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《低溫超高壓連續(xù)流細胞破碎儀》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、低溫超高壓連續(xù)流細胞破碎儀崔冶建JN-3000PLUS細胞破碎的方法機械破碎法:利用勻漿器、研磨器或搗碎機等將細胞破碎。物理破碎法:利用超聲波、壓力差或溫度差等將細胞破碎。化學(xué)滲透法:利用酸、堿、表面活性劑和有機溶劑等試劑,采用化學(xué)法處理可以改變細胞壁或膜的通透性從而使內(nèi)合物有選擇地滲透出來。酶學(xué)破碎法:利用各種水解酶,將細胞壁分解,使細胞內(nèi)含物釋放出來。組織搗碎機一般用于動物組織、植物肉質(zhì)種子、柔嫩的葉芽等,轉(zhuǎn)速可高達10000rpm/M以上。存在的問題:由于旋轉(zhuǎn)刀片的機械切力很大,適用制備
2、一些大分子量的樣品,不適合用于核酸。勻漿器?將剪碎的組織置于勻漿器中來回研磨,細胞得于破碎.細胞破碎程度比搗碎機高,適用于量少動物臟器組織。存在的問題:團狀或絲狀真菌造成堵塞,較小的革蘭氏陽性菌及一些亞細胞器,質(zhì)地堅硬,易損傷勻漿。超聲波破碎儀超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂,此法適用于微生物材料,以及大腸桿菌制備各種酶。操作簡單,重復(fù)性較好,節(jié)省時間。存在問題:超聲波破碎在實驗室使用較普遍,處理少量樣品時操作簡便,液量損失少,但是超聲波產(chǎn)生的化學(xué)自由基團能使某些敏感性活性物質(zhì)變性失活。
3、散熱均有困難,要采取相應(yīng)降溫措施.對超聲波敏感核酸應(yīng)慎用?;瘜W(xué)滲透法利用酸、堿、表面活性劑和有機溶劑等試劑,采用化學(xué)法處理可以改變細胞壁或膜的通透性,從而使內(nèi)合物有選擇地滲透出來提取核酸時,用此法破碎細胞作用比較溫和存在的問題:時間長,效率低,化學(xué)試劑毒性較強,同時對產(chǎn)物也有毒副作用,進一步分離時需要用透析等方法除去這些試劑,通用性差.某種試劑只能作用于某些特定類型的微生物細胞。酶溶法利用各種水解酶,如溶酶、纖維素酶、蝸牛酶等,將細胞壁分解,使細胞內(nèi)含物釋放出來.此法適用多種微生物,其作用條件溫
4、和,內(nèi)含物成份不易受到破壞;細胞壁損壞的程度可以控制。存在的問題:易造成產(chǎn)物抑制作用,導(dǎo)致胞內(nèi)物質(zhì)釋放率低的重要因素。而且溶酶價格高,限制了大規(guī)模使用。另酶溶法通用性差,不同菌種需選擇不同的酶有一定局限性,不適宜大量的蛋白質(zhì)提取,使進一步純化帶來困難。低溫超高壓連續(xù)流細胞破碎儀的問世填補了市場空白.細胞高壓破碎時會產(chǎn)生一定的熱量,而此儀器設(shè)計有冷卻循環(huán)水裝置,將破碎時產(chǎn)生的熱量吸收降溫,為我們實驗工作帶來了極大的方便。低溫超高壓連續(xù)流細胞破碎儀在內(nèi)部核心結(jié)構(gòu)設(shè)計方面,經(jīng)過反復(fù)設(shè)計,計算和實驗,找
5、到了剪切效應(yīng)、碰撞效應(yīng)、空穴效應(yīng)三種效應(yīng)搭配的最佳比例。JN-3000PLUS低溫超高壓連續(xù)流細胞破碎儀超高壓細胞破碎原理圖空穴效應(yīng):被柱塞壓縮的樣品內(nèi)積聚了極高的能量,通過可調(diào)節(jié)限流縫隙時瞬間失壓,造成高能釋放引起空穴爆炸,致使物料強烈粉碎細化。剪切效應(yīng):在高壓條件下,工作區(qū)內(nèi)形成了高強度的能量聚集,當流體流經(jīng)均質(zhì)閥微小的流道時所產(chǎn)生強烈的湍流和剪切效應(yīng)將流體中顆?;虻畏纸獬晌⑿〉牧W印E鲎残?yīng):通過可調(diào)節(jié)限流縫隙的樣品以上述極高的線速度,撞擊到用特殊材料制成的撞環(huán)上,造成樣品粉碎。低溫超高壓
6、連續(xù)流細胞破碎儀利用超高壓能量使樣品在柱塞的推動作用下進入均質(zhì)閥,在均質(zhì)閥內(nèi)被加壓,通過狹縫瞬間釋放,產(chǎn)生剪切效應(yīng)、空穴效應(yīng)、碰撞效應(yīng).在這三種效應(yīng)作用下使細胞破碎,使樣品均質(zhì)化或分散乳化、顆粒納米化。全過程在4℃-6℃的低溫循環(huán)水浴中進行,保持原有物質(zhì)活性和性能。工作原理JN-3000PLUS1.樣品破碎全過程都在4℃~6℃低溫水浴中進行,保持原有物質(zhì)活性和性能2.自動進樣,可連續(xù)工作,2.1升/小時3.樣品處理量最少5ml4.主機使用液壓動力,高壓狀態(tài)可任意停機、開機,壓力保持不變5.沖
7、洗系統(tǒng)鏡面拋光316L不銹鋼管道,防止樣品殘留6.可在位清洗滅菌7.采用物理破碎方法,無化學(xué)殘留物8.操作簡單,使用方便特點1.大腸桿菌等細菌破碎;酵母/靈芝孢子等真菌破碎;2.藍藻/綠藻等藻類破碎;3.線蟲等動、植物細胞破碎;4.放線菌破碎;嗜熱菌破碎,原核分枝桿菌破碎;5.酶的制備和分離;重組多肽的制備;應(yīng)用范圍6.晶體工程;蛋白晶體;7.乳劑、脂質(zhì)體等納米乳化均質(zhì);微乳納米混懸劑;藍藻/綠藻等藻類破碎;8.中草藥破碎提取內(nèi)容物;9.超高壓誘變育種;10.納米油墨、納米油漆、納米染料;
8、超微細化,超細粉碎;●??大腸桿菌與酵母一次破碎率均達95%-99%應(yīng)用實例圖1大腸桿菌破壁前圖2:大腸桿菌破壁后●??大腸桿菌與酵母一次破碎率均達99%-95%應(yīng)用實例圖1靈芝孢子破壁前圖2:靈芝孢子破壁后●靈芝孢子的破壁率可達95%左右應(yīng)用實例●??大腸桿菌與酵母一次破碎率均達99%-95%●靈芝孢子的破壁率可達95%左右●???納米乳化后的脂質(zhì)體平均粒度為.68nm,最小可達28.2nm圖:脂質(zhì)體納米乳化處理前后對比圖應(yīng)用實例●??大腸桿菌與酵母一次破碎率均達99%-95%●靈芝孢子