃芪組、赤芍組、黃芪赤芍聯(lián)合組。對(duì)照
4、組腹腔注射性理鹽水15ml/kg，模型組和三個(gè)給藥組建立免疫性肝損傷模型?！ ?.2.2造?！ ∈缶?jīng)尾靜脈注射BCG1mg(0.2ml)，3h后，給藥組分別腹腔注射相應(yīng)藥物(黃芪15ml/kg，或赤芍15ml/kg，或黃芪和赤芍各7ml/kg），連續(xù)10d。最后1次給藥3h后，經(jīng)尾靜脈注射LPS10μg（0.2ml），禁食不禁水，5h后，眼眶取血，分離血清，同時(shí)脫頸椎處死小鼠，迅速取出肝右葉組織制備成勻漿測(cè)MDA、SOD?！?.3血清酶活性測(cè)定 血清ALT，AST，LDH活性測(cè)定用日立7600-
5、020全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定；MDA和SOD的含量測(cè)定，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作?！ ?.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示?！ ?結(jié)果 2.1血清ALT、AST及LDH模型組與對(duì)照組比較，血清中ALT、AST和LDH升高，表明造模型成功。三個(gè)用藥組與模型組比較各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著性差異（P＜0.05，P＜0.01），說明黃芪注射液與赤芍注射液均能減少肝細(xì)胞內(nèi)酶的逸出，對(duì)肝細(xì)胞有較明顯的保護(hù)作用；黃芪組強(qiáng)于赤芍組（P＜0.01）,聯(lián)合組作用更顯著，
6、見表1。表1各組小鼠血清ALT、AST及LDH水平（略）注：與對(duì)照組比較，（1）P＜0.05，（2）P＜0.01；與模型組比較，（3）P＜0.05，（4）P＜0.01；與黃芪組比較，（5）P＜0.05；與赤芍組比較，（6）P＜0.05，（7）P＜0.01?！ ?.2肝組織SOD及MDA模型組小鼠肝勻漿SOD水平低于對(duì)照組（P＜0.01），MDA含量高于對(duì)照組（P＜0.05），表明造模成功。黃芪注射液與赤勺注射液均能提高肝組織SOD活力，減少M(fèi)DA含量，見表2。表2各組小鼠肝組織SOD及MDA水平（略）注：
7、與對(duì)照組比較，（1）P＜0.05，（2）P＜0.01；與模型組比較，（3）P＜0.05，（4）P＜0.01；與黃芪組比較（5）P＜0.01；與赤芍組比較（6）P＜0.05，（7）P＜0.01。 3討論 多數(shù)學(xué)者認(rèn)為慢性病毒性肝炎不是肝炎病毒對(duì)肝細(xì)胞的直接損傷，而是肝炎病毒侵入肝細(xì)胞后，激發(fā)人體免疫應(yīng)答引起免疫性肝損傷。微量的BCG和LPS可誘導(dǎo)小鼠免疫性肝損傷模型類似于人類肝炎發(fā)生的病理生理過程，BCG首先致敏T淋巴細(xì)胞，特別是大量致敏肝內(nèi)枯否細(xì)胞，使巨噬細(xì)胞聚集于肝臟，在注射LPS后激活致敏狀態(tài)的細(xì)
8、胞，使其釋放大量細(xì)胞因子，如一氧化氮、腫瘤壞死因子(TNF)、白細(xì)胞介素(IL)、自由基和白三烯等，進(jìn)一步引起肝臟免疫損傷，因此是篩選治療肝病藥物較為理想的模型之一[7]。 機(jī)體通過酶系統(tǒng)與非酶系統(tǒng)產(chǎn)生自由基，自由基攻擊生物膜中的不飽和脂肪酸引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用，產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化物，如MDA，它能改變酶的功能，引起基因調(diào)控及表達(dá)錯(cuò)誤，最終導(dǎo)致肝細(xì)胞變性、壞死。因此，MDA是體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)終產(chǎn)物，其水平的改變能間接地反映由于自
