低溫超高壓連續(xù)流細(xì)胞破碎儀-文檔資料.ppt

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1、低溫超高壓 連續(xù)流細(xì)胞破碎儀崔冶建JN-3000PLUS細(xì)胞破碎的方法機(jī)械破碎法:利用勻漿器、研磨器或搗碎機(jī)等將細(xì)胞破碎。物理破碎法:利用超聲波、壓力差或溫度差等將細(xì)胞破碎?;瘜W(xué)滲透法:利用酸、堿、表面活性劑和有機(jī)溶劑等試劑,采用化學(xué)法處理可以改變細(xì)胞壁或膜的通透性從而使內(nèi)合物有選擇地滲透出來(lái)。酶學(xué)破碎法:利用各種水解酶,將細(xì)胞壁分解,使細(xì)胞內(nèi)含物釋放出來(lái)。組織搗碎機(jī)一般用于動(dòng)物組織、植物肉質(zhì)種子、柔嫩的葉芽等,轉(zhuǎn)速可高達(dá)10000rpm/M以上。存在的問(wèn)題:由于旋轉(zhuǎn)刀片的機(jī)械切力很大,適用制備一些大分子量的樣品,不適合用于核酸。勻漿器 ?將

2、剪碎的組織置于勻漿器中來(lái)回研磨,細(xì)胞得于破碎.細(xì)胞破碎程度比搗碎機(jī)高,適用于量少動(dòng)物臟器組織。存在的問(wèn)題:團(tuán)狀或絲狀真菌造成堵塞,較小的革蘭氏陽(yáng)性菌及一些亞細(xì)胞器,質(zhì)地堅(jiān)硬,易損傷勻漿。超聲波破碎儀超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂,此法適用于微生物材料,以及大腸桿菌制備各種酶。操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性較好,節(jié)省時(shí)間。存在問(wèn)題:超聲波破碎在實(shí)驗(yàn)室使用較普遍,處理少量樣品時(shí)操作簡(jiǎn)便,液量損失少,但是超聲波產(chǎn)生的化學(xué)自由基團(tuán)能使某些敏感性活性物質(zhì)變性失活。散熱均有困難,要采取相應(yīng)降溫措施.對(duì)超聲波敏感核酸應(yīng)慎用?;瘜W(xué)滲透法利用酸、堿、表面活性劑和有機(jī)

3、溶劑等試劑,采用化學(xué)法處理可以改變細(xì)胞壁或膜的通透性,從而使內(nèi)合物有選擇地滲透出來(lái)提取核酸時(shí),用此法破碎細(xì)胞作用比較溫和存在的問(wèn)題:時(shí)間長(zhǎng),效率低,化學(xué)試劑毒性較強(qiáng),同時(shí)對(duì)產(chǎn)物也有毒副作用,進(jìn)一步分離時(shí)需要用透析等方法除去這些試劑,通用性差.某種試劑只能作用于某些特定類型的微生物細(xì)胞。酶溶法利用各種水解酶,如溶酶、纖維素酶、蝸牛酶等,將細(xì)胞壁分解,使細(xì)胞內(nèi)含物釋放出來(lái).此法適用多種微生物,其作用條件溫和,內(nèi)含物成份不易受到破壞;細(xì)胞壁損壞的程度可以控制。存在的問(wèn)題:易造成產(chǎn)物抑制作用,導(dǎo)致胞內(nèi)物質(zhì)釋放率低的重要因素。而且溶酶價(jià)格高,限制了大規(guī)

4、模使用。另酶溶法通用性差,不同菌種需選擇不同的酶有一定局限性,不適宜大量的蛋白質(zhì)提取,使進(jìn)一步純化帶來(lái)困難。低溫超高壓連續(xù)流細(xì)胞破碎儀的問(wèn)世填補(bǔ)了市場(chǎng)空白.細(xì)胞高壓破碎時(shí)會(huì)產(chǎn)生一定的熱量,而此儀器設(shè)計(jì)有冷卻循環(huán)水裝置,將破碎時(shí)產(chǎn)生的熱量吸收降溫,為我們實(shí)驗(yàn)工作帶來(lái)了極大的方便。低溫超高壓連續(xù)流細(xì)胞破碎儀在內(nèi)部核心結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)方面,經(jīng)過(guò)反復(fù)設(shè)計(jì),計(jì)算和實(shí)驗(yàn),找到了剪切效應(yīng)、碰撞效應(yīng)、空穴效應(yīng)三種效應(yīng)搭配的最佳比例。JN-3000PLUS低溫超高壓連續(xù)流細(xì)胞破碎儀超高壓細(xì)胞破碎原理圖空穴效應(yīng):被柱塞壓縮的樣品內(nèi)積聚了極高的能量,通過(guò)可調(diào)節(jié)限流縫隙時(shí)瞬

5、間失壓,造成高能釋放引起空穴爆炸,致使物料強(qiáng)烈粉碎細(xì)化。剪切效應(yīng):在高壓條件下,工作區(qū)內(nèi)形成了高強(qiáng)度的能量聚集,當(dāng)流體流經(jīng)均質(zhì)閥微小的流道時(shí)所產(chǎn)生強(qiáng)烈的湍流和剪切效應(yīng)將流體中顆粒或滴分解成微小的粒子。碰撞效應(yīng):通過(guò)可調(diào)節(jié)限流縫隙的樣品以上述極高的線速度,撞擊到用特殊材料制成的撞環(huán)上,造成樣品粉碎。低溫超高壓連續(xù)流細(xì)胞破碎儀利用超高壓能量使樣品在柱塞的推動(dòng)作用下進(jìn)入均質(zhì)閥,在均質(zhì)閥內(nèi)被加壓,通過(guò)狹縫瞬間釋放,產(chǎn)生剪切效應(yīng)、空穴效應(yīng)、碰撞效應(yīng).在這三種效應(yīng)作用下使細(xì)胞破碎,使樣品均質(zhì)化或分散乳化、顆粒納米化。全過(guò)程在4℃-6℃的低溫循環(huán)水浴中進(jìn)行

6、,保持原有物質(zhì)活性和性能。工作原理JN-3000PLUS1.樣品破碎全過(guò)程都在4℃~6℃低溫水浴中進(jìn)行, 保持原有物質(zhì)活性和性能 2.自動(dòng)進(jìn)樣,可連續(xù)工作,2.1升/小時(shí) 3.樣品處理量最少5ml 4.主機(jī)使用液壓動(dòng)力,高壓狀態(tài)可任意停機(jī)、開(kāi)機(jī), 壓力保持不變 5.沖洗系統(tǒng)鏡面拋光316L不銹鋼管道,防止樣品殘留 6.可在位清洗滅菌 7.采用物理破碎方法,無(wú)化學(xué)殘留物 8.操作簡(jiǎn)單,使用方便特點(diǎn)1.大腸桿菌等細(xì)菌破碎;酵母/靈芝孢子 等真菌破碎; 2.藍(lán)藻/綠藻等藻類破碎; 3.線蟲(chóng)等動(dòng)、植物細(xì)胞破碎; 4.放線菌破碎;嗜熱菌破碎,原核分枝桿

7、 菌破碎; 5.酶的制備和分離;重組多肽的制備;應(yīng)用范圍6.晶體工程;蛋白晶體;7.乳劑、脂質(zhì)體等納米乳化均質(zhì);微乳 納米混懸劑;藍(lán)藻/綠藻等藻類破碎; 8.中草藥破碎提取內(nèi)容物;9.超高壓誘變育種;10.納米油墨、納米油漆、納米染料;超微 細(xì)化,超細(xì)粉碎;●??大腸桿菌與酵母一次破碎率均達(dá)95%-99%應(yīng)用實(shí)例圖1大腸桿菌破壁前圖2:大腸桿菌破壁后●??大腸桿菌與酵母一次破碎率均達(dá)99%-95%應(yīng)用實(shí)例圖1靈芝孢子破壁前圖2:靈芝孢子破壁后●靈芝孢子的破壁率可達(dá)95%左右應(yīng)用實(shí)例●??大腸桿菌與酵母一次破碎率均達(dá)99%-95%●??靈芝孢子

8、的破壁率可達(dá)95%左右●???納米乳化后的脂質(zhì)體平均粒度為.68nm,最小可達(dá)28.2nm圖:脂質(zhì)體納米乳化處理前后對(duì)比圖應(yīng)用實(shí)例●??大腸桿菌與酵母一次破碎率均達(dá)

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