實驗室設(shè)備及培養(yǎng)條

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1、2021/7/81第二章實驗室設(shè)備和培養(yǎng)條件在進行植物組織培養(yǎng)工作之前，首先應對工作中需要哪些最基本的設(shè)備條件有個全面的了解，以便因地制宜地利用現(xiàn)有房屋，或新建、改建實驗室。2021/7/82第一節(jié)實驗室設(shè)計植物組織培養(yǎng)是在嚴格無菌的條件下進行的。要做到無菌的條件，需要一定的設(shè)備、器材和用具，同時還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養(yǎng)條件。2021/7/83實驗室的大小取決于工作的目的和規(guī)模：1.以工廠化生產(chǎn)為目的，實驗室規(guī)模太小，則會限制生產(chǎn)影響效率。2.在設(shè)計組織培養(yǎng)實驗室時，應按組織培養(yǎng)程序來設(shè)計,避免某些環(huán)節(jié)倒排，引起日后工作混亂。一、標準的組織培養(yǎng)實驗室洗滌室（準備室）配置室

2、滅菌室接種室培養(yǎng)室觀察室2021/7/842021/7/851.準備室器具的洗滌、干燥、消毒配置室進行藥品的保存、配置、消毒、分裝3.滅菌室培養(yǎng)基及使用器具的消毒與滅菌2021/7/86準備室的設(shè)置及配備2021/7/874.接種室進行材料的接種，內(nèi)置超凈工作臺或接種箱。外設(shè)緩沖間,放置拖鞋、工作服、工作帽5.培養(yǎng)室將接種的材料進行無菌培養(yǎng)生長的場所6.細胞學觀察實驗室進行培養(yǎng)材料的組織學、細胞學觀察照相等接種室的設(shè)置和配備2021/7/88接種室(外設(shè)緩沖間)培養(yǎng)室2021/7/89第二節(jié)基本儀器設(shè)備與用品2021/7/810（一）儀器設(shè)備1.超凈工作臺(cleaningtable

3、):用于培養(yǎng)物的無菌操作（由鼓風機、濾板、操作臺、紫外燈和照明燈組成）。超凈臺分水平式和垂直式二種型號2021/7/8112.高壓滅菌鍋（手提式、立式或臥式）用于進行培養(yǎng)基和器械用具的滅菌。小規(guī)模實驗室可選用小型手提式高壓滅菌鍋臥式滅菌鍋手提式滅菌鍋3.恒溫培養(yǎng)箱:用于植物材料的培養(yǎng)，其內(nèi)有溫度感受器，控制箱內(nèi)溫度到所調(diào)指標。生化培養(yǎng)箱還配有光照裝置2021/7/812培養(yǎng)箱2021/7/813電子天秤4.電子分析天平和托盤天平：電子分析天平，用于稱取大量元素、微量元素、維生素、激素等微量藥品精確度為0.0001g；托盤天平用于稱取用量較大的糖和瓊脂等，其精確度為0.1g。天平應放置

4、在干燥、不受震動的天平操作臺上。5.酸度計：首次使用酸度計前，應用標準液調(diào)節(jié)定位，然后固定。測量pH值時，待測液必須充分攪拌均勻。如果培養(yǎng)基溫度過高，測量時要調(diào)整pH值計上的溫度扭使之和培養(yǎng)基溫度相當。2021/7/8146.烘箱：用于干燥洗凈的玻璃器皿，也可用于干熱滅菌和測定干物重。用于干燥需保持80-100℃；進行干熱滅菌需保持150℃，達1-3h；若測定干物重，則溫度應控制在80℃烘干至完全干燥為止。烘箱7.顯微鏡顯微鏡8.培養(yǎng)架：放置培養(yǎng)材料9.紫外線殺菌燈：殺菌10.定時器：控制光照時間11.普通冰箱：主要用于貯存母液、各種易變質(zhì)、易分解的化學藥品以及植物材料等12.大型工

5、作臺:其高度應方便配制工作。13.藥品柜:用于放置常用藥品。14.解剖鏡：種類較多，用于分離微莖尖可采用雙筒實體解剖鏡。解剖鏡上帶有照相裝置，根據(jù)需要隨時對所需材料進行攝影記錄。2021/7/8172021/7/818（二）小型用品1．鑷子類(forceps)常應用醫(yī)療上的鑷子,根據(jù)操作需要有各種類型2．剪刀類(scissors)可采用醫(yī)療五官科用的中型剪刀。主要用于切斷莖段、葉片等。也可以用彎形剪刀，由于其頭部彎曲，可以深入到瓶口中進行剪切。2021/7/8193.解剖刀:切割較小材料和分離莖尖分生組織時，可用解剖刀。刀片要經(jīng)常調(diào)換，使之保持鋒利狀態(tài)，否則切割時會造成擠壓，引起周圍

6、細胞組織大量死亡，影響培養(yǎng)效果。4.解剖針:解剖針可深入到培養(yǎng)瓶中，轉(zhuǎn)移細胞或愈傷組織。也可用于分離微莖尖的幼葉，可以自制。1.組培瓶（玻璃）---要求透光度好，能耐高壓高溫,以試管、三角瓶、培養(yǎng)皿等使用較多。2.三角錐瓶---適用于各種培養(yǎng)（如固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)、大規(guī)模培養(yǎng)或一般培養(yǎng)）。3.培養(yǎng)皿---適于作單細胞的固體平板培養(yǎng)、胚和花藥培養(yǎng)和無菌發(fā)芽。4.試管---適合于用少量培養(yǎng)基及試驗各種不同配方時選用。2021/7/820（三）玻璃器皿5.培養(yǎng)器皿還可就地取材，采用一些代用品。工廠化生產(chǎn)可采用廣口的200ml罐頭瓶。6.培養(yǎng)容器和制備培養(yǎng)基所需的玻璃器皿逐漸被塑料器皿所代替

7、。塑料容器具有質(zhì)輕、透明、不易破碎、成本低等優(yōu)點。7.瓶口封塞可用多種方法，要具有一定的通氣性和密閉性，以防止培養(yǎng)基干燥和雜菌污染。現(xiàn)在多采用聚丙烯塑料薄膜作為封口,為了增加通氣性，可在里面襯一層硫酸紙或牛皮紙.也可采用專用的封口膜。2021/7/821在組織培養(yǎng)中配制培養(yǎng)基，貯藏母液，材料的消毒等需要各種化學實驗用的玻璃器皿.包括各種型號的燒杯、量筒、移液管、試劑瓶、容量瓶、、試管以及移液管架、酒精、玻璃棒、滴瓶等等。2021/7/822第三節(jié)培養(yǎng)條件在