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《紫莖澤蘭種群空間遺傳結(jié)構(gòu)研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、紫莖澤蘭種群空間遺傳結(jié)構(gòu)研究摘要：選取云南省境內(nèi)怒江流域北段作為研究區(qū)域，采用SSR分子標記技術，對研究區(qū)域內(nèi)的22個紫莖澤蘭種群的遺傳多樣性和種群遺傳結(jié)構(gòu)進行了實驗分析。實驗從60對SSR引物中篩選出3對多態(tài)性引物進行擴增，采用0/1法讀取條帶。3對SSR引物一共擴增出136個條帶，共檢測到38個特異性條帶，每對SSR引物檢測出的多態(tài)性條帶平均為12.6o采用GenAlEx6.2、Structure2.3.3>NTSYS-PC軟件進行分析，得出:22個紫莖澤蘭種群間遺傳多樣性較高，種群水平上的多態(tài)位點百分率(P)為71.21%,Shannon信息
2、指數(shù)(I)為0.280,Nei基因多樣性指數(shù)(H)為0.176,等位基因數(shù)(Na)為1.712,有效等位基因數(shù)(No)為1.280。通過UPGMA聚類和貝葉斯聚類分析均顯示出三個區(qū)域的種群遺傳差異。關鍵詞：紫莖澤蘭；遺傳結(jié)構(gòu)；怒江；微衛(wèi)星標記中圖分類號：S451文獻標識碼：A文章編號：16749944(2017)050009051引言紫莖澤蘭(AgeratinaadenophoraR.M.King&H.Robinson),英文名Croftonweed,俗稱解放草、霸王草、破壞草等，菊科(Compositae)紫莖澤蘭屬(AgeratinaSpach
3、)[《屮國植物志》(第76卷第1分冊)屮曾置于澤蘭屬(EupatoriumLin.),學名為EupatoriumcoolcstinumLin.]的一種多年生從生狀亞灌木草本植物(King&Robinson,1970)[1,2]。紫莖澤蘭是一種危害嚴重的世界性惡性雜草［3］,20世紀中期該雜草由中緬邊境傳入我國云南南部，之后迅速擴散至西南及華南地區(qū)，并仍以每年幾十公里的速度向內(nèi)陸蔓延擴散，成為我國最為嚴重的入侵物種之一。空間遺傳結(jié)構(gòu)決定了種群的適應能力和進化潛力［4］,植物種群生存環(huán)境的差異導致了種群的特定空間遺傳結(jié)構(gòu)［5,6］。不同地區(qū)溫度、濕度等
4、條件不同，對植物產(chǎn)牛的選擇壓力也將不同，這是導致植物遺傳結(jié)構(gòu)隨地區(qū)變化的主要原因。由于在怒江流域所采集的紫莖澤蘭種群是沿怒江河谷從南至北的緯度梯度和沿高黎貢山及碧羅雪山從低到高的海拔梯度分布的，不同緯度梯度和不同海拔梯度下環(huán)境因素有所差異，不斷地對紫莖澤蘭產(chǎn)生選擇壓力。同時，高黎貢山和碧羅雪山的地理屏障阻礙了兩側(cè)山面間種群的擴散，一定程度上阻礙了基因交流。然而，怒江河谷的水流、茶馬古道以及道路的修建等人類活動卻促進了紫莖澤蘭種群間的基因交流，并擴大了種群的擴散范圍。以上這些環(huán)境因素和人為干擾都會影響怒江河谷內(nèi)和高黎貢山及碧羅雪山紫莖澤蘭種群的空間遺
5、傳結(jié)構(gòu)。因此，對于紫莖澤蘭入侵種群遺傳結(jié)構(gòu)的研究有助于了解紫莖澤蘭對環(huán)境的適應性以及其傳播途徑和傳播方式，并為紫莖澤蘭的防控提供一定的科學依據(jù)。2材料和方法2.1材料紫莖澤蘭于2013年4月采集于怒江河谷（10個種群）以及高黎貢山百花嶺（6個種群）和碧羅雪山知子羅（6個種群），共22個種群。在野外，沿著怒江河谷和河谷東西兩座山（高黎貢山、碧羅雪山）不同海拔梯度采樣。河谷內(nèi)按縣區(qū)域大小每個縣設置1?2個釆樣點,海拔毎間隔100?200ni為一個采樣點，每個采樣點設為一個種群，每個種群取24個個體單株間相距約50m,將整株紫莖澤蘭連根拔起，剪掉植株上部
6、的莖葉，并盡量保留根部土壤，編號單株保存，同時每個對應的植株采集5?10片新葉,密封后用變色硅膠干燥處理，根部帶回來后迅速轉(zhuǎn)移到溫室屮及時進行定植。采樣時利用GPS定位系統(tǒng)定位，同時記錄每一個采樣點的經(jīng)緯度、海拔、生境以及分布情況。將上述22個種群的紫莖澤蘭硅膠干燥樣作為預實驗材料，根莖在溫室中建立實驗種群，每個盆種植一個植株，定期澆水，待萌發(fā)出新葉即可采集提取DNAo2.2方法木研究采用改進的CTAB法(參照Doyle(1987)[7]CTAB法)提取紫莖澤蘭DNA,用瓊脂糖凝膠電泳對所有樣品的基因組DNA進行檢測。紫莖澤蘭SSR-PCR選擇性擴
7、增采用20uL的反應體系：dNTP(0.2mM)1.6uL,MgC121.6uL,10XBuffer2uL,引物1和引物2(10uM)各為0.5pL,TaqDNA聚合酶(5.0U/PL)0.1uL,DNA模板(60ng/PL)1uL,ddH2012.7uLo單個位點的反應程序為：94°C預變性5min；94°C變性30s,50?60°C退火30s,72°C延伸5min,共35個循環(huán)后72°C延伸5min,4°C保溫。擴增結(jié)束，進行PAGE(聚丙烯酰胺)凝膠電泳檢測，凝膠成像，然后通過0/1法讀取聚丙烯酰胺凝膠電泳的檢測結(jié)果。2.3數(shù)據(jù)分析在特定的S
8、SR位點上，測定每一供試樣品的等位基因組成，電泳資料采用0/1二維數(shù)據(jù)矩陣的方法錄入電腦，有帶記錄為1,無帶記為0。利用G
