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1、第二節(jié)?腸道病毒71型（EV71）作者：李蘭娟出版社：浙江科學(xué)技術(shù)出版社????????腸道病毒71型（EV71）屬于小RNA病毒科（Picornaradae）腸道病毒屬（Enterovirus）的成員，歸屬于人類腸道病毒A。1974年Schmidt等人首次報(bào)道從美國加利福尼亞暴發(fā)的表現(xiàn)為神經(jīng)系統(tǒng)癥狀疾?。?969～1973年）的患者中分離到EV71，隨后，世界上許多國家相繼報(bào)道了EV71病毒在不同地區(qū)的流行情況，EV71病毒已在世界范圍內(nèi)引起多次暴發(fā)與流行，人們逐漸認(rèn)識(shí)到EV71病毒是手足口病的
2、主要病原。目前已知EV71的感染可以導(dǎo)致手足口病、皰疹性咽峽炎、無菌性腦膜炎（asepicmeningitis）、腦炎（encephalitis）和脊髓灰質(zhì)炎樣的麻痹性疾病（poliomyelitis-likeparalysis）等多種與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的疾病。EV71可導(dǎo)致大范圍的暴發(fā)流行，可伴有嚴(yán)重的CNS并發(fā)癥或致死性肺水腫。近年來，EV71病毒的流行在亞太地區(qū)呈上升趨勢，1975年保加利亞大流行,共有705名患兒感染，死亡44例；1997年馬來西亞大流行感染2628人，死亡30多人；1998年
3、，臺(tái)灣地區(qū)暴發(fā)EV71的大流行，約有12萬以上的人被感染，死亡78人。因此，有關(guān)EV71的病毒生物學(xué)特性、致病機(jī)理、診斷和預(yù)防等的研究日益受到人們的重視。????????一、病毒的一般特征?????（一）病毒顆粒結(jié)構(gòu)???????該病毒的顆粒為二十面體立體對稱的球形結(jié)構(gòu)，無包膜和突出，直徑約24～30nm，核酸為單股正鏈RNA。如同其他腸道病毒屬成員一樣，EV71型病毒基因組編碼的分子量分別為34KD、30KD、26KD和7KD的多肽VP1(α)、VP2（β）、VP3（γ）、VP4（δ），構(gòu)成原聚
4、體，后者再拼裝成具有五聚體樣結(jié)構(gòu)的亞單位（pentamericunit），60個(gè)亞單位通過各自的結(jié)構(gòu)域相互連接，最終形成病毒的外殼。VP1、VP2和VP3三個(gè)多肽暴露在病毒外殼的表面，而VP4包埋在病毒外殼的內(nèi)側(cè)與病毒核心緊密連接，因而抗原決定簇基本上位于VP1-VP3上。EV71病毒由于沒有類脂膜，所以它對乙醚、脫氧膽酸鹽、去污劑以及弱酸有抵抗性。此外，該病毒還能抵抗70％乙醇和5％甲酚皂溶液等常見的消毒劑，但是高溫（56℃，30min）處理和紫外線照射可以很快將病毒滅活，它對各種氧化劑如高錳酸
5、鉀、雙氧水、漂白粉等也很敏感。??????（二）基因組結(jié)構(gòu)??????EV71病毒的基因組為含有大約7411個(gè)核苷酸（7423/MS/87株）的單股正鏈RNA，腺嘌呤核苷酸和尿嘧啶核苷酸豐富（A+U=52.8）。RNA中僅有一個(gè)開放閱讀框（ORF），編碼含2194個(gè)氨基酸的多聚蛋白，在其兩側(cè)為5′和3′非編碼區(qū)（UTRs），它與其他腸道RNA病毒一樣，在3′末端有多聚腺苷酸（polyA）尾，而其5′末端共價(jià)結(jié)合有一個(gè)小分子量的蛋白（VPg）。病毒的單鏈RNA具有感染性（病毒裸露RNA的感染性僅為病
6、毒顆粒的百萬分之一），如果去除3′末端的多聚腺苷酸尾或基因組出現(xiàn)斷裂，感染性便消失。相對而言，其5′末端連接的蛋白質(zhì)對病毒的感染性沒有明顯的影響。???????????????EV71基因結(jié)構(gòu)圖????????(中國疾病預(yù)防控制中心提供)????????該病毒的基因組從5′末端至3′末端依次排列著含有746個(gè)核苷酸的5′非編碼區(qū)（untranslation?region，UTR）、編碼區(qū)1A（多肽VP4)、1B(多肽VP2)、1C(多肽VP3)、1D(多肽VP1)、2A（特異性蛋白酶）、2B、2C
7、、3A、VPg（5′末端結(jié)合蛋白）、3C(特異性蛋白酶)、3D(RNA多聚酶組分)、3′末端非編碼區(qū)（83個(gè)核苷酸）以及多聚腺苷酸尾（AAAn）。病毒RNA正鏈和負(fù)鏈的5′末端和3′末端非編碼區(qū)中分別含有多肽翻譯的起始信號(hào)以及RNA合成的起始信號(hào)，VPg蛋白通過其酪氨酸殘基的羥基基團(tuán)與RNA5′末端的pUpU形成的磷酸二酯鍵與基因組RNA結(jié)合。????????5'UTR通常折疊成多個(gè)特異性的空間結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)通過與宿主細(xì)胞蛋白因子的結(jié)合在起始病毒基因組RNA的合成以及病毒蛋白的翻譯過程中發(fā)揮重要作
8、用，此外，5'UTR結(jié)構(gòu)還涉及病毒的宿主范圍和病毒的毒力等多個(gè)方面的功能。EV71病毒基因組3'UTR區(qū)和多聚腺苷酸尾的功能目前尚不清楚，但是對EV71病毒處在同一屬的其他成員（如脊髓灰質(zhì)炎病毒）基因組尾端多聚腺苷酸的研究發(fā)現(xiàn)，如果減少病毒基因組尾端多聚腺苷酸的長度，會(huì)降低病毒的感染性。???????（三）EV71病毒基因分型研究????????EV71病毒衣殼蛋白VP1是該病毒主要的中和決定因子，它直接決定病毒的抗原性。VP1基因具有與病毒血清型完全對應(yīng)的遺傳多樣性，VP1基因序
