高三生物二輪復習基因工程(二)(選修3)

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1、基因工程(二)1.纖維素分子不能進入酵母細胞,為了使酵母菌能夠利用環(huán)境中的纖維素為原料生產酒精,構建了含3種不同基因片段的重組質粒,下面是酵母菌轉化及纖維素酶在工程菌內合成與運輸?shù)氖疽鈭D。據(jù)圖回答:(1)本研究構建重組質粒時看選用四種限制酶,其識別序列如下圖,為防止酶切片段的自身環(huán)接,可選用的限制酶組合是______或__________(2)設置菌株Ⅰ為對照,是為了驗證__________________________________不攜帶纖維素酶基因。(3)纖維素酶基因的表達包括__________和__________過程,與菌株Ⅱ相比,在菌株Ⅲ、Ⅳ

2、中參與纖維素酶合成和分泌的細胞器還有______________________________。(4)在以纖維素為唯一C源的培養(yǎng)基上分別培養(yǎng)菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,菌株___________不能存活,原因是________________________________________________________________________________。(5)酵母菌生產酒精的細胞部位是___________,產生酒精時細胞的呼吸方式是___________,在利用纖維素生產酒精時,菌株Ⅳ更具有優(yōu)勢,因為導入的中重組質粒含有____________。使分

3、泌的纖維素酶固定于細胞壁,減少因培養(yǎng)液更新而造成的酶的流失,提高酶的利用率。52.胰島素A、B鏈分別表達法是生產胰島素的方法之一。圖1是該方法所用的基因表達載體,圖2表示利用大腸桿菌作為工程菌生產人胰島素的基本流程(融合蛋白A、B分別表示β-半乳糖苷酶與胰島素A、B鏈融合的蛋白)。請回答下列問題:(1)圖1基因表達載體中沒有標注出來的基本結構是_________。(2)圖1中啟動子是_________酶識別和結合的部位,有了它才能啟動目的基因的表達;氨芐青霉素抗性基因的作用是__________________________________________

4、____________________。(3)構建基因表達載體時必需的工具酶有____________________________________________。(4)β-半乳糖苷酶與胰島素A鏈或B鏈融合表達,可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點隱藏在內部,其意義在于_____________________________________________________________________。(5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,用溴化氰處理相應的融合蛋白能獲得完整的A鏈或B鏈,且β-半乳糖苷酶被切成多個肽段,這是因為________

5、_________________________。5(6)根據(jù)圖2中胰島素的結構,請推測每個胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量。你的推測結果是_________,理由是_________________________________________________________________。3.將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因導入棉花細胞中,可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉,其過程如下圖所示(注:農桿菌中Ti質拉上只有T-DNA片段能轉移到植物細胞中)。(1)過程①需用同種____酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切。為將過程②獲得的含重組質粒的農桿菌篩選出來,

6、應使用____培養(yǎng)基。(2)過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓__進入棉花細胞;除盡農桿菌后,還須轉接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),目的是___________________________________。(3)若過程④僅獲得大量的根,則應在培養(yǎng)基中增加_____________________以獲得芽;部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽也能長根,原因是________________________________________________。(4)檢驗轉基因棉的抗蟲性狀,常用方法是________________________。種植轉

7、基因抗蟲棉能減少___的使用,以減輕環(huán)境污染。4.[生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題](15分)植物甲具有極強的耐旱性,其耐旱性與某個基因有關。若從該植物中獲得該耐旱基因,并將其轉移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性?;卮鹣铝袉栴}:(1)理論上,基因組文庫含有生物的基因;而cDNA文庫中含有生物的基因。5(2)若要從植物甲中獲得耐旱基因,可首先建立該植物的基因組文庫,再從中出所需的耐旱基因。(3)將耐旱基因導入農桿菌,并通過農桿菌轉化法將其導入植物的體細胞中,經(jīng)過一系列的過程得到再生植株。要確認該耐旱基因是否在再生植株中正確表達,應檢測此再生植株中

8、該基因的___________,如果檢測結果呈陽性,

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