高三生物二輪復(fù)習(xí)基因工程(一)(選修3)

高三生物二輪復(fù)習(xí)基因工程(一)(選修3)

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1、現(xiàn)代生物技術(shù)基因工程(一)1.某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后,與用BamHI酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌,結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?;卮鹣铝袉栴}:(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本

2、條件有__________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。而作為基因表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動(dòng)子和終止子。(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的,其原因是__________________________________________________________________并且______________和______________的細(xì)胞也是不能區(qū)分的,其原因

3、是_____________。在上述篩選的基礎(chǔ)上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落,還需使用含有原因是_______________________________________________的固體培養(yǎng)基。(3)基因工程中,某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DNA復(fù)制所需的原料來自于_____________2.圖(a)中的三個(gè)DNA片段上以此表示出了EcoRI、BamHI和Sau3AI三種限制性內(nèi)切酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn),圖(b)為某種表達(dá)載體示意圖(載體上的EcoRI、Sa

4、u3AI的切點(diǎn)是唯一的)。5根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí),回答下列問題:(1)經(jīng)BamHI酶切割得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被____________酶切后的產(chǎn)物連接,理由是____________。(2)若某人利用圖(b)所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子,如圖(c)所示。這三種重組子中,不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有____________,不能表達(dá)的原因是____________________________________________________________

5、______________________。(3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶,常見的有____________和____________,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是____________。3.下表是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn),圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn),其中切割位點(diǎn)相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請回答下列問題:5(1)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,應(yīng)選用______兩種限制酶切割,酶切后的載體和目的基因片段,通過__________酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增

6、重組質(zhì)粒,需將其轉(zhuǎn)入處于__________________態(tài)的大腸桿菌。(2)為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加__________,平板上長出的菌落,常用PCR鑒定,所用的引物組成為圖2中_____________。(3)若BamHI酶切的DNA末端與BclI酶切的DNA末端連接,連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為,對(duì)于該部位,這兩種酶(填“都能”、“都不能”或“只有一種能”)切開。(4)若用Sau3AI切圖1質(zhì)粒最多可能獲得種大小不同的DNA片段。4.已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)(P

7、),該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,由305個(gè)氨基酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸,240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸,改變后的蛋白質(zhì)(P1)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性?;卮鹣铝袉栴}:⑴從上述資料可知,若要改變蛋白質(zhì)的功能,可以考慮對(duì)蛋白質(zhì)的進(jìn)行改造。⑵以P基因序列為基礎(chǔ),獲得P1基因的途徑有修飾基因或合成基因。所獲得的基因表達(dá)時(shí)是遵循中心法則的,中心法則的全部內(nèi)容包括的復(fù)制;以及遺傳信息在不同分子之間的流動(dòng),即:。⑶蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程,其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā),

8、通過和,進(jìn)而確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列,據(jù)此獲得基因,再經(jīng)表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì),之后還需要對(duì)蛋白質(zhì)的生物進(jìn)行鑒定。5.[生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題]HIV屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒,是艾滋病的病原體?;卮鹣铝袉栴}:(1)用基因工程方法制備HIV的某蛋白(目的蛋白)時(shí),可先提取HIV中的5,以其作為模板,在的作用下合成。獲取該目的蛋白的基因,構(gòu)建重組表達(dá)載體,隨后導(dǎo)入受體細(xì)胞。(2)從受體細(xì)胞中分離純化出目的蛋白,該蛋白作為抗原注入機(jī)體后,刺激機(jī)體

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